1. Etiologia botulismului
2. Epidemiologia botulismului
Botulismul se produce în toate părțile globului. Cu toate acestea, este mai des înregistrată în țări în care populația consumă un număr mare de alimente conservate diferite. În Europa de Vest, în special în Germania și Franța, boala a fost asociată cel mai adesea cu consumul produselor conservate de origine animală: șuncă, cârnați, pești. În Statele Unite, focarele botulinice au fost cauzate în principal de consumul de conserve de legume, fructe și pește. Potrivit Meiiepa (. Meyer 1928), 1735-1924 în Europa de Vest a fost boala P. 4144 fatale - 1271. In Anglia, 1860-1926 au raportat 75 de cazuri cu două decese. În Statele Unite, din 1889 până în 1926, B. a fost bolnav de 1.816 de persoane, dintre care 1.163 au decedat; în Franța, în timpul ocupației germano-fasciste din 1940-1944. au existat 417 de focare de botulism cu un total de peste 1000 de persoane. În cele mai multe cazuri, cauza otrăvirii a fost șunca și conservele la domiciliu. Potrivit datelor literare, în Rusia prerevoluționară din 1818 până în 1913 au existat 101 focare de botulism, în timpul cărora 609 de persoane s-au îmbolnăvit. a murit 283 (46,8%). Din 1920 până în 1939, potrivit rapoartelor de presă, în URSS au apărut 62 de focare de botulism, 674 de persoane s-au îmbolnăvit. Au murit 244 de persoane (36,2%).
Spori cu flagelă în Clostridium bolulinum. A. Cultura veche de 6 zile pe bulion (microscopie electronică, x 11 500).
Există 5 tipuri de agenți cauzali ai botulismului aparținând genului Clostridium: CI. botulinum A (van Ernienghem, 1896), Cl. Botulinum B (Louch, Dickson); CI. botulinum C, (Bcngtson, 1922), CI. botulina C, (Seddon, 1922), CI. botulina D (Tlieiler, 1927), CI. botulinum E (ED Kushnir, 1934), care sunt aproape una de cealaltă în ceea ce privește proprietățile morfologice, culturale și efectele patofiziologice ale toxinelor lor asupra corpului. Cu toate acestea, toate tipurile diferă în proprietățile antigenice ale toxinelor care sunt neutralizate doar seruri antitoxice omoloage. Toți agenții patogeni botulism au forma unor tije mobile cu capete rotunjite în lungime de la 4 la 8ts și o lățime de 0,6 până la 0,8, în bacilii de preparare sunt izolate sau în perechi, uneori în lanțuri scurte. spori de clostridium dezonorat formă, situată în celulă, în cele mai multe cazuri subterminal rar la nivel central. Sporii, care nu sunt eliberați din membrana celulei, au flagel. Flageli, numărul la 3 la 20, sunt amplasate pe tot corpul microbului, dar nu se găsesc în toate celulele. La primele ore ale reproducerii prin flageli de microscopie electronică în majoritatea memoriilor nu sunt detectate, ele apar de obicei mai târziu (Fig. 2, 3 și 4). Odată cu îmbătrânirea microbilor, flagelul poate dispărea treptat.
Agenții cauzali ai botulismului sunt colorați cu diferite vopsele de anilină. Celulele tinere sunt colorate în conformitate cu Grana într-un mod pozitiv; când cultura se maturizează, după 4-5 zile, apar tot mai multe bare gram-negative. CI. botulinum A, B, C, D și E sunt anaerobe stricte, foarte sensibile la oxigen. Pe suprafața tipurilor de suporturi solide A și B cresc aproape la îndepărtarea completă a oxigenului, presiunea aerului rezidual este permisă de la 3 la 10 mm Hg. tipurile D și E necesită eliminarea completă a oxigenului. In patogenii mediu lichid B. cresc mai bine, în cazul în care pre-mediu pentru a îndepărta aerul supus „fierbe timp de 10- 20 minute și apoi răcit rapid după însămânțare se toarnă ulei vaselina top. Pe agar cu sânge, cu 0,5-1% glucoză prin 24- 48 de ore germeni cresc sub formă de colonii netede sau brute, înconjurate de o zonă de hemoliză.
