Identificarea fagului de tipare a bacteriilor și a fagilor

În cazul în care rolul bacteriofagului, ca un mijloc de tratament și de prevenire a unor boli infecțioase, reduse în prezent, valorile pentru diagnosticul de laborator al infecției unui număr de obiect biologic este pierdut nu numai, ci, dimpotrivă, a început să atragă tot mai mult atenția cercetătorilor. În fiecare an, a crescut bacteriofagi semnificație ca un agent de diagnostic extrem de specific, care permite diferențierea agenților patogeni în mod fiabil de specii de bacterii, și, uneori, o diferențiere mai detaliată a tipurilor și variații specifice în cadrul speciei. Posibilitatea fagoidentifikatsii derivă din specificul acțiunii fagilor, care poate fi pronunțat, astfel încât ne permite să se diferențieze nu numai specii individuale, ci și tulpinile serologia pot fi distinse în cadrul aceleiași specii.

Se știe că locul principal în determinarea incidenței animalelor și a oamenilor aparține diagnosticului în timp util și precis al bolii, a cărui legătură principală este identificarea corectă a agentului patogen. Prin urmare, un număr tot mai mare de cercetători preferă să se refere la testele de fag, fiind singurul mijloc capabil să diferențieze tulpini strâns legate. Fagodiagnosticul se bazează pe capacitatea specifică a fagilor de a interacționa cu anumite specii (identificare) sau cu tipurile (tipizarea fagilor) a bacteriilor, rezultând în liza lor. Faza de liză este baza utilizării fagului în scopuri de diagnosticare. Metoda de fagodiagnostic este utilizată pe scară largă în practica de laborator pentru identificarea diferitelor tipuri de microorganisme.

Aplicarea cu succes a bacteriofagului dizenteric în studiile în vrac a fost raportată de VN. Kuznetsova (1956), care a identificat 576 de culturi din 630.

Pentru diagnosticul accelerat de tifoid Z.S. Ostrovskaya, BN Pajakova (1951) a propus un bacteriofag V1, care poate identifica culturile tifoide în 48 de ore.

Avrekh V.V. (1954) a propus utilizarea fagilor specifici pentru diferite specii de salmonella, considerând această metodă mai fiabilă decât reacția cu serurile monoreceptoare. Pentru diagnosticarea rapidă a VA. Kileso (1960) a folosit un O-fag de salmoneloză cu un spectru larg de acțiune, lizând 40 de serotipuri diferite de Salmonella. LI Adelson și colab. (1957) au fost obținute fagi activi împotriva Escherichia coli enteropatogenic serotip 026: 055: 0111 și aplicate cu succes pentru identificarea acestor bacterii.

Pophadze M.Z. (1968) în activitatea lor a indicat că utilizarea unui bacteriofag multivalente activ brutselloznogo având specificitate strictă specie, permite identificarea 93-99% din culturile de bacterii, inclusiv formele atipice, care determină o valoare ridicată de diagnosticare.

Una dintre primele în practica veterinară, identificarea fagului a fost propusă de Tsvetkov (1941) cu avort paratifid la iepe. PV Likhachev, în 1948, a efectuat un test de fag în diagnosticul de paratifoid porcin. Continuarea activității în acest domeniu de cercetare a confirmat importanța direcției alese.

NI Nikolaenko, I.K. Tutov (1970) notează promisiunea de a utiliza o bacterioză de liză Salmonella abortus ovis și care să permită scurtarea timpului de diagnoză la 4-6 ore.

Conform II. Revenko (1978) are o gamă destul de largă de activitate litice. La testarea 206 culturi S. enteritidis, izolată de la viței și vaci la momente diferite și în locuri diferite, acest fagi a fost lizat de cultură 164 (79,6%). În plus, el a lizat un număr semnificativ de culturi S. suipestifer și S. cholerae suis izolate de purcei. culturi în ceea ce privește E. coil, izolate de la viței, bovine și porcine de diferite vârste, Gaertner coli fagi apărut mai puțin activ: 270 din culturi se lizează doar 15,7% din tulpini.

În practica largă a laboratoarelor veterinare, bacteriofagele antrax K-VIEV și g-MVA sunt recomandate pentru identificarea bacteriilor antrax (.

Se folosesc și fagi de listerioză, care fac posibilă identificarea a peste 85% din culturile listeriei (NA Kapyrina, IA Bakulov, 1972).

În practica epidemiologică și epizootologică, metoda de tipificare a bacteriilor din fagi devine din ce în ce mai răspândită. Valoarea practică a acestei metode este determinată de stabilitatea relativă a fagotipurilor bacteriene. Ca V.B. Avrekh (1959), un fag de bacterii exprimă structura antigenică subtilă a bacteriilor care nu este captată de reacțiile serologice și poate fi determinată numai cu ajutorul bacteriofagilor. Stabilirea acestor diferențe subtile și face posibilă determinarea relațiilor epidemiologice sau epizootice, deoarece, în prezența unor astfel de legături, se disting tulpini de bacterii caracterizate de același fagomoză.

Metoda de fagotipare bacteriană poate fi folosită nu numai pentru a îmbunătăți calitatea cercetărilor epidemiologice și epidemiologice, dar și pentru a îmbunătăți diagnosticul de laborator ca metodă de identificare accelerată a microorganismelor.

