1. Admisia materialului. Natura materialului depinde de localizarea primară sau secundară a agentului patogen microbian. Dacă materialul este folosit pentru excremente, care se întâmplă de obicei, acestea sunt luate înainte sau după o pauză de 24 de ore în tratamentul cu antibiotice. Material ia mai bine tub rectal, tamponul cu hârtie steril sau steril scutec pergament, un dispozitiv special pentru prelevarea de probe fecale (în orice caz, evitând contactul cu dezinfektanatami). Dacă materialul este sânge, luați 10,0 ml de sânge din vena cotului.
2. Materialul este transportat în sistemul "sticlă, metal" timp de cel mult trei ore după colectarea acestuia sau într-un conservant cu documente de însoțire de către un medic.
3. Mediile nutritive utilizate pentru cercetarea bacteriologică pot fi împărțite în trei grupe: a) mediu de îmbogățire. crearea condițiilor pentru reproducerea preferențială evoluate patogen și bazate fie pe principiul disponibilității într-un mediu de activare al factorului de creștere a microbului, sau pe principiul suprimarea creșterii microbiene care însoțește antagoniști. Primul grup corespunde mediului Rappoport, al doilea grup corespunde selenitei, magneziului, mullerului, penicilinei etc. b) medii de diagnostic diferențial. Acestea sunt medii nutritive dense care conțin un carbohidrat diferențiat - lactoză și indicator. E. coli descompunându lactoză (laktozopolozhitel-WIDE), cresc sub formă de colonii colorate în funcție de tipul de mediu în (mediu Endo Ploskireva) roșu și portocaliu sau violet (mediu Levine) color. Klebsiella pneumonia descompuse lactozei în mediu cu indicator bromotimol colonii galbene albastre și formează, în timp ce coloniile formate colonii laktozootritsatelnyh biovari culoare medie. Salmonella și Shigella pe Endomo, Levina, Ploskireva, de asemenea, nu descompun lactoza și dau colonii incolore; c) mediul de acumulare a culturii pure. Majoritatea Olkenitskogo (agar înclinat) mediu se utilizează: constă dintr-o coloană, iar porțiunea conică include lactoză, glucoză și zaharoză, reactivii indicator pentru determinarea hidrogenului sulfurat și a ureazei. Semănatul se face prin înțepare într-o coloană și o lovitură pe suprafața părții teșite. Odată cu creșterea microbilor glucoza mai bine descompusa in coloana, lactoza - pe o pantă, având ca rezultat schimbarea diferentiat culoarea mediului, formarea de gaz - bule formate și lacune în mediul înconjurător, cu producerea hidrogenului sulfurat - înnegrire în timpul injectării, și - schimbarea culorii a mediului on - ureazei portocaliu.
4. Identificarea culturilor izolate se bazează pe definiția:
* comună familiei de trăsături - morfologia bacteriilor (gr / -sticks), oxidaza-negativă, prezența unei capsule (pentru klebsiella);
* colonii de culori pe suporturi plate;
mobilitate (salmonella și escherichia sunt mobile, shigella și klebsiella imobile);
* sensibilitate la medicamente antibacteriene;
* Sensibilitate la bacteriofagi.
Determinarea structurii antigenice se bazează pe stabilirea preliminară a serogrupului, mai des cu seruri adsorbite monoreceptor și apoi serovar, de asemenea, cu seruri adsorbite.
Diagnosticul serologic începe cu producția de seruri de la pacienți. Ei detectează anticorpi în reacția de aglutinare, hemaglutinare sau RSK. Diagnosticul se bazează pe detectarea anticorpilor într-un titru de diagnosticare sau pe creșterea titrului de anticorpi în dinamica bolii.
Diagnosticul escherichiozei intestinale (colitecta).
Scop: alocarea unei culturi pure de E. coli și diferența de la reprezentanții oportuniste a microflorei intestinale normale.
Material pentru studiu: mase fecale.