La începutul creșterii coloniei de microbi sunt foarte mici, strălucitoare, sub formă de picături de rouă, atunci ele cresc, devin brumăriu cu margini netede sau crestate. În agar, două tipuri de colonii formează coloana de agenți cauzali ai botulismului: discoide și "fluff". Patogenii botulism de asemenea crește pe medii de carne și peptone ficat perfuzii cu glucoză% 0,5-1 (mediu Tarotstsi) extractelor hidrolizat de cazeină și pește din tărâțe de grâu sau de extract de porumb. Temperatura optimă pentru creșterea tipurilor A, B, C și D 34-35, pentru carton E 25-28 °, pH mediu 7.4-7.6. Tipurile de A și B au proprietăți proteolitice foarte puternice. Tipurile C și D nu au astfel de proprietăți. Tin E are proprietăți proteolitice slabe. Bacilii lui B. sunt, de asemenea, proprietăți zaharolitice active. Toate tipurile descompun zaharurile cu formarea de acid și gaz.
Agenții cauzali ai botulismului produc toxine foarte puternice, provoacă otrăvire atunci când sunt administrate sub piele, prin gură, prin sistemul respirator și prin administrare intravenoasă. O caracteristică caracteristică a toxinelor este rezistența la acțiunea enzimelor digestive. Toxinele sunt produse de patogeni B. în diverse alimente, în special conservate, în hrana animalelor, pe medii artificiale și la oameni și animale. Datorită efectului lor asupra organismului uman și animal, aceste toxine depășesc toate celelalte toxine bacteriene și otrăvuri chimice. În condiții artificiale, este posibil să se obțină toxine native de tip A, B, C și D care conțin 500.000 până la 1 milion și Dim la 1 milion, iar tipul E la 150.000 Dim în 1 ml pentru un șoarece alb. În timpul multiplicării bacteriilor, o parte din toxină difuzează în mediul înconjurător, iar unele dintre ele se eliberează când bacteriile sunt distruse. O parte semnificativă a toxinei este întotdeauna în celulele microbiene. Puterea toxinei depinde de tulpina care a servit la prepararea acesteia, mediul și condițiile de cultivare a microbului. Un rol important îl joacă microflora însoțitoare, care stimulează sau inhibă producerea de toxine. În tipurile A și B, proprietățile toxigenice sunt mai constante. Toxinele botulinice sunt purificate și concentrate prin precipitare cu sulfat de amoniu la o saturație de 40-60% sau cu acizi (HCI) la pP = 3,5-4,0. Toxinele purificate sunt uscate și astfel se concentrează și mai mult. Într-un gram dintr-o astfel de toxină poate conține până la 250-500 de milioane Dim pentru un șoarece. Toxina cristalină de tip A conține 32 de miliarde de lămâi în 1 g de șoarece (Figura 7); este o proteină cu punct izoelectric la pH = 5,0-6,0, care are proprietățile globulinei.
Toxinele agenților patogeni B. sunt foarte rezistenți la efectele factorilor fizici și chimici. Toxina tip C este cea mai rezistentă, toxinele A și B ocupă poziția de mijloc, toxinele D și E sunt mai puțin rezistente. La o temperatură scăzută, toxinele sunt mai stabile decât la temperaturi ridicate. În mediu acid (pH = 3,5-6,8), toxinele sunt mai rezistente decât în neutru sau alcaline; la pH = 7,0-8,0 reduc rapid proprietățile lor toxice. Din acțiunea a 2-3% toxine alcaline sunt distruse rapid, concentrațiile mari de NaCl din alimente nu le distrug. În produsele alimentare conservate, toxinele persistă mult timp chiar și sub influența razelor solare și a aerului. Când depozitați conservele în întuneric și în frig timp de 6-8 luni. toxinele sunt doar slab slabe. Ele sunt rezistente la efectele bacteriilor putrefactive în lumină la o temperatură de 20-25 ° în stare umedă. Toxina botulinică are o anumită rezistență la temperaturi ridicate: când este încălzită la 58 °, se rupe după 3 ore, la 80 ° după 30 de minute și la 100 ° timp de câteva minute. Stabilitatea toxinelor la temperaturi ridicate depinde de tipul de produs, de soluțiile sărurilor prezente în acesta și de rP. În prezența grăsimilor, concentrații mari de zaharoză, toxinele devin mai rezistente la temperatură.
