Substante nutritive sunt coloana vertebrală a bacteriologie. Ele servesc la separarea din materialul de testare a culturilor pure de microbi pentru a studia proprietățile lor. Pe medii nutritive create condiții optime pentru creșterea microorganismelor. Compoziția mediului de trebuie să conțină substanțe necesare pentru construirea tuturor componentelor citoplasmei, adică, toate sursele de o creștere organism viu. Acestea includ în principal surse de azot, carbon, hidrogen și oxigen.
Sursa de hidrogen si oxigen in medii nutritive - apa. Sursa de azot sunt compuși organici, care sunt derivate din carne, pește, placenta, lapte, ouă, sânge. Ca rezultat hidroliza, pancreatina sau tripsină produselor obținute prin așa-numitul hidrolizaților care conțin cantități mari de aminoacizi și peptone, sunt bine absorbite de cele mai multe microorganisme. Proteina nativă este absorbită numai unele microorganisme având exoprotează. Hidrolizatele sunt baza pentru pregătirea mediilor de mai multe microorganisme.
Sursa de carbon pentru patogeni microbieni sunt în principal de diferite carbohidrații: monozaharide și dizaharide, alcooli polihidroxilici, acizi organici și săruri ale acestora.
Mai mult organogens, compuși anorganici care conțin bacterii necesare fosfor, potasiu, sulf, sodiu, magneziu, fier și oligoelemente: cobalt, iod, mangan, bor, zinc, molibden, cupru și altele.
Microorganismele trebuie să fie satisfăcute prin adăugarea de compuși anorganici la săruri de KH2PO4 medie și K2HPO4 al. Oligoelemente care acționează în calitate de catalizatori ai proceselor chimice sunt necesare în cantități foarte mici și intră în mediul de cultură cu peptonă, săruri anorganice și apă. Alături de elementele organice de mai sus, multe microorganisme au nevoie de factori de creștere, adică, pentru substanțele pe care ei înșiși nu pot sintetiza. factori de creștere care se adaugă la mediul de cultură ca produs finit. Prin creștere factori includ diferite vitamine, o sursă de un mediu nutritiv, care sunt adăugați la produse medii de cultură de origine vegetală și animală, care conțin în compoziția sa nicotinic, pantotenic, acid parabenzoynuyu, vitaminele A, B, C și altele.
microbii Nutrienți pot fi achiziționate numai în cazul în care mediul de reacție particular, ca permeabilitatea membranei celulare microbiene se schimbă în funcție de pH.
Cerințe pentru mediu.
1. Mediul nutritiv trebuie să conțină substanțe nutritive putere microbiene necesare.
2. Au pH-ul optim de reacție pentru speciile cultivate microb. -
3. Mediul nutritiv trebuie să aibă viscozitate și umiditate suficientă, deoarece microbii hrănesc cu legile difuziei și osmoză.
4. Posedă izotonicitate și au un potențial redox specific (Rh2).
5. Mediul nutritiv trebuie să fie sterile, oferind astfel posibilitatea de a dezvolta culturi pure.
cerințe nutritive și condițiile fizice la diferite specii de microbi variaza, iar aceasta exclude posibilitatea de a crea un mediu universal.
Consistența distinge medii de cultură solide și lichide. Dens preparate pe baza de lichid, prin adăugarea la ele a substanțelor adezive, agar-agar și gelatină! Agar-agar (în malay - lăptișor) - produse de origine vegetală, extrase din alge marine. În apă agar-agar este dizolvat la o temperatură de 80-86 ° C, se solidifica la 36-40, și, prin urmare, este folosit pentru a sigila mediile nutritive pentru cultivarea microorganismelor din diferite grupuri, la o temperatură optimă pentru ei.
Clasificarea mediilor de cultură realizate de compoziție și scop
compoziția 1.Po mediilor de cultură sunt împărțite în simple și complexe
Distinge grup de mass-media de uz general - comun. Acest grup include carne-peptonă (simplu bulion nutritiv), carne agar cu extract
al doilea grup 2.Ko include electives de mediu, diagnostic special și diferențial.
mediu elective (votare selectivă, depozitare, îmbogățire). Principiul creării medii nutritive elective bazate pe satisfacerea nevoilor biochimice și energetice de bază ale speciilor de microb, cultura cărora le sunt destinate, sau pentru a adăuga inhibitori care inhibă creșterea microflorei însoțitoare. O compoziție și concentrația de nutrienți, oligoelemente, factori de creștere sub valoarea pH-ului strict definit sau inhibitori adăugarea specifică asigură condiții optime pentru cultivarea uneia sau mai multor specii de microorganisme. Când le semănați un material care conține un amestec de diferite bacterii, toate vor provyalyatsya inainte de creștere de tipul pentru care mediul va fi electivă. Exemple sunt selecție mediu gălbenușul bulion selenitovy bulion, miercuri Ploskireva - pentru creștere microbi familie intestinale apă peptonată alcalină - pentru Vibrio cholerae.
bulion vitelin. Pentru MPB adăuga 10-20% bilă de bovină. Bilă inhibă creșterea bucătarilor și florei aer, dar este favorabil pentru reproducerea Salmonella.
bulion Selenitovy. Se compune din bulion fosfat suplimentat cu selenit de sodiu, care este un inhibitor al dezvoltării florei coccal de E. coli, dar nu întârzie creșterea Salmonella.
