Situația epidemică din lume nu a fost niciodată calmă. În tot acest timp s-au observat izbucniri de boli infecțioase și au apărut noi tipuri de boli contagioase, iar în ultimii 10 ani infecțiile "vechi" au revenit. Variabilitatea genetică a tulpinilor care circulă, infecțiile nosocomiale, bacteriocarrierismul, dificultățile în furnizarea și utilizarea medicamentelor imunobiologice necesită întărirea muncii în domeniul imunoprofilaxiei și imunoterapiei. O atenție insuficientă la aceste probleme duce în mod inevitabil la o creștere a morbidității infecțioase. Prevenirea și tratamentul bazat pe principiile imunologice au devenit un mijloc decisiv de reducere a mortalității infantile, de creștere a duratei și de îmbunătățire a calității vieții tuturor grupurilor de vârstă ale populației.
Este bine cunoscut faptul că prevenirea este cel mai eficient și mai economic mod de a menține sănătatea oamenilor.
Oamenii au învățat să lupte împotriva infecțiilor, dar sistemul lor imunitar a devenit mai puțin receptiv la agenții patogeni și nu se confruntă întotdeauna cu bolile infecțioase [2].
Medicamentele de diagnostic se referă la preparate imunobiologice, deoarece acțiunea lor se bazează pe principii și reacții imunologice. Preparate de diagnosticare, sisteme și kituri sunt utilizate pe scară largă pentru diagnosticul bolilor infecțioase și neinfecțioase, indicarea și identificarea bacteriilor, virusurilor, fungi și protozoare, pentru a determina starea sistemului imunitar, tulburări alergice și imunopatologice, țesuturi de compatibilitate imunologice, mama imună și relațiile fetus, etc.
Instrumentele de diagnosticare utilizate pentru detectarea antigenilor specifici și anticorpi, alergeni, celulele imune sensibilizate, rezistență naturală Factori immunoregulators. În conformitate cu scopul produselor de diagnostic care conțin anumite immunoreagents specifice (antigene, anticorpi, alergeni, imunomodulatori, factori de imunitate naturală, etc.) care sunt folosite pentru a identifica obiectul de studiu în anumite reacții sau sisteme de testare. Efectul reacției în conformitate cu natura immunoreagents mecanismului de reacție și se înregistrează prin mijloace fizice (de exemplu, turbiditate), chimică (de exemplu, schimbarea culorii) sau clinice (simptome și manifestări) indici [1].
Pe baza acestor reacții imunologici creat sute de sisteme moderne de diagnostic prin care diagnostica (HIV, gripa, febra tifoidă, ciuma, holera, chlamydia, hepatita virală, etc.) infecțioasă și neinfecțioasă (cancer, alergic, imunopatologice și colab.) boală. Metodele imunologice de diagnosticare sunt specifice, extrem de sensibile și fiabile și, prin urmare, se găsesc la scară largă în medicină și ecologie [6].
Scopul lucrării mele este de a studia diagnosticul antigenic.
Pentru a atinge acest obiectiv, este necesar să se rezolve următoarele sarcini: să se revizuiască literatura relevantă, să se cunoască conceptele de diagnosticare antigenică, să se determine gradul de semnificație în medicina modernă.
Capitolul 1 INFORMAȚII GENERALE DESPRE DIAGNOSTICĂ
Diagnosticul este suspensie de microbi uciși, cel mai adesea în ser fiziologic, utilizat ca antigeni pentru reacții serologice. Avantajul diagnosticului înainte de cultura vie este stabilitatea proprietăților sale aglutinabile, standardul, siguranța și ușurința de manipulare. Utilizarea diagnosticului face posibilă aplicarea pe scară largă a metodelor serologice în practica muncii în masă. De o importanță deosebită sunt diagnosticums atunci când se lucrează cu bacterii vii sau virusuri periculoase datorate infectiozitate lor ridicate (de exemplu, Brucella, bacterii tularemia, virusuri, căpușe și encefalitei japoneze și colab.). Diagnosticul utilizat pentru recunoașterea bolilor infecțioase este împărțit în bacterii, rickettsiali și virale. Cu ajutorul lor în serul de pacienți este posibil să se determine prezența anticorpilor în raport cu un anumit tip de patogen microbian [1].
