antigene mai puțin imunogene eritrocitare
Fenotiparea eritrocitare antigenele K și
Cele mai proeminente proprietăți antigenice între antigenele eritrocitare au factori minori Kell (K) și (sistem Rh). Factorul Kell este în a doua poziție după un factor de scara D transfuzia antigeni periculoase ale eritrocitelor. Locul al treilea merge la factorul.
sensibilizarea indicelui populației (procentul persoanelor cu un risc crescut de complicații post-transfuzie) la ambii factori sunt în prezent ridicate.
În termeni absoluți, indicele și sensibilizarea antigenului la sistemul Kell, ținând cont de 10 ani anteriori este la datele calculate 8-10 milioane de persoane, sau aproximativ 6-7% din totalul beneficiarilor potențiali pentru acest indicator de referință.
Pentru a evita complicațiile post-transfuzie a antigenului K, este necesar să se emită în instituțiile de îngrijire a sănătății numai-K negativ celule roșii din sânge. În birourile, sucursale și stații de transfuzie de sânge trebuie să fie efectuate la definiția de antigen după cum este necesar, a tuturor donatorilor, împreună cu grupul și factorul Rh, și apoi selectați probe de sânge K-pozitive, care nu le permite să emită o transfuzie. donatori K-pozitive dezirabile pentru a recomanda un alt tip de donare (plasmă, trombocite, leucocite și altele.), dar nu și celule roșii din sânge.
Pentru detectarea antigenului în celulele roșii din sânge obținute prin metode convenționale de cercetare:- testul Coombs indirect.
- Metoda Gelatina în eprubete.
- Metodă rapidă pentru planul cu ser anti-K universal ( "Gemostandart", București).
Pentru a investiga metoda rapidă este folosită în stare proaspătă (nu mai mult de două zile de depozitare), nespălate sau spălate globule roșii, luate din partea de jos a tuburilor, după decantare serului (fracțiunea treia de sânge), plasmă, cu un conservant sau soluție salină. Folosit ca sânge total luat de pe un stick deget chiar înainte de examinare.
Cursul de determinare:- este plasat pe planul doi picături (1 ml) de ser anti-K și o picătură de celule roșii din sânge într-o cantitate de 1/3 volum de ser luate;
- picături și se agită cu o baghetă de sticlă, cu o placă de oscilare periodic buna observa progresul reacției timp de 5 min.
În cazul în care un rezultat pozitiv apare aglutinarea eritrocitelor de 30 s - 1 min și apoi amplificate cu un rezultat negativ, nici o aglutinare. După 3-4 min, amestecul de reacție se adaugă 1-2 picături de soluție salină pentru îndepărtarea posibilă agregarea nespecifică a eritrocitelor și observare au continuat până la 5 minute, după care registrul de rezultat.
Prevalența cu antigen (sistem Rh) este de aproximativ 80%. Aproximativ 20% dintre oameni nu conțin antigen și sunt homozigote pentru antigenul alelică C. Prin urmare, acești pacienți 80% din celulele roșii din sânge transfuzate care conțin antigen, ceea ce conduce la sensibilizarea și riscul complicațiilor post-transfuzie. sensibilizarea indicelui populației la un antigen de aproximativ 32%.
Pentru a reduce sensibilizarea indicelui populației și pentru a evita complicațiile post-transfuzie cauzate de incompatibilitatea antigenului, este adecvat pentru fiecare destinatar Rh pozitiv pentru a identifica antigenul și în absența sângelui transfuzat destinatarului homozigoți donator pentru antigenul C, adică, cu negativ. La stațiile și departamentele de transfuzie de sânge este recomandabil să existe un grup de rezervă a unor astfel de donatori sau de stoc cu-negativ celule roșii din sânge.
Antigenul este determinat cu un anti-ser standard ( „Gemostandart“, București), prin aceleași metode ca și antigenul D. Pentru detectarea antigenului trebuie utilizat Colyclons C „Anti-C super“ (anticorp monoclonal anti-S) ( „hematolog „București). Colyclons „Anti-C-super“ nu conține anticorpi de alte specificități și nu necesită un control de solvent.
eritrocitare phenotyping sistemului antigen Lewis
Identificare Lewis-antigeni și LE. LE metoda b enzimatic folosind anticorp incomplet anti-standard LE (a) anti-LE (L) ( "Gemostandart", București) constă în prepararea unui tratament soluție de enzimă de lucru (enzimirovaniya) cu soluția de investigat și de referință (control) eritrocitelor și setarea aglutinare enzimirovannyh a celulelor roșii din sânge.
Cursul de determinare:- Prepararea de lucru soluție de enzimă.
Pentru a prepara soluția de enzimă de lucru este utilizat în general C-proteaza (complex proteaza produs prin cultura Arc. Chrysogenum).
Este de asemenea posibil să se utilizeze orice alt serologic activ al proteazei microbiene (subtilisină, pronazei) sau plante (papaină, bromelină) origine.
Volumul necesar de 0,1% din soluția de enzimă a fost preparată prin dizolvarea în câteva minute, la temperatura camerei, proba preparatului enzimatic utilizat în ser fiziologic (de exemplu, 10 mg de enzimă dizolvată în 10 ml de soluție salină). solutie proteaza microbian este gata de utilizare imediat după dizolvarea enzimei. Pentru dezvoltarea activității enzimatice a soluției papaina a fost menținută timp de 1 oră la temperatura camerei după dizolvarea medicamentului. Validitatea preparată o soluție de protează microbiană (C-protează), depozitată la temperatura de 4-8 ° C - 1 săptămână, soluție papaina. - 48 ore pulverulente preparate enzimatice, la 4-8 ° C mențin activitatea timp de mai mulți ani.
- investigat și standardul (+ b- și LE și LE-b +.) eritrocitele au fost spălate de două ori cu ser fiziologic;
- de eritrocite au adăugat 5 volume de soluție de enzimă 1 volum de precipitat se spală (de exemplu, 3 până la eritrocite, în picături, a adăugat 15 picături de soluție de enzimă);
- eritrocite și soluția de enzimă este agitată;
- tuburi ingrediente au fost plasate într-un termostat cu aer uscat la 37 ° C timp de 45 minute sau 30 de minute în baie de apă la aceeași temperatură;
- după eritrocite enzimirovaniya au fost spălate de două ori cu soluție de enzimă;
- 5-7,5% preparată enzimirovannyh suspensie de eritrocite care lucrează în soluție salină.
- studiate pentru fiecare probă și etalon (de control), eritrocitele pe un plan plasat pe 1 picătură de ser anti-LE (a) și anti-LE (L);
- plasate pe un avion Reactivii adăugat 1 picătură de eritrocite enzimirovannyh;
- reactanți agitat;
- incubată (în repaus) timp de 10 min la temperatura camerei;
- ia în considerare rezultatele aglutinarea eritrocitelor enzimirovannyh ochiul liber sau cu o buclă de 4 ori (în lumină naturală sau artificială bună este suficientă, cu avionul balansoar blând) - prezența sau absența aglutinării.
Rezultatul este înregistrat ca adevărat după verificarea probelor de control, adică, în prezența aglutinării cu martorul pozitiv și lipsa sa de control negativ.
Prevalența fenotipuri sistemului Lewis de la donatori în nord-vestul România: LE bine-b- - 20%, iar LE + b- - 3-5%, iar LE-b + 70%, în timp ce Lea + b + - este rar.
Total pagini: 10