În produsele alimentare, în hrana animalelor și în medii artificiale, agenții cauzali ai botulismului formează spori densi, greu de colorat, foarte rezistenți la factorii chimici și fizici. Într-o stare uscată, sporii pot rămâne viabili timp de decenii, în condiții favorabile, ele cresc în forme vegetative care înmulțesc și produc toxine. Sporii pot tolera efectul temperaturilor foarte scăzute: nu mor nici măcar la -190 ° și la -16 ° persistă mult timp. Cu toate acestea, în timp ce unii dintre spori sunt distruși și eliberează toxina; astfel încât produsele care conțin o cantitate mare de spori, după îngheț poate deveni otrăvitoare.
Litigiile culturilor tinere sunt mai rezistente la încălzire decât sporii culturilor vechi. Sporii cele mai rezistente de tip A tipuri mai puțin stabile B, C, E. Mediul care conține o cantitate semnificativă de grăsime, spori sunt mult mai rezistente la temperaturi ridicate. Sporii A și B tolerează bine fierberea timp de 5 ore și mor la această temperatură după 6-8 ore; când se încălzește la 105 ° die după 1-2 ore, la 120 ° după 20-30 minute. Există tulpini de agenți patogeni B. ale căror spori sunt transferați la 120 ° timp de mai multe ore. După expunerea la temperaturi ridicate la însămânțarea pe medii nutritive, sporii nu pot să germineze foarte mult. Spori de botulism patogeni rezistenți la substanțe bactericide: HCl 10% le distruge la temperatura camerei în doar o oră; 20% soluție de formalină după 24 de ore; alcool etilic după 2 luni. La semănat spori în gastric, sucuri și biliare intestinale și pancreatice în ele germina, iar în unele cazuri, produc toxine, ceea ce indică o posibilă germinare a sporilor în intestinul oamenilor și a animalelor.
A fost stabilită o distribuție largă a agenților patogeni de botulism în natură. Locul habitatului lor permanent este solul din care acestea se încadrează în apă, în hrană hrană, animale, in intestine de oameni si animale, păsări și pești, care reproduc. Omul și animalele cu fecalele lor pot împrăștia bacteriile de botulism pe suprafața pământului. În condiții favorabile, solul este de asemenea posibilă creșterea microbiană botulism în sol din Anglia, Scoția, Belgia, Olanda, Suedia, găsit tipuri de botulinice A și B, în Franța și Rusia sunt tipuri comune A, B, C, și E, în Germania - tipurile A, B, , C și E. din cele 25 de probe ale nămolului, luate în marea Caspică lângă Mahackala, în 2 cazuri bacteriile descoperite de tip un B. (SN Muromtsev și GM-Kaljuzhnaja Loukachevitch, 1937). Din intestine și din alte organe de pește roșu, tipul E a fost desemnat (ED Kushinr, 1934, 1937). La izbucnirea B. nurci în Kazan a fost izolat de tip C (K. N.Matveev, Bulatov, TI, TP Sergeeva, 1956). Agenții patogeni ai botulismului sunt răspândiți în SUA; California agent cauzativ de tip botulism A fost izolat din sol în 22,1%, iar tipul B este de 3,1%, în Canada - și în 16% și de tip B - 5% din probele studiate (Meyer și Dubovs-Ly, 1922) și așa mai departe.
