Determinarea numărului de leucocite

Determinarea numărului de leucocite

Metoda de numărare în cameră. Prelevarea sângelui și diluarea sângelui se efectuează printr-un tub de testare. Într-un tub de testare (mai bine vidaile), adăugați 0,4 ml fluid de diluție și 0,02 ml sânge capilar. Diluția rezultată practic considerat egal cu 1. 20. Ca lichid de diluare este în mod tipic consumă soluție de acid acetic 3-5% colora cu albastru de metilen (lizeaza de acid acetic eritrocite, leucocite nuclei albastru de metilen a petelor). Înainte de a umple camera Goryaeva, un tub de testare cu sânge diluat este agitat bine. Camera este umplută în același mod ca și pentru numărarea celulelor roșii din sânge.

Leucocitele sunt mult mai mici decât eritrocitele (1-2 pe pătrat mare), deci pentru precizie, numărarea este efectuată în 100 de pătrate mari (nedezvoltate). Calcularea: în 100 de pătrate mari (1600 mici) a numărat un număr de leucocite. Amintindu că volumul piateta este de 1/4000 mm 3, iar sângele diluat de 20 de ori, numărarea numărului de leucocite în 1 ml de sânge: 4000 ¥ 20 și se împarte la 1600 și x = 1/2. În practică, pentru a obține conținutul efectiv de leucocite în 1 μl de sânge, numărul obținut în calcul este împărțit în jumătate și atribuit 2 zerouri.


În medie, eroarea metodei este de ± 7%.

Mai precis (o eroare de 2-3%) și perfect este numărul de leucocite folosind dispozitive electronice. Numărarea leucocitelor în contoarele de particule se realizează pe același principiu ca și eritrocitele. Anterior, sângele se diluează și se amestecă cu o celulă roșie cu litiază cu reactiv. Autoanalyzer „Technion“, ca atare, se folosește acid acetic, în aparatul „Coulter“ și „Tselloskop“ - sapoglobin saponina sau care add diluat (1 500, 1 700) în soluție izotonă de clorură de sodiu (6 picături per 20 ml diluare).

Numărătoarea formulării de sânge din leucocite se efectuează în frotiuri colorate ale sângelui periferic. Se tratează cel mai bine spre sfârșitul cursei, la cel mai subțire punct nu este mai mică de 200 celule (cu excepția leucopeniei exprimate) și apoi de ieșire procentajul anumitor tipuri de leucocite. Numărarea se recomandă în aceeași ordine: jumătate din numărul de celule în jumătatea superioară - la partea de jos a cursei, fără a merge la margine și mijlocul de zigzag (3-4 de vedere de-a lungul frotiu, 3-4 câmp în unghiuri drepte față de mijlocul cursei, apoi 3-4 câmpuri laterale în paralel cu marginea, din nou în unghi drept în partea de sus și așa mai departe într-o singură direcție).


Sticla spălată și degresată cu grijă (marginea sa) atinge o picătură de sânge la locul injectării. Frotiul este realizat cu o sticlă de șlefuire, așezându-l la un unghi de 45 ° față de glisiera din fața picăturii. După ce a adus sticla să renunțe la acest lucru, așteptați până când fluxul de sânge departe coastele lui de-a lungul, apoi un film rapidă a sticlei se realizează măcinarea înainte, nu uita în sus de la obiectivul înainte de a usca toate paie.

Frotiul corect realizat are o culoare gălbuie (subțire), nu atinge marginile sticlei și se termină sub forma unei urme (mușchi).

Colorarea frotiurilor uscate se efectuează după fixarea preliminară. Cea mai bună fixare este obținută în alcool metilen absolut (3-5 min) sau într-un amestec de Nikiforov din părți egale de alcool etilic absolut și eter (30 min).

Principalii coloranți hematologici includ metilen albastru și un derivat al acestuia - azuriu I (Metilen azuriu) și azuriu II (un amestec de părți egale Azure I și albastru de metilen) la acid - eozină galben solubil în apă.

# 9679; Culoare de către Romanovsky-Giemsa. Vopseaua Romanowsky-Giemsa (factory Food) are următoarea compoziție: azuriu II - 3 g, solubil în apă galben eozină - 0,8 g alcool metilic - 250 ml glicerină și - 250 ml.


Soluția de lucru a vopselei este preparată la o viteză de 1,5-2 picături de vopsea finită pe 1 ml de apă distilată. Vopseaua este turnată pe frotiu cât mai mare posibil; durata colorării este de 30-35 de minute. La sfârșitul acestei perioade, frotiurile sunt spălate cu apă și uscate în aer. Prin această metodă, nucleul poate fi bine diferențiat, dar mult mai rău - granularitatea neutrofilă a citoplasmei, deci este larg utilizată pentru colorarea frotiului de sânge periferic.

# 9679; Culoare combinată a lui May-Grunwald-Romanovsky-Giemsa din Pappenheim. Pe frotiul fix turnat pipeta gata colorant - opritor May-Grunwald, care reprezintă o soluție de albastru de metilen în eozinmetilenovogo alcool timp de 3 min. După 3 minute, se adaugă o cantitate egală de apă distilată la soluția de acoperire și colorarea este continuată timp de 1 minut. După aceea, vopseaua este spălată și frotiul este uscat în aer. Apoi, frotiul uscat este vopsit cu o soluție apoasă de vopsea Romanovsky proaspăt preparată în decurs de 8-15 minute. Această metodă este considerată cea mai bună, în special pentru colorarea frotiurilor de măduvă osoasă punctate.

O creștere a numărului de leucocite din sângele periferic deasupra nivelului normal se numește leucocitoză, o scădere a leucopeniei. Leucocitoza (leucopenie) este rar caracterizată de o creștere proporțională (scăderea) a numărului de leucocite de toate tipurile, de exemplu, leucocitoză cu o îngroșare a sângelui. În majoritatea cazurilor, există o creștere a numărului (scăderii) oricărui tip de celule. Creșterea sau scăderea numărului de tipuri individuale de leucocite din sânge poate fi relativă sau absolută, în funcție de conținutul total de leucocite - normal, ridicat sau scăzut. Schimbarea numărului, a raportului dintre formele individuale și morfologia leucocitelor depinde de tipul și virulența agentului patogen, natura, cursul și prevalența procesului patologic, reacția individuală a organismului.

Articole similare