Aceasta este una dintre cele mai importante etape ale studiului lichidului cefalorahidian, pe baza căreia datele sunt adesea confirmate sau respinse.
Numărarea numărului de elemente formate se efectuează în interval de 30 de minute după extracția lichidului cefalorahidian cu diferențierea celulară ulterioară. Pentru a număra leucocitele, medicamentul este colorat cu unul dintre reactivi:
Ø 5 ml soluție de acid acetic glacial 10% + 0,1 metil violet + apă până la 50 ml - timp de colorare 2 minute;
Samson Ø reactiv: 2,5 ml de soluție alcoolică fucsin 1:10 + 30 ml de acid acetic + 2 g + de acid carbolic, apă distilată până la 100 ml, în timp ce colorarea timp de 10-15 minute.
medicament pictat plasate în Fuchs-Rosenthal Volumul camerei de 3,2 ml. Celulele albe din sânge sunt numărate pe o mică creștere în toate cele 256 de pătrate, cu un Pleiocitoza ridicat 200-1000h10 6 / l cred jumătate din grila, iar rezultatul este înmulțit cu 2, Pleiocitoza peste 1000h10 6 / l numărat un număr de pătrate mari, iar rezultatul se înmulțește cu 4. Valorile normale enumerate a numărului de celule în Tabelul 1, pentru diferite tipuri de patologie - în Tabelul 2.
Citoză în lichidul cefalorahidian lombar
Numărul de eritrocite din lichidul cefalorahidian este contorizat în camera de numărare Goryaev. Pentru aceasta, CSF cu un amestec de sânge este diluat de 10 ori - 9 părți soluție izotonică de clorură de sodiu și 1 parte de CSF este amestecat într-un tub de testare. Lichidul rezultat este amestecat bine, camera de numărare Goryaev este umplută și, în conformitate cu regulile pentru numărarea numărului de celule roșii din sânge, este determinat numărul de eritrocite în cinci pătrate mari. Numărul de eritrocite în 1 pl de CSF este determinat de formula:
unde A - numărul de eritrocite în 5 mari (80 mici) pătrate, 1/400 - volumul unui pătrat mic, 10 - diluarea lichidului, 80 - numărul de pătrate mici.
La calcularea unei celule pătată Fuchs-Rosenthal camera fucsina iar elementele formate sunt revizuite nucleu si structura citoplasmei care permite diferențierea acestora. Acestea sunt evaluate cu o creștere de 7x40. Înregistrarea rezultatelor de numărare poate avea o expresie procentuală sau numerică (lichorgramă). Având în vedere că celulele și elementele celulare pot suferi modificări degenerative, cu durată îndelungată în CSF, este necesar să se evalueze și să se numere elementele formate și celulare în preparatele colorate.
Celulele CSF au o afinitate complet diferită față de substanțele colorante decât celulele din sânge, deci alegerea coloranților ar trebui să fie diferită. Rezultate bune sunt obținute prin următoarele tipuri de colorare a preparatelor:
1. Colorarea de către Rosina. CSF este centrifugat timp de 7-10 minute. Supernatantul a fost decantat, peletele este plasat pe sticla smântânit, oscilare ușor distribuie pe suprafața de sticlă în 1-2 minute, iar lichidul decantat. Sticla plasat într-o poziție verticală și se usucă într-un cuptor la o temperatură de 40-50 ° C, apoi fixate cu metanol timp de 1-2 minute și culoare Romanovsky: 6-12 min preparatele pătată, în funcție de grosimea frotiu. Preparatul este spălat cu apă distilată și uscat. În cazul în care nucleele au o culoare albastru pal, dokrashivayut încă 2-3 tușe de pensulă minute.
