Pasteurizarea în caseta de biodefense a clasei II pe medii dense
[2] se utilizează bucle microbiologice pentru însămânțare [2], mai puțin frecvent - ace și spatule. Cel mai adesea, pentru cultivare se utilizează un tub de testare și un vas Petri. Un instrument universal pentru cultura plantelor este buclele bacteriene. În plus, se utilizează un ac special de bacterii pentru însămânțarea cu un bolț și spatule de metal sau de sticlă pentru plantare pe plăci petri. Pentru însămânțarea materialelor lichide, împreună cu bucla de calibrat și pasteur sunt utilizate pipetele.
2.1. Semănarea pe medii nutritive dense (in vitro)
Când semănuiți, luați un tub de testare în mâna stângă, iar la dreapta, apucând bine dopul cu cel de-al patrulea și al cincilea degete, scoateți-l. Ținând celelalte degete ale aceleiași mâini cu o buclă, în poziție verticală este adusă în flacără deschisă și arsă la căldură roșie. Materialul însămânțat este colectat cu o buclă rece, după care tubul este închis cu un dop, mai întâi trecând-o peste flacăra lămpii de spiritism. Apoi, o bucla cu un agar de semințe este introdusă în tubul de testare cu materialul de semințe, coborându-l la condens în partea inferioară a mediului și materialul este distribuit într-o mișcare zig-zagă peste suprafața înclinată a agarului. Scoateți bucla, ardeți marginea tubului și închideți-o cu un dop. Bucla este sterilizată în flacăra arzătorului și este așezată într-un trepied cu mânerul în jos. Tuburile de testare cu culturi sunt semnate în avans. indicând data însămânțării, numărul studiului și numele culturii.
2.2. Semănarea pe suporturi nutritive solide (într-un vas petri)
Cropuri "gazon" este produs pe un mediu nutritiv dens într-un vas Petri. Pentru a face acest lucru, deschideți capacul cu mâna stângă, aplicați o sămânță sau o pipetă pe suprafața agarului nutritiv conform metodei Drigalsky. După incubarea culturii, apare o creștere continuă uniformă a bacteriilor, împărțindu-le în colonii. Identificarea culturilor bacteriene izolate se realizează prin studierea morfologiei bacteriilor, a caracteristicilor lor culturale, biochimice și a altor caracteristici inerente la fiecare specie.
Colonia este o grupare vizibilă izolată de reprezentanți ai unei specii de microorganisme, formată atunci când o unitate de formare a coloniilor (CFU) este înmulțită pe un mediu nutritiv dens (pe sau în adâncime). Coloniile de bacterii de diferite specii diferă între ele în ceea ce privește morfologia, culoarea și alte caracteristici culturale.
3. Diferențierea culturală a microorganismelor
Coloniile [3] diferă în funcție de dimensiune, formă, culoare, consistență, conturul marginii, structura și natura suprafeței:
- în dimensiune - mare (cu diametrul mai mare de 4-5 mm), mediu (2-4 mm) și mic (1-2 mm)
- în formă - rotundă, în formă de rozetă, în formă de frunze etc.
- după culoare, în funcție de pigment - alb, albastru strălucitor, roșu etc.
- prin consistență - uscat, umed, suculent, mucus
- pe suprafață - netedă, încrețită, striată, plat, convexă, plano-convexă, zdrobită
- pe margine - cu marginile netede, ondulate, cu fringe
- prin structură - poate avea o structură internă fibroasă amorfă, granulară
- în cultura pură cultivată pe agar nutritiv înclinat, modelul de creștere poate fi uscat, umed, târâtor, pliat, pigmentat
Într-un mediu nutritiv lichid, unele culturi bacteriene produc o ceață difuză, altele sunt caracterizate prin creșterea parietală a fundului. Unele culturi formează filme pe suprafața mediului, altele formează un sediment la partea inferioară a tubului.
Cultivarea anaerobelor diferă semnificativ de cultivarea aerobilor: deoarece atmosfera conține o cantitate considerabilă de oxigen, tehnicile speciale de însămânțare, mediile și acidul anaerobic sunt utilizate pentru al scoate din mediu [3].