Timpul necesar pentru a dubla numărul total de celule dintr-o astfel de cultură nu este egal cu timpul ciclului celular sau timpul de generare. În acest sens, este important ca, în studiul ciclului celular, să se facă o distincție între Tm și 7 și mărimea piscinei proliferative menținută cât mai mare posibil. [C.132]
Piscina maximă proliferativă în timpul regenerării este de 69,3%. Această valoare este aproape de valoarea grupului [c.71]
Diferențele variate semnificative în grâul de primăvară pentru viabilitatea germenilor după transferul secetei profunde au fost stabilite în [577]. hidratarea redusă a țesuturilor meristematice studiat cele mai multe clase de 8-10%, la o lungime de undă de 0,7 cm din germeni încă nu provoca moartea plantelor, materialul deshidratării suplimentar a redus numărul de plante care au supraviețuit și în grade diferite, în diferite grade, prin ajustarea țesutului meristematic umidității la 3 % și sub restabilirea viabilității lor nu au avut loc, a existat o moarte completă. hidratarea redusă a țesutului meristematice până la valoarea de prag a scăzut la piscina proliferativ 10-20% umiditate mugurii pierdere Când 30-35% din mitozei nivelul inițial oprit, dar activitatea celulelor mitotice în meristemele stem de diferite soiuri a fost diferită (Tabelul. 34). Dezvoltarea acestor aspecte este importantă pentru diagnosticarea precoce a supraviețuirii plantelor după stresul de apă. [C.198]
O piscină scăzută proliferativ - un fenomen comun in vivo (chiar și în unele tumoare piscina proliferative poate fi mai mic de 0,1), dar, de asemenea, in vitro, în culturi primare sau în culturi celulare cultivate în condiții suboptimale, de multe ori nu toate celulele divizibile. Reducerea bazinului proliferativ poate apărea datorită 1) diferențierii ireversibile, 2) intrării celulelor în faza OO sau în starea A, 3) moartea celulei. [C.132]
În timpul promovării ciclului celular de la unul la altul mitozei are loc faza de importanță critică în perioada O. în care selectarea soarta ulterioară a celulei - pentru a merge la divizarea sau diferențierea. Acesta este situat în partea de mijloc sau finală a perioadei 61. În general, gradul de diferențiere celulară în corpurile formate în timpul embriogenezei și în timpul postnatale ontogeneză celulei tempo reproducere scade treptat. În acest caz, durata fiecărei celule din generațiile ulterioare, în general, crește (de exemplu, în cursul diferențierii celulelor a seriei mieloide -c 25 604 ore), iar piscina și activitatea proliferativă a matricei ADN-ului sunt reduse. Cu toate acestea, în orice stadiu de dezvoltare, acolo promengutochnye, elemente blastice cu proliferare intensă și scurte neuroblastele ciclu, mioblaste, eritroblaștilor și altele. Între vârsta animalului, iar durata medie a ciclului există o relație certă. Astfel, piscina proliferativă, calculată pentru rudimentul ficatului, a fost de 64,1%. Cu vârsta, această valoare scade la șobolani nou-născuți care constituie aproximativ 39%, după 21 de zile de la naștere -15 până în ziua 51-aproximativ 3%. [C.71]
Culturile proaspăt izolate sunt numite culturi primare înainte de începerea pasajării sau subculturării. Celulele de cultură primare de obicei sunt eterogene și sunt caracterizate prin piscina proliferativă scăzută, dar acestea sunt prezentate cele mai bune tipuri de celule ale țesutului de la care au fost primite, și detectate în mod clar exprimarea unor proprietăți. inerente acestui țesut. Subcultura prevede posibilitatea extinderii existenței unei culturi (ca rezultat al liniei celulare derivate subculturi), abilitatea de a clona (vezi. Cap. 4 și 8), cercetarea și conservarea celulelor (Ch. 4), precum și populații mai omogene. In multe cazuri, subcultura duce la pierderea de celule specializate și caracteristici de diferențiere, dacă nu se iau măsuri pentru selectarea liniilor specializate și de a menține sau de re-inducție proprietăților de diferențiere (vezi. De mai jos). [C.16]
Studiul încorporării lui H-timidină în fibroblaste în culturi de măduvă osoasă corespunde acestei ipoteze. În culturile de 7 zile, indicele pulsului este de 18%, iar saturația are loc în decurs de 32 de ore, când indicele de etichetare atinge 90%. În culturile de 12 zile cu același indice de impuls, saturația are loc între 48 și 72 de ore, cu un indice de etichetă egal cu 78% (IV Keiliss-Borok și colab., 1971). Rezultă că piscina proliferativă din coloniile de fibroblaste în culturi de 7 zile este extrem de ridicată, iar în a 12-a zi de cultivare scade oarecum. Poate că acest lucru se datorează faptului că unele celule din astfel de colonii suferă o diferențiere și, în legătură cu aceasta, încetează să se împartă. Media [c.26]
