Identificarea agentului cauzal al leptospiroza (Leptospira) - o boală infecțioasă care afectează mai multe animale (inclusiv câini, pisici, vite, șobolani) și care pot fi transmise la om. Răspândirea urină și fecale, Leptospira microscopice afectează organe și țesuturi, otrăvirea produsele de corp ale funcțiilor lor vitale.
Leptospira, ADN [PCR].
Leptospira, PCR (ADN).
Reacția în lanț a polimerazei (PCR).
Ce biomaterial poate fi folosit pentru cercetare?
O biopsie, un sânge venos, o băutură lichidă, prima porțiune dintr-o urină de dimineață.
Cum se pregătește în mod corespunzător pentru studiu?
Pregătirea nu este necesară.
Informații generale despre studiu
De la a doua săptămână de boală, leptospira se acumulează în principal în tubulii renale convulsi și dispar din sânge și alte țesuturi. O astfel de concentrare selectivă în epiteliu și țesutul spațiu rinichi intercelular duce la leziuni severe ale tubulilor renale si formarea urinei afectata si in cazuri grave cauze anurie (absența urinării) și uremia (acumulare în sânge de produse toxice ale metabolismului azotului, tulburări de concentrare a electroliților sanguini, și altele.).
Cu persistența leptospira în rinichi, de obicei, nu există semne de infecție acută, boala are loc adesea într-o formă latentă.
Crucial pentru a confirma diagnosticul „leptospiroza“ în orice fază a bolii, inclusiv etapele ulterioare ale procesului de infectare, sunt rezultatele testelor de laborator: bacteriologice (semănate), serologice (determinarea titrurilor serice de anticorpi specifici), (determinarea ADN molecular genetice leptospira prin metoda PCR).
Dezavantajul metodei bacteriologice este durata studiului datorită creșterii lente a leptospira în mediul nutritiv.
Testul serologic își pierde semnificația după ziua 19-20 a bolii, datorită scăderii treptate a titrului de anticorpi seric datorită încetării circulației leptospira în sânge. În plus, cu leptospiroză severă, în special împotriva terapiei intensive cu medicamente antibacteriene, anticorpii pot fi detectați numai după 2-3 luni de la debutul bolii.
Reacția în lanț a polimerazei (PCR) este o metodă moleculară de investigare, în timpul căreia materialul genetic (ADN) al leptospira este identificat într-o probă a unui biomaterial. Metoda se caracterizează prin specificitate ridicată (100%), sensibilitate (de la 10 la 1000 de exemplare de ADN din probă) și eficiență ridicată a diagnosticului, chiar și pe fondul tratamentului cu medicamente antibacteriene.
Unul dintre principalele avantaje ale PCR este că permite identificarea agentului patogen chiar dacă acesta din urmă este prezent în organism în cantități foarte mici.
Cu toate acestea, un rezultat PCR negativ nu ar trebui să fie baza pentru oprirea diagnosticului, deoarece nu este întotdeauna posibil să se determine exact faza specifică a bolii. Sensibilitatea diagnosticului de laborator cu leptospiroza poate fi îmbunătățită semnificativ prin utilizarea concomitentă a testelor serologice (determinarea titrurilor de anticorpi în ser) și PCR este în funcție de faza bolii.
Pentru ce se utilizează cercetarea?
- Pentru diagnosticul de leptospiroză.
- Pentru diagnosticul diferențial al leptospirozei cu alte boli.
Când este atribuit studiul?
- La diagnosticarea leptospirozei.
- Dacă există o suspiciune de persistență, leptospira în rinichi.
Ce înseamnă rezultatele?
Valori de referință: negative.
Motive pentru un rezultat pozitiv:
Motive pentru un rezultat negativ:
- perioadă de recuperare completă, când se formează imunitate stabilă și leptospirale în organism nu mai sunt prezente.
Ce poate influența rezultatul?
- Utilizarea unor medicamente antivirale - inhibitori ai polimerazei - uneori duce la un rezultat negativ fals.
Cine numește studiul?
Infecționist, nefrolog, urolog, medic generalist, chirurg, resuscitator.