5. Tehnologii de preparare a preparatelor temporare și permanente de obiecte biologice pentru efectuarea microscopiei ușoare.
1) Medicamente temporare
Pentru a studia obiectele de plante cu un microscop luminos, este necesar să se pregătească o micropreparare. Micro preparatele, care nu sunt destinate depozitării pe termen lung, se numesc temporare. Obiectul studiat este plasat într-o alunecare într-o picătură de apă, glicerină, soluție, reactiv sau colorant și acoperită cu o alunecare de acoperire. Aceste medicamente pot fi păstrate timp de mai multe zile, plasându-le într-o atmosferă umedă.
2) Preparări constante
Preparările constante sunt pregătite prin metode speciale care asigură depozitarea lor timp de decenii. Preparatele permanente includ tampoane, preparate și secțiuni totale. Smearurile sunt folosite în studiul celulelor sanguine, culturilor de microorganisme, celulelor tisulare izolate. Prelucrările totale sunt obiecte transparente și subțiri separate. Secțiunile tăiate pot fi făcute manual cu ajutorul unei mașini de ras. Cu toate acestea, secțiunile de calitate cu o grosime dată de 10. 22 micrometri sunt de obicei realizate cu ajutorul unor dispozitive speciale - microtomuri. Astfel de secțiuni sunt adesea numite preparate de microtome. Pentru a obține secțiuni mai subțiri (0,01-0,05 microni sau 10,50 nanometri), se utilizează ultramicrotomi.
Să examinăm pe scurt principalele etape ale pregătirii medicamentelor permanente.
1. Fixarea materialului. Imediat după terminarea fixării, materialul este spălat sau apă (după agenți de reținere a apei) sau 80% alcool (după agenți de fixare a alcoolului). Numărul de deplasări ale lichidelor de spălare nu este mai mic de 3. Timpul este de până la 24 de ore.
2. Deshidratarea în băuturi spirtoase a concentrației crescânde. În paralel, materialul este compactat. Mișcarea serial a materialului printr-o serie de soluții se numește cabluri. După fixarea apei, se utilizează 8 schimbări de alcool: 20%, 40%, 80%, două schimburi de 96%, două schimburi de 100%. După fixarea alcoolului - 4 modificări ale alcoolului. două schimburi de 96% și două schimburi de câte 100% fiecare. În fiecare schimb, materialul este maturat timp de 1 oră.
3. Iluminarea. Această impregnare a materialului cu un solvent parafinic - xilen (benzen, cloroform). Proba este plasată timp de 1 oră în fiecare din următoarele soluții: 3 părți alcool + 1 parte xilen, apoi 2 părți alcool + 2 părți xilen, apoi 1 parte alcool + 3 părți xilen, apoi două schimbări ale xilenului.
4. Umplerea în parafină. Aceasta este înlocuirea xilenului cu parafină. Proba este plasată într-un amestec de xilen și parafină la o temperatură de 55,5 ° și lăsată într-un termostat la această temperatură până când xilenul se evaporă complet (de la mai multe ore până la câteva zile). Apoi, la o temperatură de 55,5 grade, cablarea se face prin parafină I (6,12 ore), parafină II (6,12 ore) și parafină III. Parafinele I, II, III diferă numai în ceea ce privește puritatea: parafina III este mediul final, care trebuie să aibă cea mai mare puritate. Ca rezultat, se obțin blocuri de parafină, în care sunt închise eșantioane de material. Aceste blocuri pot fi tăiate în orice direcție.
5. Colorarea secțiunilor. Secțiunile de parafină sunt lipite pe un diapozitiv curat. Ca adeziv, puteți folosi un amestec de proteină albă de ou cu glicerină (în raport de 1,2) cu adăugarea de antiseptic (timol sau fenol). Se îndepărtează, de obicei, îndepărtarea cearșafurilor. În acest scop, paharele cu secțiuni lipite sunt trecute prin xilen, alcooli cu concentrație scăzută (100%, 96%, 80%, 70%) și apă distilată. Timpul de ședere în fiecare mediu este de 2,3 minute. Apoi, culoarea conform procedurilor.
6. Deshidratarea și albirea secțiunilor colorate. Se efectuează prin afișarea prin intermediul alcoolilor a unei concentrații crescătoare și apoi prin xilen.
7. Concluzie în mediu (umplere). Pentru depozitarea pe termen lung a medicamentelor, acestea trebuie să fie închise într-un mediu care protejează medicamentul împotriva oxidării cu aer și a atacului fungic. Pentru turnare se folosesc rășini speciale (balsam canadian, balsam de brad), care se dizolvă în xilen până la consistența mierei lichide. O picătură de astfel de soluție este aplicată la felie și acoperită cu o alunecare a capacului.
6. Compoziția chimică a substanței celulare. Elemente micro și macro.
Mai mult de 80 de elemente chimice au fost găsite în celulă, în timp ce nu s-au detectat elemente specifice, caracteristice numai organismelor vii. Cu toate acestea, numai în ceea ce privește cele 27 de elemente se știe ce funcții efectuează. Restul de 53 de elemente sunt susceptibile de a intra în organism din mediul extern.
Prin conținut, elementele care alcătuiesc celula pot fi împărțite în trei grupe:
1. Macronutrienții
2. Microelemente Acestea includ în principal atomii de metal care fac parte din enzime, hormoni și
alte substanțe vitale. În organism, aceste elemente sunt conținute în cantități foarte mici: de la 0,001 la 0,000001%; Printre aceste elemente, bor, cobalt, cupru, molibden, zinc, iod, brom, etc.
3. Ultra-microcelule
Concentrația lor nu depășește 0,000001%. Acestea includ uraniu, radiu, aur, mercur, beriliu, cesiu și alte elemente rare. Rolul fiziologic al majorității acestor elemente în organismele de plante, animale, ciuperci și bacterii nu a fost încă stabilit.