Construcția curbei de calibrare.
Pentru a stabili curba de calibrare a soluției standard de proteină de bază preparată 3 serii de soluții standard de lucru (adică, pentru a face fiecare concentrație de cel puțin 2 - 3, determinări), așa cum se indică în tabel. 1 (0,1 ml dintr-o soluție standard ce conține 0,01 g proteină). Din fiecare diluție luați 0,1 ml din soluția de lucru și a introdus în tuburi conținând 5,0 ml de reactiv biuret de lucru. 30-60 minute se măsoară densitatea optică a standardului și probele de testare împotriva reactivul biuret.
măsurători de absorbție începe să producă o concentrație mai scăzută a soluției.
Construcția curbei de calibrare pentru a determina
proteină serică totală
Soluție standard de proteine, ml
Saline NaCl, ml
Concentrația proteinei, g / l
Din datele obținute o curbă de calibrare construită pe hârtie milimetrică. Abscisa (orizontal) denota valorile concentrației pe axa y (vertical) - extincția medie luate concentrațiile de proteină corespunzătoare. Prin punctele de date (și, dacă este necesar - între) efectuate în linie dreaptă. Scale este selectat astfel încât linia situată la un unghi de aproximativ 45 0 (Fig. 1).
Uneori, natura calendarului pentru majoritatea concentrației proteinei se abate oarecum de la o linie dreaptă, dar, în cazul în care rezultatele sunt repetate în mod constant, acest program este destul de potrivit pentru locul de muncă.
Curba de calibrare va avea nevoie de timp pentru a verifica din când în când. Este suficient să se verifice două - 3 puncte. În cazul în care acestea sunt plasate pe aceeași diagramă, nu a fost modificat. Pentru a facilita numărarea în sus de masă sau de conversie factorul F se calculează prin împărțirea absorbției concentrația proteinei F = SSM / Ecm.
Conversia Factor F este utilizat pentru a calcula concentrația proteinei în proba de testare. În acest scop, POC extincție (absorbanta) probă înmulțit cu factorul de conversie F.