Alegerea testelor de laborator
Baza diagnosticului microbiologic al bolilor infecțioase face-scopic microscopie, microbiologice, biologice, serologice și tehnicile alergologice.
Metodele microscopici includ prepararea frotiurilor și preparate pentru microscopie. In cele mai multe cazuri sunt date de microscopie orientabil rovochny caractere (de exemplu, pentru a determina raportul dintre agenți de colorare), deoarece microorganismele set-Gia lipsit caracteristicile morfologice și tinctoriale. Cu toate acestea, materialul poate fi determinat prin microscopie unor semne morfologice rev-Leu (prezență nuclee flageli incluziuni intracelulare, etc.), și de asemenea, pentru a stabili prezența sau absența microorganismelor în probele trimise.
Metode microbiologice - „standardul de aur“ de diagnostic microbiologic, ca rezultatele testelor microbiologice pot stabili cu precizie faptul de Nali-patogen fiind în material. Identificarea culturilor pure (la specii de microorganisme) efectuate considerând morfologice, tinctoriale, cultural, biohimiches-cal, proprietăți toxigene și antigenice ale microorganismului. Majoritatea cercetărilor implică determinarea sensibilității la agenții antimicrobieni în abjecție. Pentru evaluarea epidemiologică a rolului microorganismului se realizează identificarea intraspecifică fagovarov anumit, biovari etc. rezistentvarov
Metodele biologice sunt direcționate spre determinarea prezenței agentului patogen în materialul de toxine și detectarea agentului patogen (mai ales atunci când sursa conține minor-Zhaniya în probă). Metodele includ infectarea animalelor de laborator prin izolarea directă sub material de studiu și ulterior unei culturi pure a unui agent patogen sau constatarea prezenței toxinei microbiene și natura sa. infecții experimentale de simulare la animale sensibile - un instrument important pentru studierea patogeneza Zabolev-TION și natura interacțiunilor în cadrul sistemului mikroorganizm- macro-organism. Cheltuiți pentru depozitele de probe biologice care utilizează numai animalele sănătoase anumită vârstă și greutatea corporală. Material de infectare este introdus în interiorul căilor respiratorii, intraperitoneal, vnut-Riven, intramuscular, intradermic și subcutanat în camera anterioară a ochiului, o gaură bavuri prin craniu, suboccipital (în cele mai multe cisterne creier). Animalele iau sange in vivo, exudatele din peritoneu, după moarte - sânge, bucăți de diferite organe, LCR, exudat din diferite cavități.
Metodele serologice de detectare AT specifice și Ar patogen - un important instru-ment în diagnosticul bolilor infecțioase. De o valoare deosebită o au în acele cazuri în care un agent patogen nu este posibilă. Astfel, este necesar să se identifice în vyshen AT titruri, datorită cărora eșantioanele testate au împerecheat seruri recoltate în intervalul de 10-20 zile (uneori acest interval poate fi mai lung). AT apar în mod normal în sânge de 1-2 săptămâni-lea a bolii si circula in organism este relativ lung, care doresc să înființeze OAPC-le folosesc pentru identificarea studiilor epidemiologice retrospective. Op-determinare clase de Ig caracterizează în mod clar etapele procesului de infecție, și poate, de asemenea, predictor indirect SLE viu. O relevanță deosebită sunt metodele de detectare a micro-Ar detaliu. În cifre semnificative, ele apar în cel mai scurt calendarul, ceea ce le un instrument important pentru identificarea rapida a diagnosticului bolilor infecțioase și determinarea cantitativă a dinamicii procesului infecțios face ofera o masura a terapiei antimicrobiene continuu eficacitatea-getică.
Ar mulți agenți patogeni prezintă un efect de sensibilizare, care este utilizat pentru diagnostic - diagnosticarea bolilor infecțioase, precum și în studiile epidemiologice-TION. Cele mai des gasite testele cutanate alergice, inclusiv intradermice Ar (alergen) la dezvoltarea reacției DTH. Testele cutanate au fost utilizate în diagnosticarea bolilor, cum ar fi răpciugă, melioidosis, bruceloza. Cel mai cunoscut test de Mantoux utilizat pentru diagnosticul tuberculozei și a organismelor pentru evaluarea imunitate la patogen-MA.
