Calculând CAMERA - aparat pentru numărarea celulelor sanguine, urina si lichidul cefalorahidian, precum și microorganisme. K. oferit. fr. fiziolog Malassa (L. Ch. Malassez) în 1874
K. cu. reprezintă lamelă de sticlă groasă cu o adâncitură la fundul la- grila de numărare gravate; pentru a aprofunda impune capacul de sticlă șlefuită. înălțime constantă K .. strat dens este asigurată prin frecarea și diapozitive la formarea de curcubeu inelelor Newton (franjuri de interferență).
Elementele structurale ale tuturor tipurilor de plase sunt pătrate mari și mici. Grile de diferite tipuri - Tom Burker, baptiste, Turk, Neubauer, Goryaeva, Fuchs - Rosenthal, și altele, sunt diferite diferite grupări de pătrate mari și mici.
cantitățile cunoscute - înălțimea camerei, o zonă de rețea și diviziunea și luate pentru diluarea unui analit de sânge - permite să se calculeze cantitatea elementelor formate într-o anumită cantitate (1 pl) de sânge (sau alt mediu).
Distinge deschis și închis cu K. Închis tura camerei coverslip după umplerea acesteia, și astfel se poate cădea bule de aer. O astfel de K .. (Tom - Tom Zeiss cu o grilă, Dungera cu plasă specială) sunt incomode de utilizat și nu este în uz.
Fig. 1. Circuitul deschis cameră de numărare pentru numărarea celulelor sanguine (a - o vedere generală, b - vedere laterală): 1 - o placă de gravat cu ochiuri; 2 - caneluri longitudinale; partea de mijloc a părții inferioare a plăcii de 0,1 mm (adâncimea camerei) și se împarte canelură transversală (3); 4 - geamul capacului.
Deschideți camera (fig. 1) sunt completate după unguente acoperite cu sticlă. Ei au două ecrane pe aceeași lamă. Placă cu caneluri gravate grile delimitate una de alta și de restul diapozitiv. Prezența canelurilor face posibilă reglarea camerelor de umplere. Unele camere sunt echipate cu agrafe metalice, fixarea geamului de acoperire.
Fig. 2. Circuit grilă Goryaeva 1 - pătrate mari deschise (100); 2 - pătrat mare împărțit în mici (16); 3 - pătrate mari separate prin benzi.
K. deschis. a fost prima dată descrisă de SP Alferov în 1883, apoi în 1905 Burker (Burker K.). deschis de numărare camera Klyuchareva cunoscute Gaussera și Levi, Gelber, Glaubermanna. În URSS, pe scară largă camere de numărare Goryaeva aplică Fuchs - Rosenthal. (. Figura 2) Goryaev grila camera Goryaeva are un volum de 0,9 L, 9 mm grila pătrat 2. Grila 225 format din pătrate mari; 100 dintre ele - martor 25 - fiecare împărțit în 16 pătrate mici, 100 - dungi separate.
Fig. 3. Grila de circuit Fuchs - Rosenthal.
Numărarea Fuchs camerale - Rosenthal reticulari Fuchs - (. Figura 3) Rosenthal are un volum de 3,2 I, o suprafață grilă de 16 mm 2, este alcătuită din pătrate mari 256 (benzi pătrate separate nu sunt luate în considerare).
Metodele de lucru
Înainte de a lucra cu lamă de sticlă KA. și capacul de sticlă la sol se spală sub jet de apă de la robinet și se șterge uscat. Apoi, se macină cu fermitate geamul capacul la cameră (până inele curcubeu lui Newton, căci numai în aceste condiții, valoarea K s. Este constantă).
Fig. 4. Diagrama o grilă pătrată cu subiect (cercuri negre) și nu sunt supuse banca (cercuri albe) celule.
Conținutul tuburilor înainte de camera agitată în mod repetat de umplere, apoi se contopește capăt baghetă de sticlă este retras din tubul prin înclinarea acestuia, și o picătură de sânge este aplicată pe diapozitiv lângă marginile lamelei. În cazul în care o picătură de sânge nu este suficientă pentru a umple complet K .. adăugați o altă picătură. Dacă se ia sânge în mixer, primele picături de eliberare mixer capilar și K .. picătură din fiolă este umplut cu un mixer. Reziduuri lichide din diapozitivul a fost îndepărtat cu un tampon de tifon. Count începe după 3 min. după umplerea camerei (timp în care există o surpare a celulelor sanguine), sub un microscop la o mărire redusă (lentilă X 8 X ocularul 10 sau X 15), și un câmp întunecat de vedere (voalat cu o diafragmă sau cu un condensator ușor redus). Cont subiect de celule aflate în interiorul unui pătrat (Fig. 4). Celulele încrucișate pătrate părți, ia în considerare acest lucru: în cazul în care mai mult de jumătate din celula este situată în interiorul unui pătrat, atunci este considerată în cazul în exterior - nu se consideră. Liniile celulare au trecut exact în mijloc, în conformitate cu cele două adiacente, dreapta și de sus, linii și pătrate nu ia în considerare celelalte două. La utilizarea corespunzătoare scaturi p-Moat eritrocite, leucocite, trombocite, eozinofile, bazofile și reticulocite pot fi numărate în camera Goryaev.
