izolarea virusului

Izolarea virusului. Eficiența izolarea virusului din materialul patologic este crescut folosind metode de purificare și concentrare a suspensiilor conținând virusuri. Datorită ușurinței de punere în aplicare, costul, și cel mai important, posibilitatea de rezultate rapide, care să permită determinarea simultană a unui model și variantă aparținând virusului epizootică, cel mai des utilizate sau RGC RDSK. Cu toate acestea, atunci când cantitatea livrată de material viral este insuficient pentru cercetare sau RNC eșuează hemoliza sau nespecific întârziere, apoi se pune pe bioanaliză RNC (cel puțin 2 capete) în vârstă de 18 luni, 0,1 ml suspensie care intră în materialul rezultat în mai multe puncte de limba membranei mucoase firimituri și membrelor; Volumul total al materialului de testat 2-3 ml. Apariția AFL la locul materialului cu confirmare ulterioară a RNC indică prezența celulei de încărcare. Cu toate acestea, metoda este costisitoare și este asociată cu riscul de eliberare a virusului în afara instituției. Prin urmare, în practică de diagnostic, este folosit foarte rar. Cele mai multe Biotestări utilizate pentru 4-6 zile puii de șoarece cu vârsta, cobailor, cu o greutate de cel puțin 500 g și o cultură primară de celule de rinichi de viței, purcei, miei, vite și celule transplantate tiroidiene - BHK-21, IB-RS-2. Biotestare la șoareci este convenabil și economic. tulpina de testare ID5o la puii de șoarece și bovine sunt identice. soareci iziți sunt mai sensibile la virusul febrei aftoase decât porci de guineea. Cu toate acestea, trebuie să se țină seama de faptul că evaluarea rezultatelor titrare pe șoarecii de fraieri adesea dificil.

Cobaii sunt ușor infectate prin administrarea intradermică de material care conține virusul în suprafața plantară a membrelor posterioare prin tunelare într-o doză de 0,2-0,5 ml. Infectarea cel puțin 5 goluri. Leziunile primare, de obicei, au apărut după 2-5 zile (ca maturare). Leziunile secundare - vezicule in cavitatea bucala - dezvolta de obicei dupa infectarea cu tulpini adaptate la cobai.

Pentru a izola virusul culturi primare utilizate cel mai frecvent de celule de rinichi de porci sau viței tripsinizate. Observarea culturilor infectate sunt celule 7 zile mikroskopiruya-le de zi cu zi. degenerare specifică a celulelor în care confirmă specificitatea lui la CRN indică prezența celulelor de sarcină din materialul testat.

Indicarea și identificarea virusului. Ca metodă rapidă este acum utilizat pe scară largă PCR. Această metodă rapidă și sensibilă pentru detectarea celulelor de sarcină în țesuturi prin amplificarea enzimatică a genei ARN polimerazei.

RSK pe hemoliza 100%. Este folosit pentru a determina tipurile și tensometrică subtipuri (variante), animal cauzat boala, si pentru a testa cântarele tulpini industriale si vaccinuri in fabricarea tulpinilor de laborator în cercetarea științifică. relație antigenic (A) mai mult de 70% indică faptul că tulpinile proprietăților antigenice ndentichny reciproc și fac parte din același exemplu de realizare, de la 10 la 70% - în diferite variante (subtipuri) și mai puțin de 10% - de diferite tipuri.

RSK pe o hemoliză 50%. utilizate cu succes în laboratoarele de cercetare și instituții ale industriei biologice. Ea a dezvoltat o metodă de studiere a statusului imun al animalelor vaccinate împotriva febrei aftoase în RSK. Acesta permite specialiștilor de la laboratorul veterinar regional pentru a efectua o monitorizare a stării imune a efectivelor într-o reacție simplă și fiabilă.

PHA. Aceasta este o metodă simplă, rapidă, sensibilă pentru identificarea celulei de încărcare. Sensibilitatea de reacție depășește metoda general acceptată de celule de sarcină dactilografiere la CRN 8-16 ori esența ei constă în faptul că AT eritrocite încărcate aglutinate în contact cu FMD AG tip omoloagă.