Metoda se bazează pe PCR este catalizată de ADN polimerază, copii multiple ale porțiunii specifice formării ADN. recoacere realizată inițial - separarea termică a moleculelor de ADN dublu catenar asupra lanțurilor separate. Mediul este apoi răcit și introdus grunduire (primeri) complementar cu secvențele de nucleotide ale ambelor catene. Pentru a începe reacțiile utilizate primeri sintetici - o oligonucleotide constând din 10-20 nucleotide (de exemplu, deoxinucleotid trifosfați) care interacționează cu terminații și care formează secvența succesivă a bazelor 50-1000. Apoi, în mediu-ter face mostabilnuyu Taq-polimerază (numită bacteria Thermus aquaticus), care declanseaza formarea de copii secundare ale ADN-ului, și apoi molecula de ADN dublu catenar rezultat se încălzește din nou. Lanțul unic rezultat a fost răcit, grunduri și reintroduși de încălzire și răcire proceduri repetate; ca Taq-polimerazei este termostabilă, necesitatea de a re-introducerea lipsește. PCR permite obținerea unor cantități mari de fragmentul de ADN studiat, chiar dacă dispoziția cercetătorilor are doar o molecula de ADN-ul genomic original. Identificarea copii ale ADN-ului se realizează prin electroforeză. Metoda PCR este, de asemenea, baza pentru identificarea ADN-ului, oamenii descendență identifica gene si alte boli genetice.
69. prezentatoare de antigen celule: tipuri, rol în formarea răspunsului imun celular și umoral.
Celulele prezentatoare de antigen (APC) - celule ale sistemului fagocitelor mononucleare (monocite, macrofage, celule Kupffer, celule Langerhans, celule dendritice) și limfocitele B, capabile să efectueze proteoliza de antigene proteice exogene și endogene, având ca rezultat formarea peptidelor. bind recente în citoplasmă molecule cu porțiuni complementare I sau clasa II, sunt transportate la membrana celulară și sunt expuse pe suprafața sa, în cazul în care a recunoscut de către celulele T helper sau T-killer prin intermediul receptorilor de antigen.
Celulele prezentatoare de antigen (A-subsistem) pre-imushchestvenno prezentă în piele, ganglioni limfatici, splină și timus. Aceste macrofage otno-syatsya, celule dendritice, celule foliculare Process Lim fouzlov și splină, celule Langerhans, M-celulele din foliculii limfatici ale tractului digestiv, celulele epiteliale ale timusului. Aceste celule iau în sus, proces și Ag prezent (epitop) la alte celule de suprafață ale imunocompetente, produc IL-11, alte citokine, prostaglandine secreta E2 (PGE2), deprimant impulsuri de răspuns ny. Fagocitară și citolitic activitatea de stimulare a macrofagelor # 947; IFN.
Celulele dendritice provin din măduva osoasă și formează o populație de celule trăit-house, care inițiază și modulează răspunsul imun. precursorii maduvei Vkostnom acestora pentru a forma o subpopulație de celule CD34 + care sunt capabile să se diferențieze în celule Langerhans la epiteliale și celulele dendritice pentru mediul intern. precursori de celule dendritice imaturi și nedelyashiesya coloniza multe țesuturi și organe. Ln ferentsirovku celulele dendritice este mentinut factor koloniestimuliruyushy si macrofagelor granulocite GM-CSF și IL-3. Celulele dendritice sunt stelată în formă și capabil să suporte suprafața de repaus în raport cu un număr mic de molecule MHC. In contrast, celulele Langerhans, celulele dendritice interstițiale sunt capabile de a stimula sinteza de Ig de B-limfocite. Toate celulele dendritice pot intra mai întâi în zona dependentă de timus organelor limfoide periferice, care se coc în așa numitele celule interdigitiruyuschie.
70. Macrofagele: histogeneză, caracteristicile funcționale, mediatori cheie.
macrofageáGl (din greaca veche. # 956; # 945; # 954; # 961; # 972; # 962; - mare și # 966; # 940; # 947; # 959; # 962; - eater (sinonime: gistofagotsit-gistiotsit-macrofage, makrofagotsit, megalofag-mancator)) polyblasts, celule mezenchimale în organism natura animal capabil de inghitindu activ și digestia bacterii resturile de celule moarte și alte particule străine sau toxice pentru organism. Termenul „macrofage“ a intrat Mecinikov.
