Pentru a izola proteinele din soluție sau despicate proteine ale proprietăților fizico-chimice un factor sau ambele este suficientă pentru a elimina asigurarea solubilității lor - încărcare și coajă de hidratare.
Proteinele pot fi îndepărtate din soluția
Deoarece solubilitatea proteinelor depinde de ei, dispariția unuia sau ambilor acești factori conduce la precipitarea completa sau partiala a proteinei și, desigur, la pierderea funcției sale. Unele metode de depunere a face posibilă restaurarea ulterior proprietățile native și a proteinelor de performanță.
precipitarea proteinei Reversibilitatea este cauzată de reținerea structurii primare a proteinei. Restaurarea proprietăților biologice ale proteinei numite renativatsiya (renaturare) fizice, chimice și. Uneori renativatsii pur și simplu eliminați agent de deteriorare.
denaturarea proteinei
Denaturarea - precipitarea proteinelor ireversibile datorită ruperii legăturilor care stabilizează cuaternar. terțiară. Structura secundară proteine, urmată de o schimbare a solubilității. vâscozitatea, activitatea chimică, reducerea sau pierderea completă a funcției biologice.
Denaturarea fizică
Determină o creștere a temperaturii, radiații ultraviolete și microunde, prin acțiune mecanică, ionizare particule încărcate.
denaturarea chimică
Aceasta depinde de natura agentului de denaturare:
- Acizii și bazele formează legături de hidrogen cu grupe de peptide;
- solvenți organici formează legături de hidrogen și provoca deshidratare;
- Alcaloizi formează legături cu grupări polare și sistem ruperea hidrogenului și legături ionice;
- metale grele interacționează cu radicalii încărcate, sarcini negative neutralizați și sistemul de rupere de hidrogen și legături ionice.
La un efect de denaturare chimică are la bază un pic mai în vârstă, dar testul timol simplu și intuitiv și probă Veltman. utilizate în diagnosticul clinic și de laborator pentru evaluarea stării metabolismului proteic.
sărare
Desalinizării - este adăugarea de proteină la o soluție de săruri neutre (Na2 SO4 (NH4) 2 SO4.). desalinizării mecanism cuprinde reacția anioni (SO4 2-) și cationi (Na +, NH4 +) cu încărcătura proteinei (grupa NH4 + și COO -). Ca urmare, taxa dispare, și, în consecință, repulsia reciprocă a moleculelor dispare. În același timp, a redus drastic coajă hidrat. Toate acestea conduc la molecule „blocare“ și depunerea.
Deoarece proteinele plasmatice din sânge diferă în mărime, încărcare, structura, este posibil să se ridica astfel de cantități de sare, ceea ce va provoca precipitarea proteinelor mai puțin stabile, în timp ce altele încă vor fi dizolvate.
De exemplu, mai devreme în scopurile de diagnostic, determinată prin raportul dintre fracțiuni proteice, albumină / globulină în plasma sanguină. Albumine ca mai multe molecule polare rămân în soluție la o soluție de saturație de 50% este săruri neutre, în timp ce globuline în aceste condiții au precipitat. In mod normal, raportul dintre albumina plasmatică / globulină egal cu 1,2-1,8.
Depunerea unui agent de deshidratare
Când adăugați agenți de deshidratare (acetonă, etanol) se produce retragerea din învelișul de hidratare al proteinei, dar nu percepe. Solubilitatea este oarecum redus, dar Denaturarea nu se produce. De exemplu, acesta este efectul antiseptic al etanolului.
Modificarea pH-ului
Soft schimbarea pH-ului la punctul izoelectric al proteinei conduce la dispariția taxei, reducerea simultană a învelișului hidrat și, în consecință, reduce solubilitatea moleculei.