Detectarea directă a microbilor patogeni în sol este efectuată numai atunci când se investighează focare de boli infecțioase. Microorganismele sanitar-indicative sunt folosite ca indicatori indirecți ai posibilei contaminări a solului cu bacterii patogene: bacteria E. coli, Cl. perfringens. bacterii din genul Proteus. bacterii termofile.
Prezența în sol a bacteriilor din grupul Escherichia coli indică contaminarea fecală a acestuia. În zonele poluate ale solului, numărul coliților este de 1,10-4, în timp ce în soluri pure, colita poate fi egală cu 1 și mai mare. Detectarea cl. perfringens în sol, de asemenea, indică contaminarea sa fecală.
Metode de determinare a compoziției și activității microorganismelor din sol.
Pentru a măsura activitatea biotei solului, se utilizează indicatorul activității biologice a solului. Biota solului este o colecție de organisme vii care locuiesc în sol. Acestea includ: bacterii, ciuperci, actinomicete, alge, animale microscopice și licheni și vegetație verde, care are în zona sa de rădăcină de sol. De obicei, cu cât solul este mai fertil, cu atât mai conține organisme vii, cu atât sunt mai diverse pe compoziția speciilor.
Activitatea biologică a solului este determinată de următoarele metode:
- numărând numărul total de microorganisme din sol.
- determinarea numărului de grupe fiziologice individuale de microorganisme, de exemplu bacterii de nitrificare sau de descompunere a celulozei. Apariția bacteriilor nitrificatoare (bacterii nitrificatoare) indică dezvoltarea procesului de auto-curățare, deoarece ei complet compuși cu azot ciclu de expansiune, conversia amoniacului în azot. Cu contaminare proaspătă de fecale, nitrifiers nu va exista, deoarece nu există nici un substrat pentru dezvoltarea lor. În timpul vieții microorganismelor, descompunând substanțele organice, se formează amoniac, ceea ce duce la dezvoltarea nitrificatoarelor.
- determinarea dioxidului de carbon din sol - o metodă biochimică de determinare a activității biologice a solului.
Cu cât este mai intensă eliberarea dioxidului de carbon din sol, cu atât au loc mai multe procese biologic active, cu atât sunt mai bune condițiile pentru cultivarea culturilor agricole și cu atât mai mare este randamentul lor potențial.
Eliberarea dioxidului de carbon din sol în stratul de suprafață al atmosferei se numește respirația solului. Intensitatea respirației solului depinde de proprietățile sale, de condițiile hidrotermale, de natura vegetației, de măsurile agrotehnice. Eliberarea dioxidului de carbon pe sol este sporită prin cultivarea sa în legătură cu activarea proceselor biologice și îmbunătățirea condițiilor de aerare. Reducerea eliberării dioxidului de carbon pe sol (o scădere a activității biologice) poate agrava fluxul de oxigen în sol, care la rândul său va contribui la formarea de substanțe toxice.
Eșantionarea este efectuată dintr-o secțiune pătrată (nu mai mică de 5x5 m) de la 5 puncte - de la fiecare colț și de la centrul pătratului ("metoda plicului"). Probele sunt prelevate în condiții aseptice de la o adâncime de 20-30 cm. Volumul probei este de 1 kg.
Periodicitatea controlului. Frecvența controlului depinde de obiectele monitorizate, dar cel puțin o dată pe an. In studiul dinamicii autoepurare a solului în zonele contaminate ale probei luate pentru prima lună după contaminare săptămânal, în următoarele luni - 1 dată pe lună în timpul perioadei de creștere până la finalizarea fazei active a auto-purificare.
Evaluarea sanitară a apei prin indicatori microbiologici
Printre obiectele supuse controlului microbiologic, cel mai important loc este acordat studiului apei.
În conformitate cu documentele de reglementare actuale, următoarele sunt supuse controlului:
apa potabila (alimentarea cu apa centrala si locala);
piscine cu apă;
apă din rezervoare deschise;
apă pentru prepararea soluțiilor de injectare și picături pentru ochi.
Supravegherea preventivă se efectuează la:
abordarea problemelor legate de alimentarea cu apă și salubritate în zonele populate;
evaluarea sanitară a piscinelor, a plajelor, a locurilor pentru recreere colectivă.
Controlul sanitar actual se efectuează la:
evaluarea calității aprovizionării cu apă potabilă în zonele populate;
evaluarea stării sanitare a apelor de suprafață pentru a determina gradul de influență al poluării biologice asupra capacității apei de auto-purificare;
controlul dezinfecției de canalizare;
detectarea microorganismelor sanitar-indicative și patogene în conformitate cu indicațiile epidemiologice pentru a descoperi modul posibil de transmitere a bolilor infecțioase.
