Acasă | Despre noi | feedback-ul
Principiul metodei de separare a albuminelor de globuline în serul de sânge.
Una dintre metodele de izolare a albuminelor și globulino-urilor de la soluții este sărăcia. Salting diferite proteine necesită o concentrație diferită de săruri, care depinde de puterea ionică a precipitantului și de dimensiunea moleculei de proteine. Astfel, globulinele scapă din soluție atunci când sunt jumătate saturate (50%) cu sulfat de amoniu, spre deosebire de albumine, care sunt precipitate atunci când sarea este complet saturată. Acest lucru se datorează faptului că globulinele au o greutate moleculară mai mare decât albumina.
Când sarea este precipitată cu clorură de sodiu și sulfat de magneziu, globulinele precipită atunci când sunt complet saturate cu aceste săruri. Albuminele sunt sărate la aceeași concentrație de sare obișnuită și sulfat de magneziu ca globuline, dar spre deosebire de globuline, precipitatul albuminelor scade numai când soluția este acidificată.
Răspunsul calitativ la aminoacizii cu conținut de sulf
Reacția Fole - reacția se datorează prezenței în proteină a aminoacizilor cistină și cisteină, conținând sulf legat în mod liber.
Reacție calitativă la legătura peptidică.
Reacția biuret - reacția se datorează prezenței legăturilor peptidice în proteine care conectează resturile de aminoacizi.
O reacție calitativă la acidul fosforic.
Acidul fosforic este deschis cu o probă de molibden și o probă cu un amestec de magnezie.
Proprietățile fizico-chimice ale proteinelor.
Cele mai caracteristice proprietăți fizico-chimice ale proteinelor sunt
vâscozitatea ridicată a soluțiilor, difuzia scăzută, capacitatea de a
în mari domenii, activitate optică, mobilitate în electricitate
câmp, presiune osmotică scăzută și presiune oncotică ridicată.
Abilitatea de a absorbi raze UV la 280 nm (această proprietate,
datorită prezenței în proteine a aminoacizilor aromatici,
pentru determinarea cantitativă a proteinelor).
Proteinele, ca și aminoacizii, sunt amfoterapeuți datorită prezenței libere
Grupările NH2- și COOH. Acestea se caracterizează prin toate proprietățile acizilor și bazelor
În funcție de reacția mediului și de raportul acid și bazic
aminoacizii, proteinele în soluție poartă fie o reacție negativă,
încărcare, deplasarea la anod sau catod. Această proprietate este utilizată când
purificarea proteinelor prin electroforeză.
Proteinele au pronunțate proprietăți hidrofile. Rast-
Hoții de proteine au o presiune osmotică foarte scăzută, o vâscozitate ridicată
și o ușoară capacitate de difuzie. Proteinele sunt capabile de umflare
în limite foarte mari. Cu starea coloidală de proteine, un număr de
caracteristicile caracteristice, în special fenomenul de împrăștiere a luminii, care stau la baza
determinarea cantitativă a proteinelor prin nefelometrie. Acest efect
În plus, metodele moderne de microscopie biologică
obiecte. Moleculele de proteine nu sunt capabile să pătrundă prin semi-
membrane artificiale (celofan, pergament, collodion), precum și
biomembrane de țesuturi vegetale și animale, deși cu organice
leziuni, de exemplu, capsule de rinichi ale glomerului renal (Shumlyansky-
Bowman) devine permeabil pentru albumina serică și,
ultimele apar în urină.
Proteinele se referă la compuși cu înaltă moleculară,
există sute și chiar mii de reziduuri de aminoacizi combinate
în structura macromoleculară. Greutatea moleculară a proteinelor variază
de la 6000 (limita inferioară) la 1000000 și mai mare, în funcție de număr
catenele polipeptidice individuale într-o singură structură moleculară
proteine. Astfel de lanțuri de polipeptide sunt numite subunități. Piercul lor.
Masa variază foarte mult - de la 6000 la 100000 și mai mult.
Mărimea și forma moleculelor de proteine au fost anterior evaluate din datele ultra-
centrifugare, birefringență și difuzie. Aceste date
a subliniat existența în natură a globular (sferic) și
proteine fibrilare (filiforme).
Corpurile de proteine naturale sunt înzestrate cu un anumit, strict prescris,
și au un număr de proprietăți fizico-chimice caracteristice.
biologice și biologice la valori fiziologice ale temperaturii
turneele și pH-ul mediului. Sub influența diferitelor fizice și chimice
factorii, proteinele sunt coagulate și precipitate, pierzându-se
proprietăți native. Astfel, trebuie înțeleasă denaturarea
încălcarea planului general al structurii unice a moleculei proteice native,
predominant din structura sa terțiară, ceea ce duce la pierderea caracterului
pentru proprietățile sale (solubilitate, mobilitate electroforetică,
activitatea biologică etc.). Cele mai multe proteine sunt denaturate când
încălzirea soluțiilor lor la temperaturi de peste 50-60 ° C.
Puncte izoelectrice și izoionice ale proteinelor
La punctul izoelectric, sarcina totală a proteinelor care posedă amfoter-
proprietățile sunt zero și proteinele nu se mișcă în electricitate
câmp. Cunoscând compoziția de aminoacizi a proteinei, putem determina aproximativ
punctul izoelectric (pI); pI este o constantă caracteristică a proteinelor
La punctul izoelectric, proteinele sunt cele mai puțin stabile în soluție și ușor
precipite. Punctul izoelectric al proteinei în mare măsură
depinde de prezența ionilor de sare în soluție; în același timp
valoarea nu este afectată de concentrația de proteine.
O soluție proteică este numită izoionică dacă nu conține alți ioni decât resturile de aminoacizi ionizați ale moleculei de proteină și a ionilor,
formată în timpul disocierii apei.
Bazele azotate ale ADN variază de obicei la diferite specii de organisme, dar aproape nu suferă modificări ale aceleiași specii în procesul de dezvoltare sau în funcție de schimbările din mediu sau de natura nutriției. Se arată, de asemenea, că ADN izolat din țesuturi diferite din aceeași specie are aceeași compoziție de baze azotate. Raporturile cantitative obținute au fost numite regulile lui Chartaff.
1) fracția molară a purinelor * este egală cu fracția molară de pirimidine:
2) cantitatea de adenină și citozină este egală cu cantitatea de guanină și timină:
3) cantitatea de adenină este egală cu cantitatea de timină și cu cantitatea de guanină
este egal cu cantitatea de citozină: A = T și T = C; respectiv
4) esențiale pentru caracterizarea speciei (valoare taxonomică)
așa-numitul coeficient de specificitate, care reflectă