În sinteza creatinei există și alți aminoacizi, arginină și glicină. In rinichi de arginină și glicină guanidinatsetat format, care este metilat în ficat cu S-adenozil-metionină rezultând formarea de creatina:
Homocisteina este implicată în sinteza aminoacizilor - cisteina (homocisteina + serina). Creatina suferă o fosforilare cu participarea ATP, rezultând un compus cu o legătură macroergică - fosfat de creatină. Aceasta este o reacție reversibilă care este catalizată de enzima creatină fosfokinază (CKF).
Această reacție este intensă în mușchi, în special în mușchiul inimii și în țesutul cerebral. Fosfatul de creatină este sintetizat activ în repaus și se dezintegrează în timpul muncii musculare. Aceasta este cea mai rapidă modalitate de a regenera ATP. Creatina, formată din creatină fosfat, se rupe până la creatinină, care este produsul final și se excretă în urină. Într-o zi, 1-2 grame de creatinină se excretă. Această cantitate de creatinină este direct proporțională cu masa musculară, astfel că la bărbați, creatinina în urină este mai mare decât cea a femeilor. Creatinina nu este reabsorbită din urina primară, deci cantitatea sa în urina secundară caracterizează volumul de filtrare glomerulară.
Atunci când celulele musculare sunt deteriorate și țesutul cerebral este deteriorat, creatin fosfokinaza apare în sânge, acesta este un semn de diagnosticare. Se știe că KFK are trei izoenzime - cardiace, cerebrale și musculare, aspectul lor în sânge permite determinarea leziunii organului respectiv. Apariția în sânge a izoenzimei cardiace este un semn diagnostic precoce al infarctului miocardic.