Toate produsele agricole și industriale contaminate cu sol și fecale umane și animale pot fi infectate cu agenți patogeni botulinici. Intensitatea infecției depinde de condițiile sanitare și tehnologice de procesare și depozitare. În SUA, bacteriile au fost găsite în mod repetat în conserve de legume prost conservate. Într-o serie de cazuri, acest microb și toxina sa au fost găsite în măsline umplute. AE Burov și colaboratorii în 1935 au descoperit agenți patogeni botulinici la pește în proporție de 17,5%, în pește conservat - în 8,3%, în legume - în 2,7% din probele prelevate. La studiul a 44 de probe de caviar din 16 sticle, tipul A și toxina au fost detectate în 4 cazuri. Acest caviar a provocat în Dnepropetrovsk în 1933 un focar de B. înghițit 230 de persoane. (LV Gromashevski, 1947, TM Brun și colab., 1937). Caspice roșu pește (EV Glotovo și colab., 1935) și Asov morenei (AE Burova 1935) B. patogenii au fost găsite în 18-20% din probe, și a constatat că peștele conține aceste bacterii in intestin in vivo .
Sa stabilit că un pește care conține o toxină, tăiat cu bucăți de 3-4 cm grosime și fiert timp de 1 oră la o temperatură de 100 °, devine netoxic; toxina este distrusă, dar sporii rămân în viață. Dacă acest pește este lăsat peste noapte la 15-17 °, toxina se formează din nou și poate provoca intoxicații. Dezvoltarea toxinei botulinice în pești poate să apară înainte de sărare. În cazul depozitării peștelui fără îngheț, toxina este produsă în primele zile de salinitate, în timp ce concentrația de sare din masa musculară nu este încă suficientă pentru a întârzia formarea de toxine. Infecția peștilor roșii și parțiali cu agenți cauzali ai botulismului poate apărea endogen - din intestin și exogen - din mediul extern; Condițiile sanitare de prelucrare, transport și depozitare joacă un rol decisiv în acest sens. Peste, transportate și depozitate în vrac, în vrac, a fost de 7 ori mai frecvent infectate cu bacteria botulism decât peștii depozitate și transportate în containere (KI Matveev, 1936, 1943, 1949).
Un rol important în epidemiologia lui B. joacă o varietate de animale. Ca purtători patogeni botulism în intestin, acestea sunt o sursă de contaminare a alimentelor, furajere, solului etc. D. INSTALAȚII transportul de bacterii din intestin în cai, vite, porci, pui, rozătoare etc..; contaminând cu produsele lor de fecale, furaje, sol, etc., ele duc la o contaminare extinsă a agenților patogeni ai mediului. De exemplu, folosind 50 de șobolani per plantă pești patogeni pe suport B din organele lor și intestine 12 dintre acestea au fost izolate tipuri toxigenic A sau B (KI MATVEEV, 1938). În același timp, atunci când se taie carcase de animale în abatoare, carnea lor se poate infecta cu apariția ulterioară a bolilor la oameni.
În Statele Unite, Canada, Uruguay, botulismul are focare naturale. Mortalitatea în masă a păsărilor sălbatice din ea a fost observată în mlaștinile adiacente malurile unor lacuri și râuri. În câțiva ani, a ucis sute de mii de păsări; dintre animale au murit muskrats, broaște și nevăstuici care au mâncat cadavrele păsărilor (Kalmbach u. DPI-derson, 1934). Păsările mor în astfel de locuri de turbării în cazul în care există încă apă și noroi porțiuni mici alkalescent reziduuri de plante bogate. In zilele calde, crearea condițiilor favorabile pentru dezintegrare cu creșterea absorbției de oxigen. Aceasta promovează creșterea botulinică de tip C și formarea unei toxine puternice în mlaștini de apă și noroi. Păsări în zbor între masele se acumulează în mlaștini: înot, bea apă, să mănânce semințe și mor. Tipul de microb botulinum C a fost distribuită dintr-un organism sănătos și păsări bolnave botulism, din corpurile lor, care a fost observat un puternic toxina C. botulinum și a fost detectat toxine în apă, reziduuri de alge, melci, murdărie în larve de muște de pe corpurile de păsări, plutind în apă, și așa mai departe. d. de la focarele botulism patogeni naturale în timpul zborurilor de păsări pot fi transferate în alte locații ale globului.