Diferențe mai subtile de anticorpi din serul studiat sunt stabilite cu ajutorul monodiagnosticumurilor specifice. Astfel, atunci când tifoide pentru a determina grupul de anticorpi specii O-H și anticorpii sunt aplicate O- și H-0-901 diagnosticums de cultură bacteriană tifoidă sau paratifoidă bacteriană № 2 având O-antigen comun la bacterii tifoida corespunzătoare; H-diagnosticul este o suspensie de bacterii cu mobilitate pronunțată [3].
Medicamentele de diagnosticare sunt utilizate în următoarele scopuri:
- pentru determinarea, prin intermediul serului imun specific, a speciei sau tipului de microb izolat de la pacient, transportator sau de la obiecte din mediul extern;
- pentru a detecta anticorpi în serul pacienților sau convalescenților cu ajutorul diagnosticului;
- pentru detectarea prin intermediul alergenilor a restructurării organismului care are loc în unele boli infecțioase.
Toate preparatele de diagnosticare sunt antigene sau anticorpi [4].
Capitolul 2 DIAGNOSTICI PENTRU RECUNOAȘTEREA BOLILOR INFECȚIOASE
2.1 Diagnosticarea bacteriilor
Pentru a prepara diagnosticul bacterian, se ia o cultură de agar a unui anumit tip de microb în forma S. Culturile trebuie să fie aglutinate cu seruri de referință corespunzătoare, în diluție la un titru determinat prin reacția de aglutinare a trei cruci și să fie tipice pentru proprietățile morfologice și biochimice. Aglutinarea cu seruri heterologe în diluția de peste 1/8 din titru nu trebuie să aibă loc [1].
Producția de diagnostice, ca toate preparatele biologice, necesită condiții sterile. Culturi de agar de 18-20 de ore dovedite sau bulion de 4 ore sunt însămânțate pe saltele cu agar preparat pe bază de carne, drojdie sau hidrolizat de cazeină. După 18-20 de ore de incubare într-un termostat la 37 ° C din culturi, faceți frotiuri (din fiecare saltea separat) pentru a verifica curățenia. Apoi, cultura este spălată cu soluție fiziologică și suspensia rezultată de tulpini diferite de un tip de microbi este turnată într-o singură sticlă gradată. Atunci când se utilizează producția în masă, se folosește metoda de creștere a bacteriilor. Diagnosticările sunt pregătite din numeroase tulpini ale microbilor corespunzători [5].
Densitatea preamestecului este determinată de standardul optic. Este posibil să se obțină o prelungire care conține 10 ml de corpuri microbiene în 1 ml. Apoi lichidul mamă este inactivat. Inactivarea poate fi realizată în diverse moduri: prin încălzire, acțiunea formol, alcool, etc. Astfel, pentru determinarea activității fagocitare a leucocitelor diagnosticums preparate din bacterii ucise prin încălzire, astfel ca fenol sau formalină cauza chemotaxia negativ de leucocite ..
În fabricarea diagnosticului formalinizat, se adaugă cantități diferite de formalină la suspensia de 10 miliarde, în funcție de tipul de diagnostic. După adăugarea formalinei, sticla este închisă cu un dop de cauciuc, agitată cu grijă și introdusă într-un termostat la 37 ° C timp de 18-20 ore sau lăsată timp de 2 zile la temperatura camerei. La sfârșitul acestei perioade, cultura este semănată pentru a determina sterilitatea și apoi se verifică aglutinabilitatea preamestecului cu seruri omoloage. Lichidul mamă este diluat cu o soluție fiziologică formalizată de 0,1% la o densitate de 3 miliarde, în conformitate cu standardul optic. După diluarea diagnosticului, sterilitatea este verificată din nou [6].
Pentru producerea de diagnostic alcoolic, cultura zilnică de O-tulpină este spălată din saltele printr-o soluție fiziologică conținând 0,5% acid carbolic. Preamestecul este diluat până la o densitate de 4 miliarde în 1 ml. Pentru diluare, se utilizează un amestec de soluție salină carbolizată cu 96% alcool etilic, luată într-un raport de 1: 2. Alcoolul este pre-filtrat printr-un filtru bacterian. Conținutul sticlelor este bine amestecat. Diagnosticul este plasat timp de 48 de ore într-un termostat la 37 ° C și apoi lăsat timp de trei zile la temperatura camerei. Diagnosticul de alcool este, de asemenea, monitorizat pentru sterilitate [4].
Diagnosticul final este verificat pentru aglutinabilitate prin serul de aglutinare omolog și pentru detectarea aglutininelor de grup de seruri heterologice. În plus, diagnosticul este testat în reacția de aglutinare cu serul de oameni sănătoși (5 seruri). Reacția de aglutinare cu diagnosticul este stabilită conform metodei clasice [1].
