Mate Rial pentru cercetare sunt afectate de păr, fulgi de piele, bucăți de picior-dren, piele si unghii razuitura, puroi, spută, ganglionii punctiformă limfatici, măduvă osoasă, organe interne, sânge, lichid cefalorahidian, sucul gastric, biliar, defecații-TION, . biopsiilor și alte instrumente sterile materiale luând (forceps, scalp-LEM, cu ace, foarfece, lo Zhechkov Folkman, etc.); tampoane pentru a lua Therians ma nu este utilizat. material pato logic este tratat cu un amestec de dimetil sulfoxid cu hidroxid de potasiu (20 g KOH + 100 ml de concentrație 60% DMSO). Preparatele „picătură strivita“ este examinata sub mare (x40) sau convențional microscop cu contrast de fază.
Pacienții microsporia în razele de lumină fluorescentă a părului afectat are o strălucire verde-smarald.
Pentru diagnosticul infecțiilor fungice se utilizează o gamă largă de teste de laborator (microscopice, micologice, alergice, ser, metode genetice bioanalize - Schema 23).
Schema 23. Metode de laborator pentru diagnosticarea micozelor
-Mate Rial dlyaissledovaniya: părul afectat, fulgi de piele, bucăți de picior-dren, piele si unghii razuitura, puroi, spută, ganglionii punctiformă limfatici, măduvă osoasă, organe interne, sânge, lichid cefalorahidian, sucul gastric, biliar, defecații-TION, biopsie și colab.
diagnostic rapid: RIF, PCR
tehnica microscopică: un studiu de preparate native și colorate pentru detectarea elementelor fungice (miceliu, spori)
Metoda micologic de însămânțare pe medii de cultură speciale (Saburo și colab.). Identificarea culturii selectate coloniilor de fungi pe baza caracteristicilor, structurii microscopice a ciupercii, precum și de caracteristicile biochimice și altele.
Metoda Serologic: determinarea anticorpilor la fungi sau antigenele lor în serul pacienților cu micoze folosind RA, RSK, IHA, IFA, ELISA, imunoblot
Metoda alergică: stabilirea intradermice teste de alergie cu alergeni fungice
Biotestare: Dna contaminare sensibilă la votnyh urmată de izolarea unei culturi pure a ciupercii
Metoda microscopica joacă un rol important în diagnosticul infecțiilor fungice, ca Aceasta face posibilă identificarea rapidă a preparatelor native și pătate prezența și localizarea celulelor, sporii și miceliul toroanele în materialul patologic. Cele mai frecvent utilizate ciupercile pentru metodele de vopsire convenționale Gram, Romanovsky-Giemsa, Ziehl-Nielsen, Burri. Acesta a dezvoltat o gamă largă de tehnici de colorare ciuperci speciale.
Diagnosticul rapid al infecțiilor fungice se realizează prin intermediul RIF directe.
Metoda micologic (separarea culturii fungice pure și identificarea acestuia) este o parte importantă a cercetării de laborator în micoză. Culturile sunt produse pe mediu solid și lichid (neselectiv și selectiv) (mediu special Sabouraud - maltoză-peptonă, agar mustului, Czapek, porumb, orez, cartofi, clorhidric de sânge, ciocolata, cardio- cerebral, agar cărbune-drojdie și t .d.). mediu selectiv conținând antibiotice (cloramfenicol, streptomicină, penicilină etc.), Colorants (trandafir bengal și colab.) sau dezinfectanți. Spre deosebire de slab mediu alcalin pentru cultivarea majorității bacteriilor, au un mediu acid sau pH ușor acid (5,7-6,8) la cultivarea ciupercilor.
Pentru diferențierea primară fungi CROM agar dezvoltat cu fungi substraturi cromogene digerate pentru a forma compuși colorați, prin care colonii de diferite specii de fungi sunt vopsite in diferite culori - roșu, galben, alb, crem, co-richnevy, negru, etc.
Cultivarea ciupercilor este realizată în general la o temperatură de 22-28 0 C, timp de 2-4 săptămâni. Identificarea culturilor de ciuperci selectate efectuate pe baza caracteristicilor coloniilor (aspectul, forma, textura, culoarea), structura microscopică a fungilor (structura miceliu, forma și dispunerea conidiofore și conidia - litigiul), precum și caracteristicile biochimice și altele.
Metoda serologică - determinarea anticorpilor la fungi sau antigenele lor în serul pacienților cu micoze folosind RA, RSK, IHA, IFA, ELISA, imunoblot
Metoda alergica - stabilirea de testare intradermică alergie. Transporta alergeni fungice, este o suspensie de fungi ucis-hsi, prin încălzirea filtratelor neutralizați culturilor și fracțiune alb-polizaharid kovye celule fungice. Testarea Rezultatele alergie citit la 20 de minute (non-lente) și 24-48 ore (reacție întârziată).
Pentru a identifica o sensibilizare fungice ORGA-NISM este utilizat, de asemenea, teste imunologice invitro (testul degranulării bazofilelor ca hipersensibilitate de tip imediat hipersensibili stimul și identificarea Rata fluxului de tip întârziat - migrația reacția de frânare a leucocitelor sau a transformării blastice a limfocitelor).
Biotestare - infectarea sensibilă Ms-votnyh (șoareci, șobolani, hamsteri, iepuri, porci de guineea, soba-ki, pisici) în diferite moduri (pentru topică, intradermică, subcutanată, intramusculară, intravenoasă, intracardiacă, intracerebrală, oral, intraheală) pentru a evidenția cultura pură a ciupercii.
Tehnica histologică urmărește detectarea tisulară tensiune fungus obținut prin biopsie și autopsie.
diagnostic molecular. PCR a fost dezvoltat pentru a detecta materialul din fragmentele de ADN pacient de ciuperci specifice, care permite să se manifeste, aproximativ 40 de specii de fungi, inclusiv Candidaalbicans și variantele sale și T. rubrum S.neoformans. diferite tipuri de Aspergillus. paracocciodioidomicoza patogeni (Paracoccidioidesbrasiliensis) și histoplasmoza (Histoplasmacapsulatum).