Botulismul patogeni se poate reproduce bine pe țesutul rănit necrotic. Posibilitatea existenței botulismului rana la om a fost demonstrată experimental (KI Matveev, 1938, 1949). În clinică sa observat botulismul rănilor (Thomas, Kel-clier și McKee, 1951, Davis, Matt și Vi-ley, 1951 etc.). A fost stabilită o contaminare ridicată a bacteriilor B. de câteva loturi de catgut (Tardicux, Iluet și Bjarklund, 1952). Pe piele (2,5%) și uniformă (5,7%) printre soldații americani răniți în timpul intervenției în Coreea în 1952-1953. a găsit agenți patogeni B. tip A și B.
Botulismul bolii a fost observat chiar și în acele cazuri în care o persoană a luat în gură un produs contaminat cu toxine, dar nu la înghițit. Doza letală a unei toxine de tip B care pătrunde prin gură este egală cu 3500 Dim pentru șoareci (Meyer și Eddi, 1951). Toxinele botulinice sunt repede absorbite în stomac, intestine și afectează simultan direct mușchii netezi, provocând starea spastică și paretică a intestinului. Prezența toxinelor în sângele pacienților cu botulism la om și la animale a fost dovedită experimental.
Deteriorarea endoteliul capilarelor și precapillaries conduce, pe de o parte, la o îngustare și, pe de altă parte - o încălcare a integrității și permeabilitatea crescută. Ca rezultat, toxina pătrunde în țesutul creierului, afectând în principal celulele ganglionare ale creierului. Expresia clinică a acestor leziuni este un fel polientsefalit Bulbo-Pontina și sindromul miastenic (vedere încețoșată, amețeli, tulburări de deglutiție, articulare, fonație și respirația t. D.).
Interesant, în lichidul cefalorahidian al oamenilor și animalelor care suferă de toxine botulism nu sunt detectate. Când botulismul afectează, de asemenea, la sfârșitul nervilor motorii și mușchi ai diafragmei. În acest sens, tonusul muscular brusc slăbit, ele devin păstos, extinderea nave ale pielii și viscerele, ritmul cardiac incetineste, slăbește peristaltismul firului, afectarea activității glandei secretoare. Toxina botulinică A acționează selectiv pas terminațiilor nervoase colinergice periferice, in timp ce tesutul adrenergic nu este sensibilă la toxina (Ambach, 1949, 1951). acțiunea zilnică repetată asupra organismului nu este doze letale (1/10, 1/50 Dim) din cauze toxina botulinica a crescut sensibilitatea la ele, iar animalele sunt ucise de botulism când se prepară 5/10 și 10/50 doză letală (K.'Y. Matveev 1947). Acest fenomen joacă un rol important în patogeneza de intoxicare. Cand ingestia de bacterii botulism uman sau animal se multiplica și să pătrundă în sânge și de acolo la toate organele. In studiul secrețiilor si sangele pacientilor cu toxina botulinica au fost găsite, indicând faptul că acestea circulă în organism la momentul botulism. Aproape toate corpurile de oameni care au murit de botulism, sa constatat, de asemenea, prezența agenților patogeni și a toxinelor botulism lor (BM Shapiro și VF Nikolenko, 1937). Toxina a fost detectată mai frecvent în 2-3 zile, și, uneori, chiar și pentru 6-8 zile după boală, indicând faptul că formarea sa în organism.
Semănarea rapidă a organismului cu bacterii de botulism a fost stabilită atunci când animalele au fost infectate prin gura cu doze mari de spori, în timp ce animalele experimentale au murit de toxina formată în organism.