** Compoziția este verificată și adusă la parametrii necesari
Mod de preparare:
Se amestecă 36,0 g pulbere în 460 ml apă distilată. Se fierbe pentru dizolvarea completă a particulelor. Sterilizează prin autoclavare la 1,1 atm (121 ° C) timp de 15 min. Se răcește la 45-50 ° C și se adaugă aseptic conținutul unui flacon de concentrare aditiv L.mono (FD214), conținutul 1 flacon dizolvat Supliment selectiv pentru L.mono I (FD212) și conținutul 1 flacon Supliment selectiv pentru L.mono II (FD213 ). Se amestecă bine și se toarnă în feluri de mâncare sterile Petri.
AVERTISMENT: clorura de litiu este toxică, prin urmare se recomandă evitarea contactului cu acesta și inhalarea vaporilor; Dacă vă atingeți pielea, spălați imediat reactivul cu multă apă.
Principiul și evaluarea rezultatului:
Acest agar se bazează pe Ottoviani și Agosti (2, 3) pentru izolarea selectivă și identificarea Listeria monocytogenes din alimente și hrană pentru animale; este adoptată și aprobată de comitetul ISO.
Peptonul din carne, hidrolizatul de cazeină, piruvatul de sodiu și extractul de drojdie sunt surse de substanțe nutritive și vitamine necesare pentru creșterea microorganismelor. Glucoza este un substrat fermentabil. Clorura de sodiu menține o presiune osmotică optimă, iar fosfatul dă proprietățile tamponului mediu. Clorura de litiu și aditivii FD212 și FD213 inclusi în aditivi suprimă creșterea microflorei concomitente, asigurând creșterea listeriei. Acestea din urmă, ca urmare a hidrolizei substratului cromogen, formează colonii verzi. Diferențierea Listeria monocytogenes de la alte listerie se bazează pe detectarea activității fosfatidilinozitol-specifică a activității fosfolipazei C (PIPLC). Enzima fosfolipază C hidrolizează substratul purificat (FD214) adăugat în mediu. Ca rezultat, în jurul coloniilor de Listeria monocytogenes, se formează o zonă de opacifiere.
Controlul calității:
Aspectul pulberii:
Pulbere bej, pulbere luminoasă, omogenă.
Densitatea mediului finit:
Se formează un mediu corespunzător unei densități de gel de agar de 1,5%.
Culoare și transparență a mediului finit:
Mediul preparat are o culoare galben deschis, opalesce când se formează un gel în vase Petri.
Aciditatea mediului:
La 25 ° C, soluția apoasă (7,2% greutate / volum) are un pH de 7,2 ± 0,2.
Proprietățile culturii:
Caracteristicile de creștere ale tulpinilor de referință după 24-48 ore la 35-37 ° C
(cu incubație după adăugarea aditivilor selectivi L.mono - FD212 și FD213 și a aditivului de îmbogățire L.mono - FD214).