Schema: 1 - însămânțare miercuri Endo (Levin)
2a - detectarea coloniilor colorate, microscopie de către Gram
2b - diferențierea preliminară a Escherichiei patogene de patogenitatea condiționată: stadializarea RA pe sticlă cu un amestec de seruri față de serogrupurile patogene
2c - o colonie care reacționează pozitiv în reacția de aglutinare este testată pe mediul Olkenitsky
3a - ținând seama de schimbările din mediul Olkenitsky: albirea și ruptura întregului mediu
3b - determinarea purității culturii izolate
3c - identificarea serotip Escherichia patogene (prin stabilirea p aglutinare cu seruri individuale OK pe sticlă și în tuburi.) Cu cultură vii (în mod specific la antigenul) și omorât prin fierbere (definiția O-antigen)
3g - test pentru indol, mobilitate și sensibilitate la antibiotice
Metoda serologică este formularea reacției de aglutinare cu serul pacientului (în a doua săptămână a bolii).
DIAGNOSTICELE TIPULUI ABDOMINAL, SALMONELELOR PARATIFICI A ȘI B.
Materialul pentru studiu este descris mai sus.
Schema de lucru (alocarea culturii de sânge):
1 - însămânțarea a 10 ml de sânge venos în mediu Rappoport;
2a - contextul mediului Rappoport: înroșirea mediului înconjurător fără gaze în flotor - agentul cauzal al febrei tifoide, înroșirea cu gaz în flotor - agenți cauzatori ai paratifoidului sau salmonellozei;
2b - microscopie de creștere;
2c - după ce le-a împărțit Levin sau Ploskirev în mediu;
3a - detectarea coloniilor incolore pe aceste medii;
3b - microscopia coloniilor;
3b - după ce l-au relocat miercuri pe Olkenitsky;
4a - indemnizație pentru creștere pe mediul Olkenitsky (vezi mai sus);
4b - determinarea purității culturii izolate;
4c - stabilirea structurii antigenice: mai întâi în RA pe sticlă cu seruri monoreceptoare la antigene O: pentru grupa A - O2, grupa B - O4, 5; D - H-E9. Apoi, în aceeași reacție cu serurile la antigene specifice (în cadrul acestui grup);
4d - determinarea proprietăților biochimice și morfologice suplimentare (descompunerea indolului, mobilitatea);
4d - determinarea sensibilității la bactriafagi specifice speciilor polivalente;
4e - definirea sensibilității la antibiotice.
DIAGNOSTICA LABORATORII A IERSINIOZEI INTESTINALE
Pentru bolile cauzate de Yersinia enterocolitica, diversitatea clinică este caracteristică. Cea mai frecventă este forma intestinală, mult mai rar - boli cu simptome de apendicită, și mai rar - formă septică.
Forma intestinală are loc sub formă de enterită, enterocolită și gastroenterocolită. Simptomele specifice sunt deseori absente, prin urmare, este dificil să se distingă de o salmoneloză, dizenterie, enterocolită de altă origine în imaginea clinică fără izolarea patogenului.
Metoda bacteriologică de cercetare.
Material pentru examinare: în forma intestinală, agentul cauzal este izolat de fecale; când este apendiculară - de la ganglioni limfatici și sânge mezenterici; cu septic - de la fecale și sânge.
Etapa - materialul este semănat cu o bucla sau tampon pe unul din mediile elective dens (Endo, Ploskireva, sulfitagar de bismut). Culturile sunt incubate timp de 24 de ore la 37 ° C și apoi timp de încă 24 de ore la 20-22 ° C.
Simultan, scaunul este inoculat într-unul dintre mediile de stocare (apă BCH sau peptonă). Sângele este însămânțat la un raport de 1:10 numai la mediul de acumulare. Culturile sunt plasate la 4-5 ° C și păstrate timp de până la 30 de zile, semănându-se periodic la intervale de 3-5 zile pentru mediile elective dense. Y. enterocolitica la temperaturi scăzute se înmulțește în aceste medii, în timp ce salmonella, shigella, E. coli, proteus nu se reproduc.
Etapa II - Culturi pe medii solide Viewers și colectate colonii suspecte (rotunde, mărimea de la 0,5 până la 2 mm în diametru, grayish la Endo și Ploskireva și maro pe vismutsulfitagare). Din colonii se fac scurgeri pe Gram și cu prezența de gram-bastoane pe suportul lui Russell.
Etapa III - când schimbați culoarea coloanei pe un mediu Russell de la creșterea pe ea, faceți o frotiu pe Gram pentru puritate și studiați următoarele teste: