Microscopica (bacterioscopic) metoda de cercetare - un set de metode și morfologice studiul tinctoriale (abilitatea de a fi colorat) de microbi din proprietățile materialului de testat (cultura de laborator, materiale patologice, mostre de mediu) prin microscopie. Principalul obiectiv - stabilirea etiologia bolii, identificarea morfologică, precum și determinarea purității culturii pure izolate. In practica de laborator, utilizarea următoarelor tipuri de preparate microscopice: a) tampon bacteriologic (preparare frotiu); b) „picătură agățat“; c) „împovărat picătură“; g) frotiu subțire; d) "film gros"; g) medicament-mark.
1. Materialul de gard (puroi, spută, sânge, urină, fecale, spălările și stomac bronșic, lichid cefalo-rahidian, conținutul fosele nazale, vagin etc. materialul cadaveric.).
2. Transportul de material.
3. micropreparatelor Pregătirea, fixare și colorare (dacă este necesar).
4. Evaluarea Microscopia cu forma, mărimea, aranjamentul reciproc al microbilor, etc.
Metoda de evaluare. Metoda este simplă, disponibilă pe scară largă, rapid, cost-eficiente, dar nu foarte sensibil
(Aproximativ 10 4 -10 5 bacterii pe ml) și specifice (datorită similitudinii morfologiei
microorganisme din diferite specii), nu prezintă siguranță.
2. microscopia de lumină. Principii simple dispozitiv cu contrast de fază, cu fond negru, microscop fluorescent și utilizarea lor în microbiologie. Tehnica de imersiune micro-spectroscopie.
Dimensiunile de microbi care au o structură celulară constituie 0,2 - 20 microni (de obicei 0,5 - 10 microni) și sunt detectate cu ușurință la microscop imersie. Virusurile sunt de multe ori mai puțin. Diametrul cel mai mare dintre ele, cum ar fi virusul variolei, aproximativ 300 nm, în timp ce cea mai mică este de 20 - 30 nm. Având în vedere acest lucru pentru detectarea virușilor folosind microscopul electronic. Studiul microbiologic folosit lumina si microscopie electronica; metode de microscopie optică și electronică.
microscop optic. Cea mai importantă parte a microscopului optic sunt lentile care în conformitate cu metoda de utilizare și de mărire zoom sunt împărțite în uscat și imersie. Lentile uscate cu o lungime focală relativ mare și o creștere slabă aplicate la studiul microorganismelor cu dimensiuni mari (mai mult de 10 - 20 microni), imersiune cu o distanta focala de 1,5 - 3 mm - mai mici în studiu
Când lentila microscopie de imersie X90 condiție este imersiunea în cedru, piersic, sau în absența acestuia în ulei vaselina, indicii de refracție ai care sunt aproape de slide, ceea ce face pregătirile (frotiu). În acest caz, fasciculul de lumină incident medicamentul nu este dispersată și fără a schimba direcția, intră în obiectivul de imersie. Puterea de rezoluție a microscopului de imersie este la 0,2 micrometri, iar creșterea maximă obiect ajunge la 1350.
La utilizarea obiectiv de imersie centrată inițial parte optică a microscopului. Dacă microscopul tub de alunecare, este setat la o lungime de 160 mm, atunci condensatorul este ridicat la nivelul etapei, deschiderea diafragmei și montat lentila x8 cu ajutorul oglinzii plane iluminarea câmpului vizual. Pe o lamelă de sticlă, cu un preparat pătate aplicat o picătură de ulei în care obiectivul este cufundat ușor în ochi de control, și apoi, ridicând tubul, priviți prin ocular și primul macro și apoi microscrews stabili o imagine clară a obiectului. La capătul tubului de ridicare, îndepărtați de droguri, mușama a fost îndepărtat din partea frontală a obiectivului, acesta este retras spre și de la cabine opus masa de obiect.
microscopie pe fond întunecat. câmp întunecat Microscopie vizual bazat pe fenomenul de difracție a luminii, cu o iluminare laterală puternică suspendate într-un lichid de particule mai mici (efectul Tyndall). Acest lucru se realizează cu ajutorul aburului boloid- sau cardioid condensator, care înlocuiește condensatorul convențional într-un microscop biologic.
microscopie cu contrast de fază. Pe baza schimbărilor de transformare de fază care apar în timpul trecerii unui val de lumină prin obiect așa-numita fază (transparent), modificări ale amplitudinii sunt detectate ochi. Utilizarea de contrast de fază schimbare de fază de adaptare a undelor de lumină care trec prin obiect, conv-schayutsya în amplitudine și transparente, obiectele devin vizibile la microscop. Procedând astfel, ele dobândesc o imagine cu contrast ridicat, care poate fi pozitiv sau negativ. imagine cu contrast de fază pozitivă a obiectului se numește întuneric într-un câmp vizual luminos, negativ contrast de fază inaccesibile - imaginea lumina obiectului pe un fundal întunecat.
Pentru microscopie cu contrast de fază, utilizând un microscop convențional și adaptările suplimentare cu contrast de faza de CF-1 sau KF4.
Luminescent (sau fluorescente) microscopie. Ea se bazează pe fenomenul de fotoluminiscenta. Primar (sit) observarea luminiscenței Xia fără colorare a obiectului, cele secundare (induse) are loc după vopsire preparate speciale-TION vopsele luminescente - fluorocromi. microscopie fluorescentă în comparație cu metodele convenționale prezintă o serie de avantaje: depozite studii posibilitate de microorganisme vii și detectarea acestora în materialul în concentrații scăzute, datorită gradului ridicat de contrast.
In practica de laborator, microscopie de fluorescenta este larg utilizat pentru detectarea și studiul multor microorganisme.
3. Tipurile de probe microscopice. Etape fixe pregătire frotiu. Culoare Meto-dy simplă.
In practica de laborator, utilizarea următoarelor tipuri de preparate microscopice: a) tampon bacteriologic (preparare frotiu); b) „picătură agățat“; c) „împovărat picătură“; g) frotiu subțire; d) "film gros"; g) medicament-mark.