Hematiile sunt considerate în 80 pătrate mici, t. E. In 5 pătrate mari dispuse pe diagonală. Calculul se face în conformitate cu formula:
și în care - numărul de celule roșii din sânge numărate în cele 80 de pătrate mici 80 - număr numărat de pătrate mici 200 - gradul de diluție din sânge, 4000 - un factor de multiplicare pentru a primi celule roșii din sânge în 1 ml de sânge (volumul mic pătrat 1/4000 l). Practic numărul de celule roșii din sânge numărate în 5 pătrate mari, înmulțit cu 10.000.
Celulele albe din sânge au fost numărate 1600 pătrate mici (în 100 de pătrate mari). Calculul se face în conformitate cu formula:
X = o * 4000 * 20/1600,
și în care - numărul de leucocite numărate de pătrate mici 1600, 1600 - numărul de pătrate mici numărate 20 - gradul de diluție din sânge, 4000 - un multiplicator pentru obținerea conținutului de leucocitele în 1 ml de sânge. Practic, numărul de leucocite numărate de mici pătrate 1600 este înmulțită cu 50.
Plachetele au fost numărate în 400 pătrate mici (25 patrate mari pe grila diagonală). Reactivi pentru diluare poate fi o soluție de clorură de sodiu izotonică rr, diferite p-riu, eritrocite conservanți hemolyzing și trombocite.
Luați în considerare trombocite sub un microscop obișnuit cu un dispozitiv de contrast de fază (a se vedea. Microscopia cu contrast de fază) pentru a le identifica mai bine. După diluare tub de sânge este lăsat timp de 25-30 minute. hemoliza celulelor roșii din sânge. Apoi, conținutul tuburilor au fost din nou amestecate și umplute K. p. la-Rui plasat timp de 5 minute. într-o cameră umedă (de ex. un vas Petri cu vată umedă) pentru decantare trombocite. Calculul se efectuează conform formulei:
Numărul bazofilele și eozinofilele au fost numărate în camera Goryaev 1600 pătrate mici ca leucocitele. Practic numărul de numărat bazofilele și eozinofilele se înmulțește cu 50.
numărului de reticulocite în camera Goryaeva în 80 pătrate mici, ca celulele roșii din sânge. Aproape reticulocite numărul numărate este înmulțit cu 10.000.
Determinarea numărului total de celule în lichidul cefalorahidian (. Cm), pentru a produce o mai bună Fuchs camerale - Rosenthal (din cauza numărului mic de leucocite în lichidul cefalorahidian). Contorizarea întreaga rețea (256 pătrate mari), sub microscop mărire mică (X lentilă 15 ocular x 8).
Cu un număr foarte mare de celule permise conta jumătate grilă (și apoi înmulțind rezultatul cu 2). Calculul se efectuează conform formulei:
în cazul în care un - număr de celule numărate în cele 256 de piețe, 11 / 10- diluție, volum 3,2-cameră în microlitri. numărare Practic Fuchs camerale - leucocitele Rosenthal sunt împărțite în trei.
In camera de Goryaev celule în lichidul cerebrospinal găsi cel puțin 3 ori (ca întreaga zonă), de fiecare dată când umplerea camerei din nou, și luând apoi media aritmetică. Calculul se efectuează conform formulei:
unde a - media aritmetică a numărului de celule numărate în întreaga mesh 11/10 - diluare, 0,9 - volum al camerei în microlitri. Practic, numărul de leucocite numarate înmulțită cu 1,2.
Determinarea cantitativă a elementelor formate din deținerea de urină - Camere de Fuchs Rosenthal Goryaeva: numărătoarea eritrocitelor și a leucocitelor la un microscop cu o mărire de mijloc, conta cilindru - cu mici. Gradul de diluție al incontinenței depinde de metoda de cercetare (vezi. Urina).
Numărarea în K .. Nu este destul de precisă. metoda de eroare este de 10 până la 20%, în funcție de numărul de elemente numărate.
Condiții de îngrijire și depozitare
Protejați camera de praf și murdărie care se încadrează pe grila. După cameră și lamelei se spală sub jet de apă de la robinet de lucru și ușor, dar complet șters cu o cârpă curată (tifon poate). Apoi, învelite în hârtie și le-a pus într-o cutie.
Bibliografie: Un ghid pentru clinice Metode de laborator, ed. EA Coast cu. 22, M. 1975.
DN Ishmukhametov