Serodiagnosis și diagnostic retrospectiv

Diagnosticul retrospectiv pentru a determina tipul și versiunea cântarele, provocând ultima boală a animalelor, bazate pe identificarea anticorpilor în RPSK, PDR și RRID, rata de seroprotecție reacție FIND la șoarecii și pH-ul în cultura celulară.

Pentru detectarea fiabilă a AT și pentru determinarea specificității lor de probe de ser tipic trebuie luate nu mai devreme de 7 zile de la apariția semnelor de boală veziculoasă a animalelor sau de vaccinare. Un studiu trebuie trimis 5-10 probe de ser de la fiecare grupă de vârstă. La probele de ser de partid alocate pentru cercetare, fac din documentul de însoțire.

Identificarea, identificarea specificității tipice și cuantificarea anticorpilor la celulele de sarcină în RRID, RPSK, CNVM și NIF poate fi efectuată într-un laboratoarele de diagnostic veterinar convenționale și nu necesită un regim sanitar mai stricte, ca materiale noncommunicable deținute.

Pentru a detecta inhibitor (incomplet) utilizat CNVM AT (sau RPSK). Acești anticorpi sunt caracterizate de aviditate ridicată. Ele formează complexul AG-AT, nu un complement adsorbant. Comunicarea cu hipertensiune finaliza rapid AT le bloca, dar nu este asociată cu complementul în prezența serului hemolitic cauzează liza celulelor roșii din sânge. anticorpi inhibitori se găsesc astăzi în multe infecții, inclusiv febra aftoasă. Această reacție este utilizată pentru a determina tipul de celule de sarcină prin seruri de animale recupera de la, precum și pentru detectarea postinfecțioasă și post-vaccinare AT.

Diagnosticul diferențial. Diagnosticul diferential al febrei aftoase ar trebui să fie excluse VS, VBS, de Est, Bluetongue. Pentru un diagnostic diferential in laboratoarele folosind kituri de diagnostic produse biologice industrie, febra aftoasa si SVD.

infectii enterovirus umane Uneori materialul asupra persoanelor suspectate de boală febră aftoasă, patogen izolat - coxsackie virus serotipul B. Virusul a provocat un CPE vizibil în culturi celulare continue în 24 de ore, cu o formă icosahedral, 20-30 nm în dimensiune și a cauzat moartea șoarecilor la intracerebrale infecție.

7. Imunitatea și prevenirea specifică

Durata imunității la animalele recupera de la febră aftoasă, este de 8-12 luni, porci - 10-12, la ovine - aproximativ 18 luni. Animalele individuale convalescent dobândesc o anumită rezistență împotriva virusului de tip heterologe. Când FMD are loc țesut și umoral imunitate. Imunitatea locală este formată mai devreme decât anticorpul, dar este mai scurt. Prin urmare, se produce atunci când reinfectarea după 4-7 luni de la locul de virus produs aftele, dar generalizarea procesului. Aceasta a constatat că la reacțiile de apărare complexe de febră aftoasă începe din momentul contactului cu membranele mucoase ale patogenului, cauzând o anumită regularitate în dezvoltarea imunității locale specifice. La șoarecii alb VAV / s și cobai imunizați cu aceeași doză de antigen parametrii VYa mai multe tipuri SAT-1 tulpini de comunicare a demonstrat testul de transformare blastică, ELISA și seroreduktsii, care a fost determinat ca fiind coeficienți de corelație semnificativă statistic. Eficiența răspunsului imun primar la nivel celular poate determina cantitativ dezvoltarea factorului imun umoral. Pentru a asigura prosperitatea durabilă a țării pentru sistemul febrei aftoase vRumyniyarealizuetsya de măsuri, o prioritate, care este de a preveni derapaj de celule de sarcină pe teritoriu, dar în zonele de risc ridicat - cu un software centralizat regiuni vaccin vaccinale în detrimentul fondurilor federale antiepizootic.

articole similare