Mișcarea bacteriilor și spirochete pot fi observate în câmpul întunecat, care diferă de lumină-bom preparat convențional de iluminat od. În acest caz, utilizați o lumină laterală, prin care se obține o imagine, Gosia obiect luminos pe un fundal întunecat. Principiul câmpului întunecat se bazează pe faptul că razele de lumină sunt deviate particulele dense care se încadrează într-o parte (cum ar fi microbi) și ultimul prin acest ochi al observatorului sunt reprezentate de luminoase. Bo iluminat kovoe la microscop poate fi obținut prin înlocuirea, iluminator convențional condensator special cu umbrire în centru. O astfel de condensator ține toate razele de lumină centrală și trece doar periferic (Fig.3). In schimb, un condensator așternut special pentru câmp întunecat poate utiliza convențional iluminant-lem, între cele două lentile este inserat în cerc negru Bu magi diametru ceva mai mic decât obiectivul. Trebuie să lucrăm cu o sursă de lumină puternică (lampă cu arc sau lampoch normale Coy 200-300 lumânări). Echipamentul de cercetare este după cum urmează. Aplicat pe o lamelă de sticlă și o picătură de material este atent acoperit cu un capac de sticlă, pentru a evita bule de gaz-ing. Apoi, suprafața a fost plasată o picătură de ulei de apă din condensator sau pin, iar glisiera cu preparatul este introdus pe picătură.
Medicamentul este considerată fie printr-un sistem uscat puternic (lentilă 40), sau printr-un sistem de scufundare. În acest din urmă caz, geamul de acoperire este aplicat ca o picătură de ulei de cedru, și la un manson imersiune mic înșurubată - dia-phragma pentru a reduce lentila diametrului lumenului.
Atunci când această metodă de fascicule luminoase de microscopie un obiect, nu intra in lentila microscopului, câmpul vizual rămâne întunecat și obiectul în contextul său pare iluminat (fig. 4). efect darkfield este creat folosind un condensator special (paraboloid sau cardioid) sau un condensator convențional cu un cerc ascuns de partea centrală hârtie neagră.
Pentru observarea într-un set de lumină câmp întunecat și preț-Trier atât câmp luminos și înlocuirea condensatorului-spe cial, se adaugă ușor la maxim, dezvelirea eșecului dia-Phragmen inclusiv reostate și iluminator.
Formulările pentru cercetarea în domeniul întunecat ar trebui să fie fierte la o coverslips foarte curat și supus anumită grosime: subiect - nu mai mult de 1,2 mm, cu acoperire VASTE - 0,17 mm. Se prepară tipul de drog „zdrobit“ sau „agățat“ picături (Fig. 5). Între preparare și condensator a fost introdus ulei de imersie (picătură este aplicat lentila superioară a condensatorului). Apoi, ridicarea și coborârea condensatorului atinge aspectul câmpului de vedere al locului de lumină, care utilizează un control de suspensie speciale șuruburi de ieșire rovochnyh condensatorului în mijlocul câmpului vizual. Apoi, utilizați muta dreptul de a crește de supraveghere.
microscopie de contrast de fază și anoptralnaya
Faza microscop cu contrast îmbunătățește dramatic obiecte contra-stnost, care sunt permeabile la lumină, și în medicină este utilizările pentru studiul preparatelor native. Cu această metodă, poate fi studiat fără tratare prealabilă obiecte incolore, transparente, detalii, structura care op-pic diferă în vedere genetic.
Preparatele pictate absorb parțial lumină. Fasciculul de lumină care trece printr-o astfel de formulare pierde în intensitate, adică Aceasta scade amplitudinea undei de lumină, și este ușor de detectat de către ochiul cercetătorului. Astfel de preparate contrast chiar și într-un microscop normal și sunt numite „amplitudine-TION.“ Medicamentele care nu absorb lumina, transparent. Un fascicul de lumina care trece printr-o astfel de pregătire, nu-și pierde în intensitate. Amplitudinea undei de lumină nu este schimbat, dar se schimbă doar faza de oscilație, care nu este înregistrat ochi-cheloveche glet. Astfel de obiecte sunt numite faze. Aceste otno-syatsya Preparate vii, necolorate. Pentru a mări imaginea contra-stnost, este necesar să se transforme schimbarea de fază în amplitudine. Acest lucru este realizat prin plasarea lentile în placa de fază sub formă de inele circulare și cu ajutorul diafragmei. Fiecare lentilă are propria deschidere. Imaginea acestei deschidere coincide cu lentila corespunzătoare inelul pla-faza stinki. Metoda de contrast de fază poate fi pozitiv sau negativ. In primul caz, pe o imagine de fundal câmp întunecat lumina obiectului se observă, în timp ce în al doilea fundalul este întunecat și subiectul este luminos. Cele mai bune rezultate sunt observate în cazul unui contrast pozitiv.
