Timp de mai multe decenii, sepsis și infecții severe rămân una dintre cele mai urgente probleme ale medicinii moderne, datorită tendință de creștere constantă a numărului de pacienți și mortalitate ridicată în mod constant, în ciuda utilizării unor noi principii și metode de tratament.
Acest lucru se întâmplă de multe ori din cauza diagnosticului intarziat si initierea tratamentului, precum și din cauza lipsei de capacitatea de a evalua cu exactitate eficacitatea tratamentului. Prin urmare, problema diagnosticului în timp util de sepsis și controlul eficient al bolii ar trebui de acum destul de acută.
În practica clinică, există două probleme majore în diagnosticul de infecție severă:
- În primul rând - o diferențiere între infecție per se, adică infecția sistemică locală și generalizate însoțite de reacții adecvate. Efectele fiziopatologice ale sindromului de răspuns inflamator sistemic (SIRS) poate fi determinată clinic prin prezența simptomelor, dar severitatea simptomelor si prognostic clinic mult mai dificil de evaluat.
- A doua problemă în diagnosticul de sepsis - o diferențiere între cauzele infecțioase și alte tipuri de sindrom de răspuns inflamator sistemic, cum ar fi traume și boli imunocomplexe. Diagnosticul este complicată de faptul că o proporție mare de pacienți cu un tablou clinic clar de sepsis, cultura de sânge este adesea negativ.
Inflamatia care apare după orice formă de leziuni tisulare, însoțită de producerea de citokine și proteine de fază acută a căror determinare poate indica prezența inflamației și severitatea acesteia. În unele cazuri, determinarea proteinelor de fază acută sau citokine poate indica natura procesului inflamator sau complicațiile sale, cu toate procesele inflamatorii in general, sunt foarte similare, indiferent de cauză. În acest sens, înțelegem interesul cercetătorilor și clinicienilor la prohormon de calcitonină, și mai ales la procalcitonină (PCT), care, așa cum cred unii cercetători, este un marker specific al infecției.
Procalcitonin valoarea clinică
• Deoarece diagnosticul de sepsis, șoc septic și infecții bacteriene severe. Pentru diagnosticul diferențial de etiologie infecțioasă și neinfectioasa febră de origine necunoscută.
• Pentru a monitoriza starea pacienților cu șoc septic; evaluarea eficacității tratamentului; evalua prognosticul pentru pacient.
• PCT pentru diagnosticarea precoce a complicațiilor infecțioase:
1. pacienți chirurgicale
2. pacientii cu terapie intensiva
3. Destinatarii după transplant
4. Pacienții tratați cu ventilație mecanică
5. Pacienții cu immunosuperssiey
6. Pacienții cu neutropenie
7. Pacienții cu boli de origine necunoscută
• PCT poate iispolzovat pentru diagnostic diferențial:
1. etiologie infecțioasă și neinfecțioasă (ex. ORDSV, pancreatita acută)
2. infecții bacteriene și virale (cum ar fi meningita acuta, sepsis neonatal)
3. infecții bacteriene acute și a proceselor inflamatorii cronice, boli autoimune ex
4. Reacția împotriva transplantare și infecțioase complicațiile de origine bacteriană și fungică
• nivelele PCT sunt de asemenea crescute in pneumonie severa, peritonita, meningita bacteriana.
• In plus, nivelurile PCT pot fi crescute in malarie, melioidosis, infecții fungice sistemice.
CARACTERISTICI procalcitonin în condiții normale și patologice
În fiziologia normală, singurul rol atribuit PCT - acesta este rolul precursor al calcitoninei. Calcitonina este cunoscut pentru reglarea metabolismului osos și de calciu și de asemenea inhibă resorbția osoasă prin osteoclaste. Anterior, sa presupus că calcitonina (CT), numit astfel pentru efectul hipocalemică este de origine extrem de tiroidă și joacă un rol important în homeostazia scheletic. Cu toate acestea, sa constatat că, atunci când tiroidectomie la om, nu se produce nici un efect patologice semnificative în raport cu homeostaziei calciului si densitatea oaselor, în cele mai multe cazuri rămâne același. Astfel, funcțiile fiziologice ale mature CT la om rămân încă necunoscute, au fost identificate, de asemenea, până în prezent nu încălcările care au loc în organism atunci când excesul sau deficit de calcitonină mature.
