În centrul tuturor reacțiilor metabolice din celula bacteriană este activitatea enzimelor care aparțin clasei-6 în sine: oxidoreductaze, transferaze, hidrolaze, ligare, liaze, isomerase. Enzimele, celula bacteriană imagine-emye poate setările locale-apel a celulelor din interiorul - endofermenty și eliberate în mediul înconjurător - exoenzymes. Exoenzymes joacă un rol important în asigurarea faptului că celula bacteriană disponibilă pentru penetrarea este sursă de carbon și energie. Majoritatea hidrolază este exoenzymes care, în picioare în peptidele scindabil-mediu sunt molecule mai mari, polisaha-Reed, lipide la monomeri și dimerii, care ar putea pătrunde în celulă. Un număr de exoenzime, de exemplu hialuronidază, colagenază și altele, sunt enzime de agresiune. Unele enzime sunt localizate în spațiul periplasmic al celulei bacteriene. Participă la procesele de transfer al substanțelor într-o celulă bacteriană. Spectru Enzymatic este un caracter taxonomic, tipic al familiei, genului și - în unele LES-ceaiuri - pentru specie. Prin urmare, determinarea spectrului de activitate enzimatică este utilizată la stabilirea poziției taxonomice a bacteriilor. Prezența ekzofermen-ing pot fi determinate prin medii de diagnostic diferențial, astfel încât identificarea bacterii au dezvoltat sistem de testare special constând dintr-un set de medii de diagnostic diferențial.
Identificarea bacteriilor prin activitate enzimatică.
Cel mai adesea, enzime clasa hydrolase și oxidoreductase, folosind metode speciale și medii.
Pentru a determina activitatea proteolitică, microorganismele se inoculează în coloana de gelatină cu un prick. După 3-5 zile, culturile sunt examinate și se notează caracterul de lichefiere a gelatinei. Când proteina este descompusă de unele bacterii, pot fi eliberate produse specifice - indol, hidrogen sulfurat, amoniac. Pentru definirea lor împăcării sunt indicatoare hârtie specială, co-torye plasată între gât și dopul într-un tampon de bumbac sau un BCH (i) apă peptonată, microorganismele studiate semănate. Indolul (produs de descompunere a triptofanului) pătează o bandă roz de hârtie saturată cu o soluție saturată de acid oxalic. Hârtia, impregnată cu o soluție de acetat de plumb, devine negru în prezența hidrogenului sulfurat. Pentru a determina folosirea amoniacului, folosiți o hârtie roșie.
Pentru multe microorganisme taxonomice la-semn este abilitatea de a descompune un anumit carbohidrați pentru a forma acizi și gazoase produk-ing. Pentru a identifica această utilizare Gissa, care conține carbohidrați diferiți (glucoză, zaharoză, maltoză, lactoză, etc.). Pentru detectarea acizilor în mediu adăugat reactivul Andred care își schimbă culoarea de la galben pal la roșu la pH 7,2-6,5, astfel încât setul de medii cu creșterea microorganismelor sâsâitură numite „lângă pestriță“.
Pentru a detecta formarea de gaze în mediu lichid, flotoarele sunt coborâte sau se utilizează medii semilichide cu 0,5% agar.
Pentru a determina formarea acidă intensă. caracteristică de tip mixt fermentat în mediu cu glucoză 1% și 0,5% peptonă (mediu Clark) a fost adăugat metil indicator roșu, care este galben la pH 4,5 și mai sus și roșu -cu valori mai mici ale pH-ului.
Hidroliza ureei este determinată prin izolarea amoniacului (hârtia de turnătorie) și alcalinizarea mediului.
Pentru identificarea multor microorganisme ispol'uet formează o reacție Voges - Proskauer la acetoină - conexiune diate Promo cu formarea de butandiol acid piruvic. O reacție pozitivă demonstrează prezența fermentației cu butandiol.
Este posibilă detectarea catalazei prin bule de oxigen, care încep să se elibereze imediat după amestecarea celulelor microbiene cu soluție 1% de peroxid de hidrogen.
Pentru a determina citocrom oxidaza, se folosesc re-active: 1) soluție 1% alcool de c-naftol-1; 2) soluție apoasă 1% de diclorhidrat de N-dimetil-p-fenilendiamină. Prezența citocrom oxidazei este evaluată prin colorarea albastră care apare după 2-5 minute.
Pentru determinarea nitriților se utilizează reactivitatea Griess: apariția culorii roșii indică prezența nitriților.
I. Prin natura chimică:
· Oxidoreductazele - catalizează reacțiile de reducere a oxidării
• Transferase - accelerează scindarea hidrolitică a proteinelor și a carbohidraților (pentru unii, substratul este țesuturile corpului uman)
· Hialuronidaza - scindeaza acidul hialuronic din tesutul conjunctiv.
Neuraminidaza - scade acidul neuraminic al membranelor mucoase.
Colagenază - scindează colagenul țesutului muscular.
· Lecitinaza - scindează lecitina membranelor eritrocite și a fibrelor musculare.
· Proteinaza - scindează imunoglobulinele.
• Liases - participă la reacțiile de scindare ne-hidrolitică, cu formarea de legături duble sau atașare prin legături duble.
Izomeraze - izomerizarea compușilor.
· Ligaza (sintetaza) - reactia biosintezei proteinelor.
Funcție în interiorul celulei. Alocați mediului.
1,2,4,5 în lizozomi
II. Despre controlul genetic:
· Sinteze constitutive de-a lungul vieții m / o (clasa 1, 2, 6, 6)
· Adaptivă (inductibilă). Sinteza este indusă de un substrat (clasa 3.4)
· Reprezentant. Sinteza este inhibată de acumularea excesivă de produse de reacție.
Activitatea enzimatică determină activitatea biochimică (zaharolitic, protolitic, hemalitic, catalază)