Propagarea undelor de lumină în mod transparent obiecte omogene nu este însoțită de o pierdere de intensitate a luminii. Schimbări Me rată numai când fluxul luminos care trece prin obiect în raport cu viteza de propagare a luminii în mediul înconjurător. Acesta va fi mai mare sau mai mică, în funcție de faptul dacă indicele de refracție al obiectului, respectiv mai mică sau mai mare decât în mediul înconjurător. Aceste modificări, numite faze-mye în caz contrar, deoarece acestea schimba doar faza la oscilații ale luminii transmise, caracteristice majorității obiectelor biologice-cal (celule vii, secțiuni de țesut și așa mai departe. N.).
Ochiul uman detectează schimbările bine ness intensitatea luminii care vine prin pasajul vopsit (amplitudinea) medicamente atunci când schimbă amplitudinea luminii de oscilație. Cu toate acestea, ochiul nu poate percepe faza de schimbare TION a luminii. Prin urmare, transparent-contrast (fază) Ob-JECTS în studiul microscopic convențional sunt non-vizibile.
Pentru a lucra la metoda de contrast de fază este necesară, în plus față de microscop biologic convențional, au un alt dispozitiv special. Dispozitiv de instalare produs după cum urmează Obra Zoom. lentile condensator și înlocuiți fază. Faza condensator-SOR cotitură disc rotativ este setat la 0. Această poziție corespunde cu condensatorul svetopolnomu obișnuit. Apoi, punând pe scena de pregătire și să se concentreze-l, se procedează la înființarea de iluminat. In faza de studiu de contrast meto-house condiție de bază este o iluminare optimă Nye, care se realizează prin setarea luminii Koehler. După aceea montat pe numărul discului revolver care corespunde obiectivului selectat; de exemplu, atunci când obiectivul 40 setat în fereastra 40. Luând figura ocularul, montat la locul său microscop auxiliar și reglați-l la o imagine a două inele (Col tsevaya diafragmă condensatorului și o placă de fază). Centro-paid-unitate condensator atinge inele de aliniere. Înlocuirea unui ocular microscop auxiliar poate fi Produ-dit studiu de droguri.
Metoda de contrast anoptralnogo este o îmbunătățire a metodei de contrast de fază. Studii teoretice și caracteristici constructive anoptralnogo dispozitive practic nu diferă de unitatea de contrast de fază convențional (Fig. 6). Principiul structurii sale este după cum urmează. Pe suprafața superioară a imersare obiectiv penultima lentilă inel de negru de fum aplicat, transmițând doar aproximativ 10% din lumina transmisă. În planul focal frontal al con densora diafragmă inelară este plasată, o imagine care trebuie să coincidă complet cu inelul de funingine de pe obiectiv. Pre-Paratov iluminate con plin de raze care trec prin orificiul inelar al condensatorului. În absența unor obiecte (de exemplu, microbii din produs), în obiectiv cad doar grinzi undiffracted a căror amplitudine, după ce trec prin inelul de funingine este redus cu 90%. În același timp, amplitudinea razelor difractate de particulele de obiecte care vor trece de la inelele de funingine, nu se schimbă și, prin urmare, fundal câmp va fi închis, iar particulele de lumina obiectului. Pre-metoda de microscopie anoptralnoy proprietate este o lentilă de rezoluție durere-Shai și capacitatea de a identifica împăcării a diferențelor minime de densitate optică în preparatele NeoKril-shennyh. Cea mai mare densitatea optică a obiectului, luminoasă imaginea lui. Metode de utilizare aranjați-TION nu diferă de contrastul de fază. Cu anoptralnogo microscop poate fi studiat morfo-ogy și localizarea nucleoizii (unitate de bază), pentru a observa schimbările în morfologia bacteriilor în creșterea normală și reproducere.