Invenția se referă la biotehnologie și poate fi utilizat pentru toxina termolabilă și toxoidul Morganella morganii în producția de vaccinuri. Tulpina de Morganella morganii N 2223 izolat de la un copil bolnav cu o infectie intestinala, este depozitată în colecția Institutului de Cercetare de Stat de standardizare și controlul medical și Preparate biologice. L.A.Tarasevicha și are un număr de înregistrare 240. Tulpina bacteriilor Morganella morganii GISCO 240 este un producător de enterotoxină termolabilă. Tulpina are capacitate ridicată produce toxine. Tulpina este rezistentă la penicilină, tetraciclină, gentamicină, streptomicină, meticilina. Tulpina are ridicată toxina-sposobnosnostyu. Tabelul 1.
Invenția se referă la biotehnologie și poate fi utilizată pentru a produce căldură enterotoxina labilă (LT-toxină) și toxoid M. morganii; în producția de vaccin.
Scopul invenției este o tulpină de Morganella morganii N 2223, având o capacitate crescută produce toxine.
Tulpina de Morganella morganii N 2223 izolat de la un copil bolnav cu o infectie intestinala, este depozitată în colecția Institutului de Cercetare de Stat de standardizare și controlul medical și Preparate biologice. L.A.Tarasevicha și are numărul de înregistrare 240.
Tulpina M. morganii GISCO 240 se caracterizează prin următoarele caracteristici: caracteristici morfologice. Când se colorează prin Gram - tije Gram-negative sunt aranjate într-un frotiu singur sau în perechi.
Caracteristici culturale. Când cultivate pe o carne-peptonă soluție 1,5% agar (pH 7,2 - 7,4), conținând 5% eritrocite de iepure la o temperatură de 35 - tulpina 36 o C în creștere colonii mari, cu margini netede. Când cultivate în Hottinger bulion (pH 7,2 - 7,4), temperatura de 35-36 ° C, timp de 20 de ore dă opacifierea difuză și film delicat pe suprafața mediului.
Formele Fenilalanidezaimnazu și indol, nu fermentează lactoza și fermentat pentru a produce un glucoză de acid și gaze, ureea se descompune producând ornitin decarboxilaza.
proprietăți serologici. Serotipul 01ab.
Metode pentru determinarea activității LT-toxină. Administrarea siubplantară la șoareci cu greutate de 15 - 16 g 0,05 ml centrifugatul de 20 de ore de cultură bulion provoacă umflarea de cel puțin 140 de picioare (Aksenov EV 1980).
Administrarea intranazală de 0,05 mg de 20 de ore de cultură bulion provoacă moartea a 95% dintre șoarecii masculi cu greutate de 15 - 16 g timp de 20 min, la convulsii tonice ulcerative și asfixie (Voyno Yaesnetskaya NK-1957).
Intramuscular 300 Mill. Microbieni celule de cultură bulion de 20 ore determină necroza pielii iepure diametru de 3,5 cm.
In experimentul subțire bucla intestin iepure dă un rezultat pozitiv V / l = 1,1.
Greta la 56 ° C timp de 45 min centrifugatul 20 de ore de cultură bulion determină o „umflarea piciorului“ șoareci până la 30 mg, nu provoacă necroza pielii iepure. Greta la 100 ° C 20 de ore de cultură bulion nu determină acumularea de lichid în buclă intestinal iepure izolat de subțire (V / l = 0,3).
Condiții de depozitare cultură leofilnoy după uscare sau crescute într-un 0,3% IPA (pH 7,2 - 7,4), scăldat în ulei de vaselină sterilă, la o temperatură de 4 ° C.
mediu de propagare - Hottinger bulion (pH 7,2 - 7,4), conținând 5% eritrocite de iepure la o temperatură de 35-36 ° C timp de 20 ore.
Caracteristici genetice: Hly +. Ent +. pen R. rezistent la penicilină, tetraciclină, gentamicină, streptomicină, meticilina.
. Exemplul 1. 0,1 ml de 1 miliard pe zi de cultură agar suspensie în soluție salină semănat în bulion steril Hottinger (5 ml, pH 7,2 - 7,4) a fost incubat într-un termostat la 36 ° C timp de 20 ore, se centrifughează la 6000 rot / min, timp de 7 min. Rezultat supernatant (centrifugatul) într-un volum de 0,05 ml administrată în siubplantară laba posterioară a șoarecilor masculi cu greutate de 15 - 16, prin cele 24 de ore, animalele au fost sacrificate prin picior glezna comun eter și amputat este cântărit pe o balanță de torsiune. Astfel centrifugatul tulpina GISCO 240 a dat o diferență între picioare stâng și drept de cel puțin 140 mg. Iar cele 20 de tulpini rămase capabile enterotoxine care produc LT-50 - 100 mg. Control - bulion nativ Hottinger steril (pH 7,2 - 7,4) și se încălzește la 56 ° C centrifugatul de 20 de ore de cultură bulion 30 - 35 mg, respectiv.
Rezultatele sunt prezentate în tabel.
. Exemplul 2. 0,1 ml de 1 miliard de culturi în suspensie de agar zilnic însămânțate în Hottinger bulion (pH 7,2 - 7,4), a fost incubat în termostat la 36 ° C timp de 20 de ore și 500 mln.m.t. suspensie în volum de 1 ml se administrează în segmentul izolat de intestine de iepure balamale subțiri. După 16 ore, animalele au fost sacrificate prin embolie aer, iar raportul dintre volumul de exudat la lungimea segmentului (V / l). In acest 20 de ore M. morganii GISCO 240 bulion de cultură a tulpinii a fost capabil de a produce acumularea de lichid în ecranul mare și indicele V / l a fost de 1,1. Cele 20 de tulpini rămase capabile să producă enterotoxine LT-, indicator V / 1 variază de la 0,6 - 1.0. Atunci când se administrează bulion steril Hottinger și încălzit la 100 ° C 20 de ore raport de cultură în bulion de volum umplut cu fluidul de lungimea segmentului a fost de 0,25 și respectiv 0,3.
Tulpina bacteriilor Morganella morganii GISCO 240 - producând căldură enterotoxina labilă.