Eliminarea proteinelor din soluție
Deoarece solubilitatea proteinelor depinde de încărcarea și de prezența cochiliei hidratate. atunci dispariția unuia sau a ambilor acești factori duce la precipitarea proteinei și pierderea funcțiilor sale. Unele metode de sedimentare permit ulterior restaurarea proprietăților native și a capacității de lucru a proteinelor.
Reversibilitatea precipitării proteinelor se datorează conservării structurii primare a proteinei. Restaurarea proprietăților fizico-chimice și biologice ale proteinei se numește renaturare (renaturare). Uneori este suficient doar să eliminați agentul dăunător pentru reactivare.
Denaturarea - ireversibil proteina de precipitare din cauza ruperea legăturilor care stabilizează cuaternar, terțiar, structura proteinei secundare, însoțită de o modificare a solubilității, vâscozitatea, activitatea chimică, scăderea sau pierderea totală a funcției biologice.
Aceasta se datorează creșterii temperaturii, radiațiilor ultraviolete și a microundelor, influențelor mecanice, ionizării prin particule încărcate.
Depinde de natura reactivului de denaturare:
- acizii și alcalinele formează legături de hidrogen cu grupări peptidice,
- solvenții organici formează legături de hidrogen și cauzează deshidratarea,
- alcaloizii formează legături cu grupuri polarice și rupe sistemul de legături hidrogen și ionice,
- metalele grele interacționează cu radicalii încărcați, neutralizează încărcările negative și rup sistemul de hidrogen și legăturile ionice.
Salatarea este adăugarea de săruri neutre la soluția de proteină (Na2S04, (NH4) 2S04). Mecanismul de salinizare constă în interacțiunea anionilor (SO4 2-) și a cationilor (Na +, NH4 +) cu încărcături de proteine (grupuri NH4 + și COO). Ca urmare, încărcarea dispare și, în consecință, dispulzarea reciprocă a moleculelor dispare. În același timp, carcasa hidratului scade brusc. Toate acestea conduc la "lipirea împreună" a moleculelor și a precipitațiilor.
Deoarece proteinele plasmatice din sânge diferă în mărime, încărcare, structura, este posibil să se ridica astfel de cantități de sare, ceea ce va provoca precipitarea proteinelor mai puțin stabile, în timp ce altele încă vor fi dizolvate.
De exemplu, raportul albumină / globulină din plasmă sanguină a fost determinat anterior într-un mod similar. Albuminele, ca molecule mai polare, rămân în stare dizolvată la o saturație de 50% a soluției cu săruri neutre, în timp ce globulinele în aceste condiții deja precipită. În mod normal, raportul albumină / globulină din plasma sanguină este de 1,2-1,8.