Prelevarea de probe. Sticlele sterile cu o capacitate de 500 ml sunt folosite pentru prelevarea probelor de apă potabilă. Îngrijirea preliminară arderea robinetelor de apă cu o flacără și lăsați apa să curgă timp de 10-15 minute cu macaraua complet deschisă.
Probele de apă din bazine în timpul funcționării lor sunt selectate în cel puțin două puncte, de la 25-30 cm de suprafață, în cantitate de un litru.
Metode de cercetare. Numărul total microbian (numărul total de bacterii în 1 cm3 de apă) ne permite să estimăm nivelul contaminării microbiene a apei. Apa de testare se adaugă câte 1 ml fiecare în recipiente sterile Petri cu mediu nutritiv și se măsoară numărul de colonii crescute. Acest indicator este calculat prin însumarea numărului mediu aritmetic de bacterii, ciuperci de drojdie și mucegai și exprimat în CFU / ml.
Determinarea bacteriilor coliforme. Bacteriile coliforme sunt beți care nu formează spori gram-negativi care nu au activitate de oxidază și lactoză fermentată pentru a forma acid și gaz la 37 ° C timp de 24-48 ore. Bacteriile coliforme termorezistente fermentează lactoza pentru a forma gaz la 44,5 ° C timp de 24 de ore. Bacteriile coliforme termorezistente mor rapid in mediul extern, astfel incat detectia lor arata contaminarea proaspata a fecalelor din apa.
Pentru a determina bacteriile coliforme în apa de băut, se folosește metoda filtrului membranar. Apa de testare (3 probe de 100 ml) este trecută prin filtre bacteriene din nitroceluloză, care sunt apoi plasate pe mediu Endo și incubate la 37 ° C timp de 24 de ore. Numărăm numărul de colonii care au crescut în lactoză.
Determinarea colipajelor (bacteriofagi de E. coli). Prezența fagilor de bacterii din grupul de E. coli este un indicator indirect al posibilei prezențe a enterovirusurilor în proba de apă studiată. Coli-fagii determină liza de E. coli, care poate fi observată prin formarea de zone de liză (plăci) pe cultura unei culturi bacteriene. Proba de apă de testare (100 ml) este încălzită la 35-44 ° C și turnată în 20 ml în vase sterile Petri. Apoi, în fiecare ceașcă, se toarnă 20 ml de cultură de agar nutritiv însămânțată cu E. coli și se amestecă ușor. După 18 ore de incubare, toate plăcile formate pe plăci Petri sunt numărate și însumate. Astfel, cantitatea de unități de formare a plăcilor (PFU) este obținută în 100 ml de apă.
Evaluarea sanitară a aerului prin indicatori microbiologici
Indicatoarele sanitare-microbiologice ale aerului sunt normalizate în funcție de tipul și scopul camerei.
Studiul aerului pentru prezența microorganismelor se efectuează prin metode de sedimentare sau filtrare.
Metoda de sedimentare Koch bazată pe sedimentarea bacteriană spontană a particulelor și picături de gravitație pe suprafața mediului nutritiv vasele deschise petri. Când acest lucru este citit, că, în conformitate cu formula V.L.Omelyanskogo la suprafața mediu nutritiv dens într-un vas Petri de 100 cm2, timp de 10 minute, se stabilește un număr de bacterii, care este conținută în 10 litri de aer.
Cu ajutorul metodelor de filtrare, prelevarea de probe de aer se efectuează cu ajutorul diferitelor instrumente și aparate. În special, atunci când se utilizează aparatul Krotov, se efectuează prelevarea de probe de aer (100 l) în două vase Petri cu agar de peptonă din carne. Culturile sunt cultivate timp de 48 de ore la 37 ° C. După incubare, se calculează numărul de colonii pe mediul nutritiv și se calculează cantitatea de bacterii din aerul studiat.
Principalii indicatori ai sănătății aerului:
UHF - numărul de unități care formează colonii în 1 m 3 de aer;
prezența Staphylococcus aureus, streptococi a- și beta-hemolitic;
prezența fungiilor de drojdie și mucegai;
prezența microorganismelor patogene.
În special, spitale CLEANROOM de aer (camere de operare, camere de maternitate, cutii pentru pacientii care arde si copiii prematuri, etc.), numărul total de microorganisme la 1 m 3 de aer nu trebuie să depășească 200 CFU. Stafilococul aureus, streptococile α- și β-hemolitic, fungi de drojdie și mucegai trebuie să lipsească.
Dezinfectarea aerului interior se realizează în moduri diferite: ionizatoare de aer UV, ventilație.
Controlați întrebările pe tema lecției:
1. Distribuția microbilor în natură.
2. Microflora solului.
3. Microflora apei.
4. Microflora aerului.
5. Conceptul de microorganisme sanitar-indicative.
6. Metode de determinare a microorganismelor sanitar-indicative.
Literatură pentru pregătirea pentru lecție: