Denaturarea poate fi parțial reversibilă, iar proprietățile originale recuperate - cantitativ diferite. [C.211]
Studiul se bazează pe izolarea și purificarea proteinelor astfel de proprietăți de proteine definite. ca solubilitatea, taxa de disponibilitate. greutate moleculară. La diferentele de solubilitate de proteine metode bazate extragerea sărurilor, și anume precipitarea proteinelor cu sulfat de amoniu sau clorură de sodiu. O astfel de precipitare este Denaturarea reversibil, astfel ca proteine adăugarea de apă din nou se dizolvă și își pierd proprietățile lor native. [C.24]
Atunci când este încălzit peste temperatura proteinelor inerente organismelor vii. sau atunci când sunt plasate în condiții acide sau bazice neobișnuite pierde treptat proteine caracteristice pentru structura lor secundară sau terțiară. În acest caz, proteina își pierde activitatea biologică. și spune. este denaturat. În cazul în care veniturile denaturante în condiții foarte blânde, adesea este reversibil, adică atunci când se întorc la activitatea biologică normală a proteinei [c.449]
La concentrații ridicate de uree sau de clorhidrat de guanidină în soluția apoasă vine la o denaturare completă. care, în unele cazuri, este reversibilă după îndepărtarea denaturantului prin dializă. Agenții denaturante marcate sunt utilizate pe scară largă, deoarece acestea pot atinge concentrații mari în soluții apoase. Tulburarea cauzează de asemenea anumite săruri ale [23] și (într-o măsură limitată) detergenți, cum ar fi dodecil de sodiu [24]. Peste generalizări în acest domeniu este greu posibil, deoarece unii aminoacizi cu grupări funcționale din catenele laterale a fost observat surprize, cum ar fi poli (l-benzil- -zu tidin) în soluții care conțin cantități mici de acizi minerali simpli ia o conformație dezordonată, atunci în prezența unei cantități stoichiometrice de acid percloric există în formă de spirală. In plus, a fost raportat [26], că prezența dodecil de sodiu crește ordonarea enzima elastază. începând cu un nivel destul de scăzut de îndepărtare a detergentului prin rezultatele de dializă într-o proteină globulară în p-forma preferată. [C.433]
Studiile au aratat ca substante moleculare. izolat din soluție prin sărare afară. după spălarea acestora din electrolit poate fi re-transferate în soluție (fenomenul este reversibil). Coloizii că în timp ce eliminarea factorilor care cauzează coagulare, capabil să se deplaseze de la un stat la altul gelul sol sunt numite coloizi reversibile. Cu toate acestea, substanțe cu molecule mari pot precipita ireversibil și în anumite condiții. O astfel de precipitare ireversibilă a polimeri, în special proteine, sub influența căldurii. RCT acizi și alcalii expunere concentrat, taninuri. energie radiantă se numește denaturare. Când Denaturarea se produce nu numai polimerii de depunere. dar, de asemenea, schimba natura lor chimică. Proteinele Denaturarea devin insolubile și, în cele mai multe cazuri pierde capacitatea de a se umfla. [C.383]
Numeroase observații arată că Denaturarea este reversibilă. Multe proteine, cum ar fi hemoglobina, albumina serică. tripsina și chimotripsina. denaturat și apoi depozitat în soluție la temperatură scăzută. dobândi din nou (uneori după îndepărtarea agentului de denaturare), toate proprietățile proteinei originale, și anume intervalul de solubilitate, tendința de a cristaliza, 8H mascare anumite grupe și 8-8 și activitatea enzimatică. În unele cazuri, puteți explora chiar și echilibrul dintre proteine naturale și denaturată. Cu toate acestea, în alte cazuri, după denaturare are loc transformare mai profundă a moleculei, și o revenire la starea inițială nu este posibilă (de exemplu, denaturarea proteinei ou este ireversibil). [C.440]
În aceste cazuri, există așa-numita agregarea proteinei denaturate - fenomenul este extrem de răspândită și a studiat în mod repetat. În agregarea limită conduce la o pierdere completă a solubilității - proteină precipitarea floc din soluție, dar în soluții concentrate - pentru gelificare. Un exemplu tipic al proteinei, este puternic agregarea Denaturarea este albumina de ou. Unele fenomene Denaturarea proteinelor sunt reversibile. De obicei, această proteină este puternic întărită prin legături disulfidice. [C.85]
De asemenea, puteți determina dacă albumina Denaturarea este reversibilă. determină o modificare a pH-ului. [C.457]
Astfel, am studiat [14] Activitate optică -glut poli-aminoacizi și sa constatat că, atunci când schimbarea pH-ului 7.0-4.5 schimbare reversibilă are loc [a] 54b de la -120 ° până la -8 °. Acesta este asociat cu o modificare a rotației optice. Denaturarea observat de anumite proteine. [C.638]
Fenomenele de denaturare reversibilă a proteinelor apar într-un organism viu, este posibil ca aceste procese Fig. 92. Schimbarea formei polipeptidei legat catenei reciprocă convertit la trecerea de la proteină nativă NCU activă și inactivă (a) printr-o fază intermediară (b) forme ale enzimei și la forma respectiv denaturat (în) hormonii vuyuschih și tak [c.212]
Când valorile limită ale pH-ului moleculei de proteină începe să desfasurati și se spune. Ea își pierde proprietățile sale naturale. Acest proces poate fi fie reversibil sau ireversibil în funcție de natura proteinei și procesarea acesteia. Denaturarea (pierderea proprietăților naturale ale) adesea ireversibile, deoarece aceasta este însoțită de o scădere semnificativă a solubilității și proteină se precipită din soluție. Proteinele pot fi denaturat prin încălzire, chiar și la un pH neutru, sau prin adăugare de uree (NGY) 2S0 sau alte substanțe. care slăbesc legăturile care dețin o proteină într-o formă globulară. [C.603]
Denaturarea. proteină macrostructură determinat echilibru foarte delicat între forțele atractive și respingătoare care acționează între biopolimer și mediul apos înconjurător. Este necesar să se rupă acest echilibru, întreaga organizare structurală a polipeptidei, în plus față de primar. dispar cuvinte ppymi, va denatura. În funcție de gradul de perturbare a structurii și naturii denaturarii proteinei poate fi fie reversibil sau ireversibil. Un exemplu clasic al unui ireversibil al Denaturarea proteinei este o yaichiogo de coagulare atunci când este gătită ou când albumina de ou (proteine) suferă Denaturarea termică. [C.412]
Cazul extrem al modificărilor conformaționale - denaturant proteine. care pot fi cauzate de încălzirea sau tratamentul cu diverși reactivi. cum ar fi acizi și baze puternice, uree. clorhidrat de guanidină și dodecil sulfat de sodiu. Rezultatele denaturante în desfășurarea moleculei de proteină. și merge într-o stare mai mult sau mai puțin dezordonată (aici aproape nici spirale, nici (3-straturi sau orice alt tip de ambalaj lanț obișnuit). denaturată grupe de lanț peptidic amidă de stat formează legături de hidrogen cu moleculele de apă din jurul acestor legături de hidrogen semnificativ mai mare decât intramoleculară. activitatea biologică specifică a proteinei se pierde după denaturare, modificate și proprietăți fizice. cum ar fi constantă de sedimentare variază. vâscozității și absorbția luminii. uşurinţa cu care produ merge proteina Denaturarea. Faptul că, în principiu, Denaturarea reversibilă. sugerează că diferența de energie dintre conformație pliată și o conformație deschisă a bobinei aleatoare este mică. [c.105]
Un al doilea exemplu al unui proces de cooperare este Denaturarea reversibil al lanțurilor polipeptidice pliate. Valoarea pH-ului mediului soluțiilor de anumite proteine poate fi redus la aproximativ 4 prin adăugarea de acid, fără protonare cu grupuri. ascuns în interiorul Globula de proteine. pentru care p / C> 4. Cu adăugarea în plus o cantitate mică de acid este protonat cel puțin o parte din grupul principal. care determină desfășurarea lanțurilor polipeptidice și pune la protonarea ascunse anterior în structura mai multe grupuri de bază. Astfel, legarea în acest caz proton este un proces de cooperare. și, ca și pentru tiamină cauzate cooperativeness este o schimbare conformațională. cauzată de protonarea unui anumit grup. [C.263]
În ceea ce privește proteinele globulare solubile (de exemplu, hemoglobina, insulina, gamma globulină. Ovalbumină), problema naturii structurii secundare mai complicate. Acumulăm date conform cărora, în acest caz, un helix joacă un rol esențial. Astfel de lanțuri peptidice lungi nu sunt identice în structura pe întreaga lungime a porțiunilor individuale ale acestora sunt laminate într-o spirală și sunt alte porțiuni relativ rigide formează bucle, răsucite la întâmplare și destul de mobil. Se constată că, la o proteină denaturată regiuni elicoidale sunt nerăsucite și lanț în ansamblu dobândește o structură dezordonată. (Cu toate acestea, experiența a arătat că, în anumite condiții și apariția detensionarea helix poate fi proces reversibil revine la structura secundară de proteină inițială. Deoarece este aranjamentul cel mai stabil pentru un circuit cu o secvență de aminoacizi dată.) [C.1061]
Tratamentul de echilibru Denaturarea fenomenelor, strict vorbind, se aplică numai pentru Denaturarea reversibilă. Denaturarea observate în cele mai multe cazuri, parțial sau complet [c.248]
Acest tip de calcul este posibil, desigur, numai în cazul în care este reversibilă și denaturarea rezultatelor între proteinele native și denaturate stare de echilibru reversibil instalat. Kunitz a aplicat această metodă de calcul Un inhibitor al tripsinei Denaturarea I obratilmy (proteina de soia) și a constatat că egală cu +57 Ltd. cal per 1 mol proteină [188]. O altă metodă. Kistiakovskii folosit. Se bazează pe determinarea calorimetrică a următoarelor două căldurile de reacții [c.158]
Denaturarea și renativatsiya ADN. Hibridizarea ADN - ADN si ADN - ARN. Dublu catenar structura ADN-ului în timpul încălzirii, valori extreme ale pH-ului, procesarea ureei poate deveni formă dezordonată de bobine - denaturate. Moleculele de acid nucleic absorb maximă în ultraviolet la 260 nm datorită absorbției de baze azotate. O soluție de ADN nativ la 260 nm are o densitate optică sub 40% din optic mix nucleotida densitate -. efect hipercrom. De aceea, Denaturarea ADN-ului este judecat prin creșterea E250- La încălzirea absorbanța la 260 nm crește într-un interval îngust de temperaturi (punct de topire 80-85 ° C). Denaturarea este reversibilă dacă este lăsat site-uri de ADN elicoidale. Recuperarea structurii ADN-ului după îndepărtarea factorului de denaturare (datorită împerecherea bazelor complementare de nucleotide) numite ADN renativatsiey. Pe fenomenul metodei de hibridizare bazate pe Denaturarea renativatsii. [C.295]
Fig. 4.3. Reprezentarea schematică a conformația proteinei native și procesul de denaturare. În caz de circumstanțe denaturante reversibile. Literele N și C se referă, respectiv, la KNa- și COOH resturile koitsevym.
Denaturarea dshke reversibilă după separarea completă a celor două circuite. Când catene complementare sunt incubate la o temperatură de aproximativ 25 ° C sub temperatura de topire a originalului duplex, ele încep să reassociate pentru a forma o spirală începând în anumite condiții. Acest proces este numit walkie-Renata sau recoacere. [C.12]
Astfel de tranziții kopformatsioinye lizozim au fost, de asemenea, găsite într-o serie de lucrări prin alte metode. Astfel, în [157], tranziția conformațională reversibilă de lizozim într-o regiune de pH alcalin este controlată de grupul ionic cu un pK de 9,9. În [158] sa constatat că valorile scăzute ale pH-ului St. lizozima suferă Denaturarea reversibilă, a cărui rată depinde de iopizatsii grupe carboxil libere ale enzimei cu un pK în regiunea 1,4-1,8. lucrari Conform ([159, 160]) gruparea carboxil cu o valoare pK anomalously redusă Vezi pagina unde Denaturarea reversibilă termenul menționat. [C.194] [c.151] [c.593] [c.316] [c.249] [c.119] [c.54] Biochimie Volumul 3 (1980) - [c.263]
Bazele Biological Chemistry (1970) - [c.152]
Enzimele imobilizați (1987) - [c.128]