C12N1 / 20 - bacterii; medii nutritive pentru ei
Proprietarii brevetului RU 2324733:
Instituția științifică de stat Institutul de Cercetare Științifică All-Rusă de fabricare a untului și brânzeturilor (RU)
Organizarea serviciului științific "Experimental biofactor VNIIMS" (RU)
Invenția se referă la industria produselor lactate, în special la producția de produse lactate fermentate. Tulpina bacteriană Lactococcus lactis subsp. diacetilactis TK-REG-D5-5F (Colectare rus de bacterii producătoare de acid lactic, pentru producerea brânzei și bacteriofagi la aceasta la VNIIMS) obținută dintr-o crema de sine și selectate în funcție de intervalul de sensibilitate de 250 la bacteriofagi cunoscute. Folosit ca tulpină indicator pentru detectarea bacteriofagilor de lactococi, căi și surse de răspândire a acestora în întreprindere. Invenția face posibilă împiedicarea dezvoltării bacteriofagilor în producția de produse lactate, îmbunătățirea calității și siguranței pentru sănătatea consumatorului și creșterea eficienței producției.
Invenția se referă la industria laptelui, în special la producția de produse lactate fermentate și este o nouă tulpină de bacterii lactococice care poate fi utilizată pe scară largă pentru a detecta bacteriofagii în plantele de lapte.
Una dintre condițiile pentru obținerea produselor lactate de calitate este de a preveni dezvoltarea bacteriofagilor în producție. Pentru aceasta este necesar să se utilizeze un set de culturi indicatorice sensibile la o gamă largă de bacteriofagi.
Dezavantajul acestei tulpini este acela că este sensibil la un număr relativ mic de bacteriofagi izolați anterior în plante de lapte.
În prezent, spectrul bacteriofagilor din plantele de lapte sa schimbat și sa extins. Pentru detectarea lor, sunt necesare noi tulpini sensibile la bacteriofagi cu spectru alterat al acțiunii litice.
Sarcina este de a preveni dezvoltarea bacteriofagilor în producția de produse lactate prin identificarea lor cu culturi indicator.
Rezultatul tehnic este detectarea unei noi sușe de Lactococcus lactis subsp. diacetilactis TK-OBL-D5-5F, sensibil la o gamă largă de bacteriofagi care circulă în plante de lapte.
Tulpina bacteriană Lactococcus lactis subsp. diacetilactis TK-OBL-D5-5F a fost obținut din smântână și selectat în funcție de spectrul de sensibilitate la 250 de bacteriofagi izolați la instalațiile de prelucrare a laptelui din CSI pentru mai mult de 20 de ani.
Tulpina bacteriană Lactococcus lactis subsp. diacetilactis TK-REG-D5-5F diferă de cunoscute tulpini de Lactococcus set de fagi litică (tip fage), sensibil la fagii 44% Lactococci (110 din 250 studiate).
Tulpina bacteriană Lactococcus lactis subsp. diacetilactis TK-OBL-D5-5F se caracterizează prin următoarele caracteristici.
Semne morfologice și culturale.
Populația celulară este reprezentată de cocci gram-pozitivi cu un diametru de 0,8-0,9 pm, localizați în perechi și în lanțuri scurte (3-4 celule fiecare).
Pe suprafața agarului cu lapte hidrolizat se formează colonii superficiale strălucitoare în formă de picătură și colonii adânci în formă de barcă. Pe agar cu lapte hidrolizat și citrat de calciu în jurul coloniilor, există zone de iluminare. Când este crescut în bulion din lapte hidrolizat, se formează o suspensie uniformă groasă. lapte degresat este coagulează la 30 # x000B0 doză C dintr-un inocul de 0,1% timp de 16-18 h, când se face un inocul de 5% - timp de 5-7 h Numărul de celule viabile atunci când sunt cultivate în lapte degresat zece/8-10/09 UFC / dm 3. .
Proprietăți fiziologice și biochimice. Facultativ anaerob. Temperatura de creștere optimă (30 # x000B1; 2) # x000B0; C, pH-ul mediului este de 6,8-6,9. Nu formează catalază, gaz din glucoză. Fermentează glucoză, galactoză, lactoză, manitol, dextrină, maltoză, zaharoză, arabinoză. Nu fermentează sorbitol, rafinoză, inulină, glicerină. Utilizează citrați în prezența carbohidraților pentru a forma dioxid de carbon, diacetil + acetoin. Formează amoniacul din arginină. Nu creste in lapte de laborator la 45 ° x000B0; C si la o concentratie de sare de 6,5% la 30 # x000B0; Are proprietăți tipice caracteristice pentru Lactococcus lactis subsp. diacetilactis.
Condiții de depozitare. Tulpina este stocată în formă liofilizată la o temperatură de 6 ... 8000 ° C; Mediul de uscare este laptele degresat.
Sensibilitate la bacteriofagi. Tulpina este sensibilă la 110 bacteriofagi virulenți din 250 de studii, izolați la fabricile de prelucrare a laptelui din CSI.
Detectarea bacteriofagilor de lactococi folosind tulpina Lactococcus lactis subsp. diacetilactis TK-OBL-D5-5F.
1. Pregătirea peluzei de tulpină
Vasele Petri se toarnă 15-20 ml de 1,5% agar cu lapte hidrolizat și uscat 3-4 h pre turnat în eprubete în 2,5 ml de 0,6% agar cu lapte hidrolizat se topește la o temperatură de 100 # x000B0;., Cooled până la 45 ° C, se adaugă 1 ml de cultură de bulion de 18 h Lactococcus lactis subsp. diacetilactis TK-OBL-D5-5F, se agită și se toarnă pe plăci Petri cu un mediu nutritiv dens.
2. Pregătirea probelor de testare.
Testul pentru prezența probelor de bacteriofag (lapte, drojdie, zer, etc.) eliberate anterior proteinei (acțiunea acidului lactic), filtrate prin bumbac-tifon, apoi bacteriană (diametru 0,2 um porilor) filtrului.
3. Identificarea bacteriofagilor.
În cultura suprafață agar două straturi însămânțată cu picătură de testare se aplică pe eșantioane bacteriofag, plăcile au fost incubate la 30 # x000B0 ;. C 1824 ore tulpina Lactococcus lactis subsp. diacetilactis TK-OBL-D5-5F formează pe suprafața paharului o peluză uniformă, tulbure. În cazul în care zonele transparente sunt formate la locul de aplicare picătură, apoi un bacteriofag lizând Lactococcus lactis subsp. Strain este găsit în proba de testare. diacetilactis TK-OBL-D5-5F.
Astfel, o nouă tulpină de indicator Lactococcus lactis subsp. diacetilactis TK-OBL-D5-5F, sensibil la o gamă largă de bacteriofagi de lactococi.
Tulpina de bacterii propusă este recomandată pentru utilizarea pe scară largă în industria laptelui pentru a identifica bacteriofagii lactococilor, căile și sursele de răspândire a acestora în întreprindere. Acest lucru va împiedica dezvoltarea bacteriofagilor în producția de produse lactate fermentate, va îmbunătăți calitatea și siguranța acestora pentru sănătatea consumatorului și va spori eficiența producției.
Tulpina bacteriană Lactococcus lactis subsp. diacetilactis Colecția rusească de bacterii lactice pentru producerea de brânză și bacteriofagi la acestea cu VNIIMS, reg. Nr. TK-OBL-D5-5F, utilizat pentru a detecta bacteriofagii de lactococi.