Echipament necesar pentru cultura in vitro:
1. Cameră sterilă în care vor fi efectuate toate operațiile. Acvariul 50/40/40 poate aborda în mod ideal.
2. Un cuptor pentru sterilizarea vesela, sculelor etc.
3. Recipiente din sticlă sau plastic cu capac cu rezistență la căldură suficientă
4. Scalpel și clești
5. Format de hârtie de birou A4
6. Spiritele
7. Aerosol conținând 70% alcool pentru tratamentul de suprafață
8. Dezinfectant cu conținut de clor pentru tratarea plantelor
9. Sanitizator de mână
10. Mediu nutritiv pentru plante
Prepararea mediului nutritiv
În mod tradițional, mediul de mediu este MS (Murashige-Skuga), care poate fi achiziționat în unele companii chimice. Dar, de asemenea, puteți pregăti un mediu nutrițional adecvat pe cont propriu. Toate componentele sunt disponibile pe scară largă:
1. 2 cesti de apa fiarta
2. 1 parte zahăr granulat
3. Îngrășământ diluat (jumătate din norma NPK 10/10/10 în 1 litru de apă)
4. Tabletă inositol 250 mg.
5. ½ comprimate de multivitamine (cu tiamină)
6. 4 părți de agar
Acesta este mediul de bază. Pentru a pregăti mediul pentru animație și înrădăcinare, este necesar să adăugați ½ parte lapte de nucă de cocos și ½ linguriță de malț. Ca urmare, necesitatea de a obține un mediu cu pH în intervalul de la 5 la 6. Dacă ceva este greșit, este necesar pentru atingerea acestor parametri prin acidulare (acid citric), sau alcalinizare (bicarbonat de sodiu). Se amestecă toate ingredientele enumerate într-o cratiță și se fierbe la foc mic până se dizolvă agar. Apoi se toarnă lichidul rezultat în recipientele pregătite (aproximativ 2 cm). Închideți recipientele și le puneți în cuptor timp de 15 minute pentru sterilizare.
Sterilizarea sculelor și a altor echipamente
Cleștele și scalpele pot fi sterilizate prin învelire în folie în cuptor timp de 15 minute. Ele pot fi, de asemenea, sterilizate în clor lichid sau în alcool, urmate de calcinare prin foc.
Apa sterilă este necesară pentru clătirea plantei și a hârtiei sterile pentru a fi uscată. Apa poate fi sterilizată în recipiente de sticlă. Hârtia dintr-o pungă de hârtie este sterilizată cu abur într-un cuptor peste apă.
Sterilizarea materialului vegetal
Toate materialele trebuie să fie sterilizate în lichid care conține clor (adecvat pentru înălbire) + 3/4 apă + 1 parte detergent, ceea ce va reduce tensiunea superficială). Sterilizarea durează 10-20 de minute. Realizați mișcări periodice. Acest proces va ucide bacteriile și ciupercile. Cu mai multă atenuare, țesutul plantelor poate muri, aveți grijă. Clătiți planta de două ori în apă sterilă.
Operațiunile într-o cameră sterilă
Următoarele operații ar trebui abordate cu o atenție deosebită pentru a împiedica microorganismele să interfereze cu munca dvs.:
1. Ascundeți părul, ridicați mânecile și scoateți ceasul și alte bijuterii. Spălați-vă mâinile cu un dezinfectant adecvat pentru piele. Purtați mănuși sterile.
2. Sterilizați interiorul acvariului cu spray cu alcool și ștergeți cu hârtie sterilă.
3. Aranjați toate instrumentele de care aveți nevoie în munca dvs.
animație
În decurs de o lună, plantele supraviețuitoare au crescut semnificativ și trebuie transplantate într-un mediu care conține lapte de cocos. Laptele de nucă de cocos conține substanțe care promovează segmentarea rapidă și multiplicarea plantei. La transplantarea plantei, este necesar să repetați toate operațiile de mai sus, cu excepția tratării plantei cu lichid care conține clor. Operațiile sunt efectuate într-un acvariu steril pe hârtie sterilă umedă. Umiditatea este necesară pentru o plantă care este destul de moale și se poate usca rapid.
Formarea rădăcinii
Odată ce planta a atins un minim de 2 cm în înălțime, puteți începe procesul de înrădăcinare. Planta este transplantată în mediu din lapte de cocos și malț. un vas de cultură. Rădăcinile se formează în decurs de două până la patru săptămâni.
Transplantul în sol (aclimatizarea)
În această etapă, vasele preparate sunt umplute cu un amestec de sol steril fără adăugarea de îngrășăminte. O mică depresiune se face în sol.
Cu ajutorul penseii scoateți rația din recipient și spălați cu apă caldă resturile de agar de la rădăcini. Planta este plasată într-o adâncitură, umezită de nebulizator și acoperită cu un capac transparent. Treptat obișnuiți planta cu mediul, îndepărtând periodic capacul. Aclimatizarea are loc în 4-6 săptămâni. Apoi trec la metodele uzuale de cultivare.
Bazat pe Grupul de Științe Horticole
Departamentul de Agronomie și Științe ale Solului