Viabilitatea celulelor este determinată prin metoda colorării supra-colorate cu soluție 0,1% de albastru de tip trypan.
Pe diapozitiv, picurăți o picătură de celule și o picătură de soluție de albastru trypan 0,1%. După 30-60 de secunde, o picătură de suspensie colorată este acoperită cu o alunecare a capacului. Suspensia în exces este îndepărtată prin scufundare cu hârtie de filtru, iar numărul de celule vii (necolorate) și moarte (albastru) la 100 de cariocite este numărat sub microscop. Odată deduce procentul de decese celulare.
Se prepară în prealabil o soluție de albastru de tripan. Pulberea este dizolvată în apă bidistilată din calculul soluției de 0,2%, care este filtrată. Aceasta este o băutură mama.
1. Dați definiția animalelor înrudite.
2. Descrieți principiul obținerii liniilor congenitale ale șoarecilor.
3. Ce materiale biologice sunt folosite pentru a studia sistemul imunitar?
4. Listați principalele etape de obținere a celulelor măduvei osoase la șoareci.
5. Listați principalele etape ale izolării celulelor de la organele periferice ale șoarecilor.
6. Cum să numărăm numărul de celule în 1 ml de suspensie celulară și să determinăm viabilitatea celulelor?
Capitolul 2 Metode de separare a celulelor sanguine periferice umane
Pentru a studia activitatea funcțională a limfocitelor și a altor celule sanguine, sunt necesare metode eficiente de separare a acestora (Figura 2.1). Metodele de separare ideale sunt caracterizate printr-un grad nesemnificativ de pierdere de celule cu un grad ridicat de purificare, păstrând activitatea fiziologică a celulelor izolate. La originea metodelor de izolare a celulelor sunt două principii principale.
1. Separarea celulelor în funcție de proprietățile lor fizice, de exemplu în mărime, densitate sau încărcare.
2. Diviziunea celulară prin antigene de suprafață.
Fig. 2.1. Metode de bază ale diviziunii celulare
Dintre diferitele metode de separare celule sanguine gravitatea cel mai utilizat, bazat pe diferite greutatea specifică a celulelor sanguine, care diferă în următoarele obrazom˸ eritrocite> neutrofile și eozinofile> limfocite și monocite> trombocite.