Fagotiparea microorganismelor poate fi efectuată prin două metode. Prima metodă de fagotipare, care este cel mai des utilizată în practică, se bazează pe determinarea sensibilității culturii la preparatele standard ale bacteriofagilor specifici, luați la o anumită diluție. A doua metodă de fagotipare a bacteriilor constă în împărțirea lor în grupe în funcție de natura fagilor moderați eliberați din culturi. În practica medicală, această metodă este folosită foarte rar, iar în medicina veterinară nu este deloc folosită.

Pentru prima dată fagotiparea cu ajutorul așa-numitelor virusuri a fost propusă în 1938 de către J. Craigie, C. Yan pentru culturile agentului cauzal de febră tifoidă. În 1947, J. Craigie, A. Felix au elaborat o tehnică de tipare a bacteriilor tifoide, cu ajutorul cărora ar putea fi identificate 53 de tipuri de culturi tifoide-tifoide.

Valoarea practică a tipăririi bacteriilor tifoide cu virusuri a fost dovedită de un număr mare de cercetători. Bacteriile tifoide tiphoid sunt în prezent testate în conformitate cu schema standard dezvoltată de J. Craigia, A. Felix, (1947). Majoritatea cercetătorilor subliniază stabilitatea fagotipurilor bacteriilor tifoide.

lizotipia ca metodă de identificare a fost dezvoltat împotriva unui spectru larg de patogeni: tifoidă și paratifoidă A și tije de bacterii B Breslau (Craigie J. et all 1938. Gordin RV 1954 Gutorova LD 1958.). Scheme de tastare bacterii dysenteric sonnei (III), încercările cunoscute plazmokoaguliruyuschego tastarea de Staphylococcus, Enterococcus, bacteriile difteria). Un număr de fagi diagnostic: Modelul parathyphoid A și B, Vi-tifoidă, modelul dizenterie fagului la Sh.Sonne, coliphages, Staphylococcus și altele, folosite pentru a oferi bacterii diferențiere intraspecifice (Katz - Chernohvostova LY 1947, Krylov MD 1961 , Naukozgaliev SN 1978.). schema de original pentru fagotapirovaniya S.thyphimurium dezvoltat L.G.Chirakadze și colab. (1974). reacția litică a fost studiată în 2708 ca tulpinile de referință S.thyphimurium și muzeu, și izolat din diferite surse, folosind standard de 16 bacteriofagilor.

Krylova MD (1963, 1970, 1974), unul dintre primele gestionate utilizând metoda directă pentru a diviza cultura E.coil 0111 serotip 4 fagotipului. Studiind 104 lysogenic tulpini de bacterii difterie, a stabilit prezența statului lysogenic la 103. În 1974 godu recomandările elaborate pentru a construi scheme de fagi dactilografiere, care se bazează pe principiul nu denota phagotypes cifre și litere latine de capital A, B, C, D și etc. Acest lucru face posibil să se înregistreze în numele fagi de reacție slabe și puternice de tip fag care contribuie la reacții puternice, așa cum este indicat cu majuscule; fagii care dau reacții ușoare - în formă de litere mici. De exemplu, o tulpină lizat prin fagului A, B, C și D - Scurgere liza și fagul F și G - sub formă de plăci singur tip fage este numit ABCDfg.

Valoarea metodei de tipificare a fagilor este aceea că fagotipii sunt cei mai subțiri ai markerilor, iar definiția unui fagotitip marchează tulpina simultan pe mai multe etichete într-o combinație strict definită.

În practica veterinară, unul dintre fagi dactilografiere Davidenko TA aplicat mai întâi 1972, Nikitiuk N.M. 1970, Arkhangelsky I.I. Stepanov B.A. 1966, Ivashura AI 1967, Bayrak BA 1970, Petrushina LI 1967. In studiile lor, ele indică eficiența lizotipia Salmonella, care sunt alocate din diferite specii de animale, carne și alte substraturi; lizotipia stafilococilor, extras din lapte atunci când mastita la vaci, pentru a clarifica legăturile dintre aceste boli și boli foodborne la om. IP Revenco (1970) a stabilit că metoda permite de a distinge fagi dactilografiere erizipelotriksov cultura furnizată din surse diferite, și pot fi utilizate în practică pentru determinarea legăturilor epidemiologice dintre cazuri individuale boala erizipel diferite animale și oameni.

Definirea phagotypes bacteriile care cauzeaza boala, este posibil nu numai pentru a identifica adevărata sursă a agentului infecțios, dar, de asemenea, să urmeze o cale dificila de la sursa agentului patogen la o gazdă susceptibilă. Conform expresiei figurative a lui A.S. Kriviskogo (1962) „este adesea un fag ca un ranger reală ajută epidemiologilor și boli infecțioase medic pentru a identifica agentul cauzal, pentru a urmări răspândirea și elimina sursa de origine, împiedicând astfel răspândirea epidemiei, respectiv, și epizootia.“

Trebuie remarcat faptul că metodele de fagodiagnosticare, inclusiv identificarea și tastarea fagului, s-au bazat pe înregistrarea lizelor culturilor izolate cauzate de un fag cu o gamă de acțiune cunoscută. Astfel, fagul în aceste cazuri este un indicator care stabilește specia sau tipul aparținând unui microb izolat din materialul testat prin metode convenționale. Cu alte cuvinte, având în vedere principiul utilizării fagului, frecvența de obținere a răspunsurilor pozitive nu crește, iar fagul în acest caz îndeplinește funcția unui test auxiliar care stabilește natura agentului patogen izolat. În același timp, fagul poate fi utilizat pentru a detecta agentul patogen fără izolarea culturilor pure.