1. Salatarea proteinelor cu sulfat de amoniu.
Un factor important în stabilitatea proteinelor în soluție este prezența particulelor de proteine din carcasa hidratată. Dacă se adaugă o sare la soluția proteică, de exemplu (NH4) 2S04. SO4 Na2. NaCl etc., atunci, din cauza distrugerii cojilor de apă, particulele de proteine aderă adesea una la cealaltă, greu și precipitate. Proteinele diferite sunt sărate la concentrații inegale ale acelorași săruri. Globulinele, de exemplu, sunt precipitate într-o soluție semi-saturată de sulfat de amoniu, în timp ce albuminele sunt într-o soluție saturată a acestei sări. Salatarea proteinelor este o reacție reversibilă. Nu se produce denaturarea proteinelor.
Cursul de lucru. Se toarnă 1-1,5 ml din soluția proteică în tub, se adaugă un volum egal de soluție saturată de sulfat de amoniu. Se observă precipitarea unei granule de globule floculante albe. Lichidul turbid este filtrat printr-un filtru pliat uscat. La filtrat se adaugă un exces de sulfat de amoniu în pulbere în timp ce se agită până când soluția se dizolvă. Există un nor sau fulgi de albine precipitante. Se adaugă de 2-3 ori volumul de apă în precipitat și se asigură că sedimentul este capabil să se dizolve.
2. Precipitarea proteinelor cu alcool.
Alcoolul deshidratează proteinele, determinând coagularea, agregarea și precipitarea lor. Reacția de precipitare a proteinelor cu alcool cu un contact scurt cu proteina este reversibilă.
Cursul de lucru. Aproximativ 2 ml de soluție proteică este turnată în tub, se adaugă mai multe cristale de NaCI și se adaugă etanol în picături pentru a forma fulgi. După ce fulgii de proteine se așează în jos, lichidul se toarnă peste ele, apa se toarnă în precipitat, observând dizolvarea proteinei.
3. Precipitarea proteinelor cu săruri ale metalelor grele.
Sare de metale grele, de exemplu, CuSO4. HgCl2. (CH3COOH) alte 2 Pb precipită proteinele din soluții ireversibil, care este asociată cu formarea compușilor complexi insolubili în apă proteic-metal. În acest caz, proteinele sunt denaturate. Structurile proteice (cu excepția celei primare) sunt complet distruse. O astfel de proteină își pierde capacitatea de a-și îndeplini funcția. În acest caz, proprietățile fizico-chimice ale proteinei se schimbă și proteina își pierde solubilitatea. Procesul de denaturare, ca regulă, este ireversibil.
Progresul lucrării: Se introduc în tub aproximativ 2 ml de soluție proteică și se adaugă încet o soluție de sare de metale grele (soluție 1% de sulfat de cupru sau soluție de acetat de plumb 5%).
Se observă coagularea proteinei. Frunzele căzute din adăugarea de apă nu se dizolvă.
4. Precipitarea proteinelor cu acizi organici.
Acidul tricloracetic este un reactiv specific pentru proteină. Se precipită numai proteine și nu precipită produsele de dezintegrare a proteinelor și a aminoacizilor, deci este folosit pentru a îndepărta complet proteinele de la fluidele biologice (de exemplu, serul de sânge, laptele). În aceste condiții, produsele de descompunere ale proteinelor rămân în soluție.
Progres: Se toarnă 2-3 ml soluție de proteină în tub și se adaugă câteva picături de soluție 5% de acid tricloroacetic. Observați precipitarea proteinei.
5. Precipitarea proteinelor la încălzire.
Când sunt încălzite, proteinele sunt denaturate. Denaturarea este însoțită de o schimbare în structura moleculelor de proteine, cu o încălcare a raportului dintre grupările hidrofile și hidrofobe spre creșterea acesteia din urmă. O astfel de modificare a structurii moleculelor duce la pierderea proprietăților native ale proteinei, inclusiv pierderea solubilității acesteia.
Într-un tub de testare, se toarnă 3-5 ml soluție de albus de ou, se introduce un termometru și se încălzește soluția pentru a forma fulgi. Observați la ce temperatură se formează fulgii. Verificați reacția la reversibilitate.
Proteina nu precipită dacă mediul în care se dizolvă este puternic acid sau puternic alcalin. Molecula proteică va purta o anumită încărcare - pozitivă într-un mediu acid și negativă - într-un mediu alcalin. În același timp, stabilitatea proteinei crește ca rezultat al forțelor electrostatice repulsive, iar proteina nu precipită.
Progresul lucrării: Se toarnă soluția proteică în patru tuburi. În al doilea se adaugă câteva picături de acid acetic diluat, al treilea - un acid acetic glacial puternic, al patrulea - câteva picături de alcaline. Se fierbe toate cele patru eprubete. Marcați modificările.
Flaconul cu acid acetic puternic neutralizează cu atenție alcalinele, observând modificările.