Frotiuri uscate • Pregătirea frotiului • Uscarea frotiului la temperatura camerei (1 oră) • Fixarea în acetonă (10 min.)
Straturi umede • Pregătirea frotiului • Fixarea în etanol (10-15 min.) Uscarea la aer
• Metoda de prelucrare a țesuturilor pentru fixarea structurii intravitale
• Realizat prin expunerea materialului la soluții speciale (fixative)
• Cantitatea de fixativ trebuie să fie de 20-30 de ori mai mare decât volumul unei bucăți de material care trebuie fixat
• Fixativ simplu: soluție de formalină 10-20%, alcool 96%, alcool 100 (absolut), soluție 1-2% de acid osmiic etc.
• zăvoare complexe: alcool - formol (alcool 70º - 100 ml de formol și 2-5 ml.) Fluid (sublimat coroziv Zenker - 5 g sulfat de sodiu - 1 g potasiu dvuhromovokioly - 2,5 g apă distilată - 100 ml.. acid acetic glacial 5 ml), etc.
• Durata fixării - de la mai multe ore până la o zi sau mai mult, în funcție de proprietățile fixatorului și de natura materialului examinat.
Reguli generale pentru fixarea materialului
• Materialul este fixat direct și imediat după luare.
• Pentru a fixa materialul, folosiți sticlă sau faianță (evitați metalul).
• Volumul lichidului de fixare trebuie să fie de 20-30 ori mai mare decât volumul materialului care trebuie fixat.
• Fluidul de fixare se schimbă până devine transparent (este necesar să scapi de impuritățile de sânge).
• Materialul este fabricat dintr-o etichetă de hârtie groasă, cu un creion de grafit sau cu cerneală.
• Blocarea se face fără acces la lumină.
• Creșterea temperaturii accelerează fixarea. Temperatura optimă de fixare este de 37 ° C.
• Metoda cea mai comună de fixare standard este formalinul. Formalinul este o soluție apoasă 40% de gaz formaldehidic (HCOOH).
Fixarea în formalină
1. Difuzia formalinică în probă (aproximativ 1 mm / h)
2. Fixarea chimică Componenta chimică a fixării în formalină
Metoda de fixare de urgență:
• o bucată de material cu o grosime mai mică de 0,5 cm este plasată într-un tub cu formalină de apă 20%
• se încălzește timp de 3-5 minute, înainte de apariția bulelor (nu se fierbe)
Formația de formalin nu atinge obiectivul studiului:
• structuri citologice subțiri • substanțe solubile în apă (glicogen, acid uric) • Avantajele fixării formalinei • Simplitatea și ieftinitatea. • Siguranța bună a structurilor.
• Lipsa de fixare în formalină • Incapacitatea de a detecta substanțele solubile în apă (glicogen, acid uric). • Depistarea slabă a structurilor citologice (chondriomii, aparatele Golgi etc.).
• Pentru a detecta substanțele solubile în apă, se utilizează fixative anhidre (alcool absolut, alcool 96%).
Reguli de luare a probelor din organele și țesuturile fixe. De la un obiect fix (țesut, organ sau fragment de organ) tăiați cu atenție un fragment din locul dorit cu o grosime de aproximativ 3 mm, o suprafață de aproximativ 0,5-2,5 cm2
Spleen-Tăiați un fragment de aproximativ 3 mm grosime de la partea centrală în planul frontal
Intestin - Din fiecare parte a intestinului, tăiați fragmente de aproximativ 3 mm grosime în planul frontal
-din un rinichi fragment de rinichi tăiat de aproximativ 3 mm grosime prin întregul corp al părții de mijloc în planul sagital din fragmentul de rinichi al doilea tăiat de la 2 mm grosime porțiune de mijloc care cuprinde poarta de rinichi în plan frontal.
Ficat - Se taie fragmente de 3 mm grosime din partea centrală a lobilor laterali stângi, laterali stângi, în planul frontal
Inima - Se taie un fragment de 2-3 mm grosime din partea centrală a organului, incluzând arcul aortic din planul frontal.
Plămânii - Se taie fragmente de aproximativ 3 mm grosime din mijlocul lobilor cranieni și caudali drept și din partea centrală a lobului stâng.
• Deshidratarea țesăturii se face treptat (astfel încât să nu existe o încrețire), transportând-o prin spiritele cu rezistență crescătoare: 50º, 60º, 70º, 80º, 90º, 96º, 100º. În fiecare alcool, piesele sunt de la câteva ore până la o zi, în funcție de dimensiunea piesei.
• Fixarea în formalină tamponată (aproximativ 24 ore)
• Spălarea cu apă de la robinet (3 ore).
•% etanol 50 (1 h). • 70% etanol (2 h.) • 80% etanol (1 h). • 96% etanol (două schimburi de 30 min.) • etanol 96% (lăsați peste noapte)
• Alcool absolut (2 schimburi de 30 de minute) • Etanol absolut: xilen (1: 1, 20 min.)
• Xilen (trei treceri de 20 de minute) - 3 schimburi la t = 56 # 8304; C • Amestec de xilen: parafină 1: 1 (20-25 minute la o temperatură de 56 # 8304; C)
• Parafina 1 la o temperatură de 56 ° C # 8304; C (1h) • Parafina 2 la o temperatură de 56 ° C # 8304; Cu (1 oră) • Ceară 3 pentru a se răci
Stații de turnare • Stații de alimentare modulare • Stații de cabluri și de umplere