Articolul reflectă caracteristicile de stocare a formelor lichide de prototipuri de noi biopreparate promițătoare bazate pe Bacillussubtilis pentru protecția grâului de toamnă împotriva bolilor în condiții de temperatură variabilă.
Cuvinte cheie: biopreparate, valabilitate, Bacillusubtilis, titru, activitate antifungică, Fusariumgraminearum
Articolul descrie caracteristicile de stocare a formelor lichide de prototipuri de noi preparate biologice în perspectivă pe bază de Bacillus subtilis pentru grâul de toamnă.
Cuvinte cheie: preparare biologică, perioadă de depozitare, Bacillus subtilis, titru, activitate antifungică, Fusarium graminearum
In laborator, crearea unei produse microbiologice de protecție a plantelor și colectarea microorganismelor FGBNU VNIIBZR, îngrășăminte chimice destinate pentru protecția grâului de toamnă de patogeni Fusarium pe baza a două tulpini de bacterii Bacillussubtilis BZR 336g și BZR 517. Este important ca noi medicamente au fost nu numai eficiente, dar stabilă, în timpul depozitării. Prin urmare, una dintre cele mai importante domenii de cercetare este studiul modificărilor activității produsului biologic în timpul depozitării în diverse condiții de temperatură.
Una dintre cerințele tehnice ale unei biopreparate moderne pentru protecția plantelor este conservarea activității pentru cel puțin un sezon de câmp. Unul dintre principalii indicatori ai calității biopreparatelor este titrul (numărul de unități care formează colonii (CFU) în 1 ml) și activitatea antagonistă față de agentul-țintă cauzator al bolilor plantelor. Acești indicatori au fost studiați în timpul stocării prototipurilor de preparate biologice în forma preparativă a culturii lichide (LC).
Probele de preparate biologice bazate pe tulpini B. subtilis au fost obținute utilizând două tipuri de mediu: cartof-glucoză (CGS) și un mediu nutritiv optimizat original (OS). Preparatele primite au fost stocate pentru stocare în două variante: cu acces și fără acces la aer. Efectul perioadei de valabilitate asupra viabilității celulelor bacteriene a fost studiat în condiții de temperatură variabilă într-o încăpere de laborator. Titrul preparatelor LC a fost determinat lunar prin metoda de diluție [5] și activitatea antifungică utilizând metoda contra-culturilor [6]. În studiul preparatelor pentru activitatea antifungică, a fost utilizată o cultură de testare a ciupercii fitopatogene Fusariumgraminearum Schwabe.
Rezultatele experimentului au arătat că titrul a scăzut semnificativ cu un ordin de mărime în condiții aerobe în prima lună de depozitare și în condiții anaerobe în 100 de milioane de colonii (Figurile 1, 2).
Apoi titrul a început să crească și a atins punctul culminant în a treia lună de depozitare. Trebuie remarcat faptul că, în condiții anaerobe în ambele tulpini, titrul în acest moment a fost mai mare decât înainte de depozitare. În cea de-a patra lună, acest indicator a scăzut într-o oarecare măsură (în aceeași ordine), dar a rămas stabil în următoarele trei luni (figurile 1 și 2).
Fig. 1. Activitatea titer și antagonistă a sușei LC B.b. subtilis BZR 336g pe KGS în timpul depozitării
Fig. 2. Activitatea titer și antagonistă a sușei B. subtilis BZR 517 LC asupra CHS în timpul depozitării
Activitatea minimă antifungică a tulpinei B. subtilis BZR 336g a fost pentru perioada anterioară depozitării (33-34%). În următoarele trei luni, inhibarea ciupercii F.graminearum a fost la nivelul de 45-55%, apoi în două luni a scăzut la 40-44%, iar în a șasea lună a crescut la 53-54% (Figura 1).
Activitatea antifungică a tulpinei B. subtilis BZR 517 a fost mai stabilă în timpul depozitării și a variat de la 40 până la 52%, cu excepția celei de a treia luni. În ciuda unui titru destul de mare, la a treia lună de depozitare, activitatea minimă antagonistă (35-36%) a fost observată în experiențele cu acces și fără acces la aer (Figura 2).
O tendință ușor diferită a fost observată în opțiunile experimentului pe sistemul de operare. Astfel, pentru primele trei luni, titrul sușei B. subtilis BZR 336g a scăzut în condiții cu și fără acces la aer. Titrul maxim în condiții aerobe a fost notat în a patra lună de depozitare și a fost mai mare decât înainte de depunere pentru depozitare. În condiții anaerobe, activitatea producătoarei de tulpini de biopreparate a fost scăzută, titrul a scăzut și până în a șasea lună nu a depășit 6,0 x 104 CFU / ml (Figura 3).
Titrul prototipului bazat pe tulpina B. subtilis BZR 517, atât în condiții aerobe cât și anaerobe, a scăzut în primele trei luni. Pentru a patra-a șasea lună în versiunea fără acces la aer, titrul a fost mai mare decât înainte de depozitul de depozitare. Dacă în varianta cu acces aer în a patra lună de depozitare numărul de unități care formează colonii a crescut ușor, dar a rămas cu un ordin de mărime mai mic decât înainte de depozitare (Figura 4).
Fig. 3. Activitatea titer și antagonistă a sușei LC B.subtilis BZR 336g pe OS în timpul depozitării
Fig. 4. Activitatea titer și antagonistă a tulpinei B. subtilis BZR 517 LC pe OS în timpul depozitării
Activitatea antagonistă a sușei B. subtilis BZR 336g în primele două luni după experiment a fost stabilită în condiții cu acces și fără acces la aer a fost de 68,5-73,7% și respectiv 69,3-75,6%. Apoi a început să scadă în a treia lună de depozitare, iar la al șaselea a scăzut cu 15-16% (figura 3).
Activitatea antifungică a tulpinii B. subtilis BZR 517 a schimbat brusc și la a șasea lună de stocare a scăzut cu 12%, în varianta cu acces la aer, și cu 21%, în varianta fără aer (inhibarea fungilor F.graminearum înainte de depozitare a fost de 75,2 și 72, respectiv 2%) (Fig. 4).
Analiza datelor experimentale au arătat că, în formularea microbiopreparations bacilului tulpinile antagoniști bazate pe LCD pot fi păstrate timp de șase luni la temperaturi variabile fără a introduce substanțe nutritive și stabilizatori, cu excepția variantei B. subtilis BZR 336g, depozitat în condiții anaerobe la OS. Și este modalitate ieftină și destul de avansate tehnologic în ceea ce privește utilizarea medicamentului pentru un sezon câmp.
2. Egorov NS Izolarea microbilor-antagoniști și a metodelor biologice de înregistrare a activității lor antibiotice. M. Izd-vo-Mosk. Universitatea, 1957. - 78 p.
Termeni de bază (generați automat). subtilis bzr, subtilis bzr 336g, Bacillus subtilis, tulpina b, bacilul subtilis bzr, în timpul depozitării, tulpina Activitate b, activă tulpina LCD tulpina LCD b și activitate antagonistă a LCD, stocarea luni titrului și activitate antagonistă, Bacillus subtilis pentru, subtilis bacilului pe bază, antagonistii bacterii subtilis bacilului, o tulpină de Bacillus subtilis, protejează grâu de iarnă, bacterii, subtilis bacillus, aer, activitatea antifungică a tulpinii.