Diagnosticul pregătit este introdus în fiole de 5 sau 10 ml; acestea conțin de obicei 3 miliarde de corpuri microbiene în 1 ml, cu excepția tularemiei, care conține 50 miliarde de bacterii în 1 ml și diagnosticul de bruceloză care conține 20 de miliarde de corpuri microbiene în 1 ml. După control, se face etichetarea medicamentului. Diagnosticul este adecvat timp de un an de la diluarea suspensiei uterine.
Medicamentele H formalizate dau aglutinare H aglomerată mare, în care fulgii sunt ușor de rupți și, prin urmare, trebuie să se evite agitarea puternică a tuburilor atunci când se citește reacția. O-diagnosticurile dau o aglutinare cu granulație fină, care nu se rupe cu agitarea [3].
Vi-diagnosticul este de asemenea utilizat, ceea ce face posibilă detectarea anticorpilor Vi în serul pacienților cu febră tifoidă și purtători de bacterii. Este o suspensie de tije tifoide, neutralizată cu formalină (0,4%). Pentru a obține medicamentul, tulpinile sunt recomandate în formă de V, tipice pentru toate semnele și fără aparat flagelar. Diagnosticul conține 3 miliarde de corpuri microbiene în 1 ml de materie suspendată. Activitatea sa specifică este verificată în reacția de aglutinare cu ser seric Vi mono-receptor. Perioada de valabilitate 1 an. În unele cazuri, în scopul diagnosticării serologice, nu sunt utilizate diagnosticul corpuscular, ci antigene izolate din organisme microbiene.
Celula microbiană este un complex complex complex de glucidolipoid-polipeptidă, care include atât antigeni complet cât și hapteni. Producția de antigene complete se efectuează conform metodei lui Boivin și Mezrobean. În acest scop, se prelevează o cultură pură studiată a unui tip specific de microbi și se însămânțează pe medii nutritive. După o zi de incubare la 37 ° C, spălarea s-a spălat de două ori (centrifugat) cu soluție salină, apoi s-a extras la temperatură scăzută cu o cantitate de 10 ori soluție de acid trichloroacetic ¼ N. Extractul este neutralizat cu acid carbonic la pH 7,0 și dializat timp de 2 zile în apă de la robinet și de 1 zi în apă distilată. Extractul dializat este precipitat cu patru volume de acetonă, dizolvat în apă distilată și precipitat din nou cu acetonă. Precipitatul rezultat al antigenului complet este spălat cu alcool și eter, uscat și depozitat sub formă de pulbere uscată [2].
Antigeni din celule microbiene recuperate în alte moduri: prin congelare-decongelare repetate, fierbere, sonicare, alcool, acid clorhidric și altele.
antigene bacteriene utilizate în reacțiile de precipitare, în scopul diagnosticării hemaglutinare pasivă și pentru studiul de microbi unități antigenice și dactilografierea lor [4].
În prezent, s-au dezvoltat metode de preparare a diagnosticului eritrocit cu o durată lungă de conservare. Principiul lor activ este antigenii extrași din aceste sau acele microorganisme, cu care sunt sensibilizate celulele roșii din sânge.
Principiul pregătirii diagnosticum eritrocitar este după cum urmează: La grupa de sânge uman defibrinat (1) sau RAM filtrat prin tifon și se spală de trei ori în centrifugă cu soluție salină rece. După aceea, formalina este tratată cu eritrocite. Se prepară o suspensie conținând 12,5% eritrocit, acesta este plasat într-o pungă de poli și agitat cu shyuttel formol pe mașină timp de 16 ore. În primele 2 ore, formalinul intră prin porii cefalici, apoi este străpuns și în cele din urmă rupt. Această metodă permite obținerea unui efect lent, inițial și treptat, de creștere a formalinei asupra eritrocitelor. La expirarea eritrocitelor zguduiri din nou filtrat prin tifon se spală de 6 ori volumul de zece ori răcită la C o soluție salină de 4-5 ° la o centrifugă la 2500-3000 rot / min, combinate cu un volum egal de soluție salină neutră steril și îmbuteliată. În această formă, eritrocitele formalizate pot fi stocate timp de până la un an. Ulterior, în funcție de natura antigenului, eritrocitele sunt tratate suplimentar sau tanin, sau se combină cu antigenul fără acest tratament [1].