aparat de fotografiat Goryaev - un dispozitiv utilizat pentru a contoriza numărul de celule într-un anumit volum de lichid. De obicei, este folosit pentru a determina numărul de elemente formate din proba de sânge.
Camera constă dintr-o lamă de sticlă groasă acoperită cu aceste fante transversale care formează trei se extind transversal suprafață plană.
Slot medie teren de joacă longitudinala este împărțit în două, fiecare dintre care a gravat pe rețeaua sa. Pe ambele părți ale pad de mijloc din camera Goryaev sunt alte două de 0,1 mm (într-un Fuchs-Rosenthal camera 0,2 mm) peste medie. Planul acestor site-uri sunt folosite pentru a acoperi unguente sticlă înainte de inele de așa-numita lui Newton. După crearea camera unguentele acoperite cu sticlă, închis pe două părți și, pe celelalte două rămân cu fantă (spațiul capilar), prin care camera este umplută.
Principiul grile este același. Ele sunt împărțite într-un anumit număr de pătrate, grupate în diverse moduri.
Constantă în toate grilele este așa numitul „pătrat mic“ partea este egală cu 1/20 mm, deci zona sa este de 1/400 mm2.
Cu ajutorul camerei Goryaeva este de asemenea posibil să se determine mărirea microscopului.
Extern paralelipiped dreptunghic este un (lamelă de sticlă) transparent, cu brazde și grilă microscopice alocate. Dimensiuni diviziuni minore celulele de rețea sunt de 0,05 mm și mai mari - 0,2 mm. În această formă de plasă este aplicată pad (porțiunea de sticlă) până la 0,1 mm mai mici decât cele două platforme adiacente. Aceste site-uri sunt folosite pentru unguente acoperite cu sticlă. Volumul de lichid deasupra pătrat format prin eliminările ochiuri mari Goryaeva este 0.004 microlitri. Numărarea numărul de celule peste pătrat mare este posibil să se calculeze densitatea acestui tip de celule în suspensie prin formula:
Numărul de celule / ml = numărul de celule pe un pătrat mare * 2,5 • 10 5
Utilizarea camerei Goryaev ca un fel de standard de mărire a microscopului poate fi determinată din formula:
unde kG - creșterea microscopului;
1 m - poziția camerei de celule de frontieră din stânga Goryaev;
2 m - poziția de limita din dreapta a celulei sau a grupului de celule;
N - numărul de celule măsurate între limitele;
a - celule rezolutie camera Goryaev (egal cu 0,05 mm).
camera Goryaev este de asemenea utilizat pentru a contoriza numărul de celule în cultură. [1]
Formula de calcul a celulelor sanguine din camera Goryaev -
x = (a · 400 · a) / b,
unde x - numărul dorit de elemente formate în 1 mm3; și - cantitatea elementelor formate numărate într-un anumit volum al camerei; b - numărul de pătrate mici numărate; în - diluarea sângelui.
Metoda de numărare ouăciste în camera Goryaev.
Această metodă este folosită de obicei în infecția experimentală a animalelor stabilite cu exactitate numărul de oochisti (animal administrat o cantitate corespunzătoare de mililitri de suspensie). 1 ml de suspensie conținând coccistului, sunt plasate în camera Goryaev. Deoarece volumul camerei Goryaev este de 0,9 m 3, numărul de oochisturi numarate înmulțit cu 1111. Numărul rezultat este număr adecvat de oocysts în 1 cm3 de soluție. Pentru calcule mai precise de determinare trebuie să fie efectuată de cel puțin trei ori, iar apoi de ieșire aritmetică valoarea medie. Cantitatea necesară pentru infectarea oochiști contorizate folosind pipete calibrate. Pentru o distribuție mai uniformă a oocysts în conținutul mediu de incubare a tubului este necesar să se agită în mod repetat.
numărul de eritrocite în camera Goryaev
Principiul. Cantitatea exactă de sânge au fost amestecate uniform într-o anumită cantitate de fluid și plasat într-o cameră cu un volum cunoscut, în care suspensia este distribuită din sânge un singur strat. Razgrafleno partea de jos a camerei, astfel încât un număr exact de celule roșii din sânge este posibilă.
Reactivi: soluție de clorură de sodiu 0,9%.
Echipamente speciale: microscop, aparat de fotografiat Goryaeva, eprubete de laborator sau capilare din gemometra Sali.
Cursul de determinare. Într-un flacon curat, uscat face 8 ml de soluție de clorură de sodiu 0,9% și capilară pipetă 0, 02 ml de sânge. Pre-șterge vârful pipetei, sângele este suflat la partea de jos a tubului de testare, iar pipeta se spală bine cu stratul superior de lichid. Conținutul tuburilor amestecate bine. Se obțin diluții de sânge 1 400 m. E. Sângele a fost diluat de 400 de ori. Când îngroșarea sângelui este oportun pentru a dilua 500, 600, 700, 800 ori.
Camera și geamul de acoperire trebuie să fie spălate și șterse uscat. Lamelei se pisa camerei, astfel încât a apărut inel luminos. Ia-o picătură de sânge diluat din tubul și umplut în camera, provocând marginea eritrocitelor acoperite cu sticlă au fost numărate după 1 min după umplerea camerei sub microscop joasă mărire (lentilă x8 ocularului x10 sau x 15) cu diafragmă camuflat sau condensator redus (într-un câmp vizual întunecat) .
Celulele roșii de sânge au fost numărate în cinci mari (sau mici, 80) pătrate dispuse pe diagonală. Să ia în considerare celulele roșii din sânge, care se află într-un pătrat mic, iar pe partea stângă și în partea de sus a zidurilor sale. Celulele sunt pe liniile de dreapta și de jos ale pătrat, nu este luată în considerare.
Calcul: Numărul numărat de celule pe 80 de pătrate mici, înmulțit cu 20.000 de diluție de sânge la 1 400 la 25 000 500, la o diluție de 1 la 30.000 sau atunci când este diluat 1 600 pentru a obține rezultatul final în milioane în 1 ul. Se presupune că mărimea un pătrat mic este de 1/4000 microlitri. Pentru numărarea celulelor în 1 litru număr de eritrocite în 1 mm, chiar și multiplicată cu un milion.
Notă. Nu este permis studiul de sânge cu cheaguri; Numarul de celule imediat după umplerea camerei (nu în așteptare timp de 1 min); utilizarea prost și spălate pipetele uscate și eprubete, reactivi de calitate inferioară, cauzând hemoliză. În cazul în care toate regulile de eroare de numărare va atinge o medie ± 2,5%.