Pentru a transporta monocite sanguine macrofage, histiocite țesuturile conjunctive, celulele endoteliale ale capilarelor care formează organe, celulele Kupffer din ficat, pereții celulelor pulmonare alveolare (macrofage pulmonare) si peritoneului peretelui (macrofage peritoneale).
Sa stabilit că la mamifere progenitori macrofage se formează în măduva osoasă. Proprietățile active sunt, de asemenea, celulele fagocitare ale organelor hematopoietice reticular țesut joinable la macrofage în sistemul reticuloendotelial (makrofagicheskuyu) care îndeplinește o funcție de protecție în organism.
Principalul tip de celule ale sistemului mononucleare fagocitare. Această mare (10 - 24 microni) celule viață lungă, cu un aparat cu membrană lizozomale bine dezvoltate și. Pe receptorii lor de suprafață sunt Fc-fragment al IgGI și IgG3, receptorul C3b fragmentul C al limfocitelor B și T, complement și alte interleukine histamina.
De fapt, ea devine un monocit-macrofag la ieșirea din fluxul sanguin și în țesuturi.
În funcție de tipul de țesut macrofagele sunt următoarele tipuri.
· Histiocytes - macrofage ale țesutului conjunctiv; componentă a sistemului reticuloendotelial.
· Celule Kupffer - sau celulele hepatice stelate endoteliale.
· Macrofage alveolare - în caz contrar, cușcă de praf; situat în alveolele.
· Celule epiteloide - componente granuloame.
· Osteoclastele - celule polinucleare implicate în resorbția osoasă.
· Microgliile - celulele sistemului nervos central care distrug neuronii și absorb agenți infecțioși.
Macrofagele conțin numeroase enzime citoplasmatice și pot fi identificate în țesuturi prin metode histochimice care detectează aceste enzime. Unele enzime, cum ar fi muramidaza (lizozimul) și chimotripsina poate fi detectată prin anticorpul marcat (imunocitochimie), care utilizează anticorpi împotriva proteinelor ale enzimei. Astfel de anticorpi monoclonali împotriva diferitelor antigene CD sunt utilizate pe scară largă pentru identificarea macrofage.
funcțiile macrofage includ fagocitoza, „tratament“ antigeni și interacțiunea cu citokine.
· Non-imune macrofage fagocitoză pot fagocita particule străine, microorganisme și a resturilor de celule deteriorate direct, fără un apel răspuns imun. Cu toate acestea, fagocitoza și uciderea microorganismelor este facilitată în mare măsură cu prezența imunoglobulinelor specifice, se completează și limfokine sunt produse imunologic prin limfocite T activate.
· Macrofage fagocitoză imune au receptori de suprafață pentru C3b și Fc-fragment de imunoglobuline. Orice particule care sunt acoperite cu imunoglobulină sau complement (opsonizate) fagocitata semnificativ mai ușor decât particulele „goale“.
· „Prelucrare“ macrofage antigene „tratate“ antigeni și prezintă-le B- și limfocitele T în forma cerută; Această interacțiune celulară implică recunoașterea simultană de către limfocite și molecule MHC „antigen prelucrate“, situate pe suprafața macrofagelor.
· Interacțiunea cu citokine macrofage interactioneaza cu citokine produse de limfocitele T pentru a proteja organismul împotriva anumitor agenți de deteriorare. Un rezultat tipic al acestei interacțiuni - formarea de granuloame. Macrofagele produc de asemenea citokine, incluzând interleukina-l, b-interferon și factori de creștere T și B celule. Diferite interacțiunea dintre limfocite și macrofage în țesuturi sunt morfológicamente manifestate în inflamația cronică.
Rolul macrofagelor nu se limitează la secreția de IL-1. In aceste celule au sintetizat un număr de substanțe biologic active, fiecare dintre acestea contribuind la inflamatie. Acestea includ: esteraza, proteaza si antiproteaza; lizozomala hidrolază - colagenaza, alastaza, lizozim, # 945; macroglobulina; monokine - IL-1, factor de stimulare a coloniilor, un factor de stimulare a creșterii fibroblaștilor; anti-infecțios agenți - interferon, transferina, transcobalamină; completează componente: C1, C2, NW, C4, C5, C6; derivați ai acidului arahidonic: prostaglandine E2, tromboxan A2, leucotriene.