Celule precursoare pentru coloniile fibroblaste. care apar în culturi, se află în măduva osoasă originală în afara bazinului proliferativ. Acestea intră treptat în perioada S de 28 de ore după explante. Într-adevăr, atunci când este administrat la o cultură de măduvă osoasă H -timidi -on primele 4-72 ore pentru cultivare ulterioară în mediu cu timidina rece a apărut ca fibroblastii marca index apar în culturile vechi de 3-5 zile, în funcție de durata perioadei inițiale, timp în care culturile au fost conduse pe mediu cu H-timidină (IV Keilis-Borok și colab., 1971). Dacă H timidina prezent în mediul de nu mai mult decât primele 28 de ore, fibroblastele erau nemarcate, deși o mare parte din histiocytes în astfel de culturi conținute de etichetă. Dacă H-timidina a fost în mediu timp de 31 de ore și mai mult, indicele etichetei fibroblaste a fost de 30% sau mai mare. În același timp, creșterea indexului etichetei a corespuns prelungirii timpului de contact al culturilor cu H-timidină. Maximul etichetei (98%) este obținut prin cultivarea în prezența de H-timidină timp de 60 de ore. Aceste date indică faptul că etichetarea celulelor progenitoare pentru fibroblastele nu are loc în primele 28 de ore de cultură și că celulele progenitoare intra piscina proliferativ treptat după 28 de ore. O condiție importantă pentru intrarea celulelor progenitoare în starea proliferativă a fost atașarea lor la suprafața substratului. Când suspendate în mediul de incubare a celulelor de măduvă osoasă în prezența H-timidina timp de 2 zile, chiar fibroblastele substanțial nemarcată (IV Keilis-Borok și colab. I97I). Această proprietate distinge în mod semnificativ celulele precursoare pentru fibroblaste de celulele progenitoare pentru histiocite. Proliferarea lor începe cu momentul explantei și activitatea maximă proliferativă în cazul explantelor măduvei osoase se încadrează în prima zi de cultivare. [C.29]
Trebuie menționat faptul că metameloditele intră în bazinul proliferativ. Acest lucru este evidențiat de faptul că în prima oră de cultivare în prezența H-timidinei o porțiune semnificativă de metamelocite (307o) se dovedește a fi un mediu. Cu toate acestea, toate mitozele găsite în amprentele acestei perioade nu conțineau nici un semn. Abilitatea metameloelocitelor de a se dezvolta a fost de asemenea găsită în culturile mai lungi. [C.43]
În acest fel. iar în primul și cel de-al doilea caz, celulele hematopoietice de tulpină din culturi nu durează mult - timp de câteva zile. In ce stare sunt experimente B cu introducerea în mediul nutritiv de creșterea dozelor de H -tnmndina cauzând moartea celulelor din S-perioada, am fost capabili să demonstreze că cele mai multe celule stem din sange de culturi 2 zile în creștere pe alimentatorul este în starea activă proliferare, în timp ce culturile de celule stem cu mediul condiționat este piscina proliferativ numărul lor sub acțiunea H -timidină practic neschimbată (M ullo h, Till, 1971). Aceste observații clare indică faptul că condițiile de cultivare au un efect semnificativ asupra stării celulelor hemopoetice stem. Nu este exclus ca în acest caz condițiile de cultivare să contribuie la conservarea unei părți a populației de celule stem (proliferarea și odihna). [C.68]
Introducerea H-dimidinei în culturi de sânge de 7 și 11 zile a făcut posibilă determinarea proliferării n) (Figura 26) și a timpului de generare a fibroblastelor în colonii. Acest lucru a fost făcut utilizând curbele de saturație, luând în considerare faptul că vorbim despre o populație celulară în creștere logaritmică. Și eticheta fibroblastelor timp de 15 minute, care reflectă procentul de celule în perioada 5, a fost egală cu 18%. Piscina proliferativă pentru culte de 7 și 11 zile nu a fost mai mică de 84 și 79%. Din datele furnizate, următoarea [c.89]
În populația inițială, celulele progenitoare pentru fibroblaste se află în afara bazinului proliferativ. Acestea intră numai după 28 de ore sau mai mult după explante. Aceste celule progenitoare vysokoradiochuvstvi-ing, dar în procesul de cultivare, descendenții lor au devenit rezistente la radiații, eventual în legătură cu trecerea de la o stare morfologică la alta. [C.149]
Subpopularea GMC a zonei vasculare asigură principalul pool proliferativ de miometru. Pericytele intens proliferative ale vaselor nou formate sunt sursa formării celulelor țesutului conjunctiv și, probabil, leiomiocitelor miometrului. [C.125]
Metode de cultură celulară pentru biochimiști (1983) - [c.132]