METODE DISPONIBILE DE MĂSURARE
Bohuon și colab. sunt identificate mai întâi capacitatea PCT de a crește în organism în timpul unei infecții microbiene a dezvoltat un test suficient de sensibilă și specifică pentru determinarea nivelului de calcitonină în ser folosind anticorpul monoclonal.
Paralel cu aceasta, ei au dezvoltat, de asemenea, o bibliotecă de anticorp monoclonal. sunt determinate nu numai calcitonină, ci și PCT, și N- sau molecule C-terminale calcitonin precursor, calcitonină glicină katakaltsina.
Principala problemă la momentul respectiv a fost obținerea PCT pure că este necesară standardizarea măsurătorii. . Ghillani și colaboratorii au dezvoltat, de asemenea, un anticorpi monoclonali specifici de test împotriva reziduului PCT 96-106 ca anticorp primar și anti-reziduu 70-76 ca o etichetă care este detectată doar PCT intacte. Plot 70-76 este o parte a moleculei calcitonină, în timp ce 96-106 - katakaltsina această porțiune a moleculei.
Până în prezent, testele disponibile comercial este singura companie Brahms Diagnostica, Berlin, Germania, care includ testul semicantitativă Brahms PCT-Q, testele de chemiluminescență Brahms Lumitest-PCT, Brahms LIAISON-PCT și Brahms Cryptor-PCT.
Brachms PCT-Q - este o immunoassay semicantitativă pentru determinarea PCT (PCT), care este utilizat pentru diagnosticarea și monitorizarea terapia infecțiilor bacteriene acute și sepsis. Brachms PCT-Q - este un sistem de testare, cu o perioadă de incubație de 30 de minute, care nu are nevoie să fie calibrat și hardware suplimentar. Testul se bazează pe utilizarea anticorpilor anti-katakltsinovyh monoclonali murine conjugat cu aur coloidal (marca) și anticorpi policlonali antikaltsitoninovyh (fază densă).
Testele de chemiluminiscență care pot fi utilizate pentru determinarea cantitativă a PCT în ser uman și plasma - LUMItest ® PCT. Doi anticorpi monoclonali specifici de antigen, care se leagă PCT (antigen) în două locuri diferite (katakaltsinovy și calcitonina segmente) utilizate în acest test în cantități excesive. Unul dintre acești anticorpi - marcat fluorescent (eticheta), iar cealaltă este fixat pe suprafața interioară a tubului. In timpul incubarii, ambii anticorpi reacționează cu moleculele PCT din proba de testare, și formează un „complex sandwich“. Ca urmare, anticorpii marcați cu luminescență se leagă la suprafața interioară a tubului. Odată ce reacția este completă, anticorpul marcat în exces este îndepărtat complet din tub. Ulterior, cantitatea reziduală de etichete pe o suprafață de tub de testare este cuantificată prin măsurarea semnalului de fluorescență folosind un luminometru și reactivi LUMItest ® Basiskit. Intensitatea semnalului luminiscență (RLU) este direct proporțională cu concentrația de PCT în probă.
LEGĂTURĂ ® BRAHMS PCT ® - testul de chemiluminiscență dvuhuchastkovy (principiul sandviș). Două anticorp monoclonal specific foarte diferite utilizate pentru acoperirea fazei solide (particule magnetice) și pentru eticheta. In timpul primei incubării, PCT este prezentă în proba test și calibratoare se leagă la anticorpi marcați. În a doua etapă de incubare a anticorpilor în fază solidă reacționează cu PCT deja conectat. Excesul de eticheta este îndepărtată ciclu de spălare. După aceea, se adaugă starterul se adaugă reactivi. concentrația de PCT în probă și calibratori măsurată prin reacția de chemiluminescență indusă. semnal slab este măsurat și intensitatea este direct proporțională cu concentrația de procalcitonin în probă. KRYPTOR ® utilizează tehnologia TRACE bazată pe transferul de energie non-radioactiv. Acest transfer are loc între doi markeri fluorescenți: criptic europiu (donor) și XL665 (acceptor). Semnalul măsurat în timpul formării complexului antigen-anticorp este amplificat. Testul KRYPTOR ® omogen, fără proceduri de separare sau de spălare. Astfel, este posibil să primească date fără întrerupere a reacției imunologice. Concentrația ridicată PCT în probele de testat este detectată în primele câteva secunde de incubare. Aceste mostre pot fi cultivate cu soluția corespunzătoare, apoi în mod automat reanalizate.