2. Pictura pe Wozni. Precipitatul obținut prin centrifugare, s-a turnat paharul ușor scuturare uniform distribuite pe suprafață. Uscate la temperatura camerei timp de o zi, fix 5 min cu metanol. Apoi, colorate cu soluție eozină azuriu (la fel ca și pentru colorarea sângelui, dar diluat de 5 ori) timp de 1 oră. Dacă celulele blednookrasheny dokrashivaet vopsea nediluat sub control microscop de la 2 până la 10 minute. Cu cât elementele din lichidul format, mai ales în prezența sângelui, colorarea mai lungă.
3. Colorarea conform lui Alekseev. Pe un medicament uscat, dar nu fix, se aplică 6-10 picături de colorant Romanovsky-Giemsa, aceeași pipetă este distribuită cu grijă pe întregul preparat și lăsată timp de 30 de secunde. Apoi adăugați, fără a scurge vopseaua, 12-20 picături de apă distilată, preîncălzite la o temperatură de 50-60 ° C, în proporție 1. 2. Agitarea preparatului, cerneala se amestecă cu apă și se lasă timp de 3 minute. Clătiți vopseaua cu un curent de apă distilată, uscați preparatul cu hârtie de filtru și microscopie. Metoda este adecvată pentru examinarea citologică urgentă.
Valorile normale ale conținutului elementelor celulare din CSC sunt prezentate în Tabelul 3.
Tehnologia cito-centrifugării (cytospin). Prepararea preparatelor lichide colorate din sediment după centrifugare nu face întotdeauna posibil obținerea unui strat subțire de celule adecvate pentru diagnosticare. Pentru a rezolva această problemă, sa dezvoltat tehnologia de cytocentrifugare, care constă în producerea de produse de înaltă calitate a preparatelor de înaltă calitate. Pentru lichidul rezultat este pregătit pentru studiu și plasat în tsitokameru, după care este dozat pe o crescute pe verticală în glisiera rotorului cytospin. Sub acțiunea forței centrifuge, celulele sunt distribuite uniform pe geam, în timp ce fluidul mai ușor este îndepărtat de pe suprafața medicamentului. Uscarea, fixarea și colorarea preparatului se efectuează, de asemenea, în citocentrifugă. Aparatul vă permite să creați până la 8 zone de diagnosticare pe un singur diapozitiv.
kletki atipici adesea sunt celule ale tumorilor SNC sau shell-ul ei. Același lucru se poate produce cu un proces inflamator cronic (meningita tuberculoasă, meningoencefalită, scleroza multiplă, encefalomielita) - este ependimei celule zheludochkovpautinnoy coajă, precum și limfocite, monocite și celule plasmatice cu nuclee si modificari citoplasmatice.
Modificate celule și umbre de celule se găsesc în timpul expunerii prelungite la CSF. Cel mai adesea, autoliza este supusă granulocitelor neutrofile, celulelor din carcasa arahnoidică, ventriculului ependim. Celulele modificate și umbrele celulare nu au valoare diagnostică.
Cristalele din lichior sunt rareori găsite. La 4-5 zile după hemoragie subarahnoidiană, leziuni traumatice cerebrale detectate cristale hemosiderină în cazul cariei în conținutul chist tumoral pot fi detectate cristale gematoidina, colesterol, bilirubina, cristale de colesterol au fost de asemenea formate în centrele de degenerare grase, necroza țesutului cerebral și chisturi cerebrale . Pentru a identifica cristalele în LCR folosind reacția prezentată în tabelul 4.
Reacțiile utilizate pentru a detecta cristalele din lichior
În acidul azotic, este dată culoarea albastră care dispare
Descoperit printr-o reacție la azurul din Berlin, celulele sunt vopsite în albastru și albastru
Se dizolvă în alcool, eter, topit în acid sulfuric concentrat, cu formarea de compuși de conducere redundanți
Solubil în cloroform și alcaline
Elemente ehinokokka- cârlige scolexes fragmente de coajă chitinoase și Echinococcus cu bule poate fi detectat la meninge echinococoza plural. Ele sunt extrem de rare.