Miercuri Ploskireva. mediu solid conținând inhibitori de Escherichia coli, filaturi, dar este favorabil pentru creșterea Salmonella și Shigella, reproducerea care nu este săruri verzi și biliare strălucitoare inhibat.
apă peptonată. Conține 1% peptonă și clorură de sodiu 0,5%. Medium este electiv la clor vibrios ca acestea sunt mai bune decât alte bacterii multiplica în „mass-media foame“, mai ales în reacție alcalină, pentru că ei înșiși secreta reziduuri acide.
mediu special. Necesare pentru cultivarea bacteriilor nu este în creștere pe medii nutritive simple. Pentru unele organisme un mediu de cultură simplu trebuie să adăugați carbohidrați, sânge și altele. Nutrienți suplimentari. Exemple de mediu nutritiv simplu sunt zahăr și bulion agar pentru streptococ (respectiv pregătirea BCH și IPA, la care se adaugă 0,5-2% glucoză).
Pentru pneumococic și mediu special meningococice sunt și zer bulion agar (pentru prepararea bulionului de zer a fost amestecat cu 1 parte BCH 2 parti ser proaspăt pentru a primi, se adaugă ser agar la topit IPA 10-25% cal sterilă sau ser bovin).
mediu de diagnostic diferential este utilizat pentru determinarea speciilor care aparțin microbului bazate pe particularitățile metabolismului. " Conform scopului de media-diagnostic diferențial este partajat după cum urmează:
1. Mediu pentru a identifica microbi proteolitice, care conține în compoziția sa lapte, gelatină, sânge etc.
2. Dintre carbohidrații și polioli pentru
detecta diverse enzime saccarolitic.
Structura mass-diferențiale de diagnostic pentru detectarea proprietăților saccarolitic și enzimelor redox, indicatori introduse: roșu neutru, fucsin acidă, bromtimol albastru, albastru cu acid apos roz (BP). Prin schimbarea culorii la pH-uri diferite, indicatorul indică prezența enzimei și scindarea ingredientului intrat în mediu.
Exemple de medii de diagnostic diferential:
Miercuri Endo. Este format din MPA suplimentat cu 1% lactoză și sodiu sulfit înălbită fucsină bazic (LED). Miercuri Endo are culoare slaborozovy. Folosit în diagnosticare pentru diferențierea infecțiilor intestinale bacterii care se descompun lactoza cu formare de produse acide din bacterii, nu au această capacitate. colonii Laktozonozitivnyh de microbi (E. coli) sunt roșii de recuperare magenta datorate. Coloniile lactosonegative microorganisme - Salmonella, Shigella, etc. -bestsvetny ..
Pentru medii-diagnostic diferențial sunt scurte și neambalate rând pestriță. Acesta constă dintr-un mediu cu carbohidrați (mediu Hiss), BCH, lapte, gelatină carne-peptonă.
Șuieră mediu elaborat pe baza de apă peptonată la care se adaugă mono- chimic pure, di- sau polizaharide (glucoză, lactoză, amidon, etc.).
Pentru detectarea modificărilor pH-ului ca urmare a formării de acid și descompunerea carbohidraților adăugat la indicatorul mediu. La un clivaj mai profundă a carbohidraților produși gazoși (CO2, CH4 etc.) care sunt detectate folosind flotoare - probirochek mici, coborâte în mediu cu susul în jos. Medium cu carbohidrați pot prepara dens și - cu adăugarea de 0,5-1% din agar agar. Apoi gazarea formării bulelor prins în capcană (discontinuități) în mediul de coloană.
La CCB face parte dintr-o serie pestriță, descoperi produsele fabricate prin scindarea aminoacizilor și leptoni (indol, hidrogen sulfurat). Hidrogen sulfurat este detectată prin plasarea BCH după benzile de cultură inoculare de hârtie de filtru impregnată cu o soluție de acetat de plumb. După separarea aminoacizilor care conțin sulf, hidrogen sulfurat este eliberat, hârtia devine negru din cauza formării de sulfură de plumb. Pentru a determina indolul poate utiliza un indicator complex. Indole format în scindarea triptofan, și poate fi detectat atunci când este adăugat la cultura cultivate pe BCH, acest indicator. În prezența indolului MPB este vopsit în verde sau albastru.
Agar nutritiv, iar mediul diferential principal de diagnosticare disponibile în prezent sub formă de preparate uscate care conțin toate piesele necesare. Aceste pulberi trebuie doar să adăugați apă și se fierbe, apoi, după turnare, se sterilizează.
Chiar și lucrează în biologie