Metoda - Izolarea unei culturi pure a microbului - patogen din material patologic, un studiu detaliat al proprietăților sale morfologice, tinctoriale, culturale, biochimice și serologice în vederea identificării ulterioare a agentului patogen. În implementarea metodei bacteriologice de investigare, se disting patru etape.
A. Luând în considerare datele obținute prin examen microscopic direct, selectează mediile nutritive cel mai eficient, care este cel mai probabil să fie capabil de a obține creșterea unei culturi presupune microbi - agenți patogeni.
B. însămânțarea materialului pe un număr de medii de cultură: lichid și solid, versatil, electivă, selectiv, diagnostic diferențial. Când această însămânțare într-un vas Petri, cu o cursă buclă bacteriologic mediu solid produse pentru a asigura posibilitatea de creștere a coloniilor izolate de microbi (puteți utiliza, de asemenea, metoda Drigalski sau alte metode de culturi microbiene de separare).
A. Proprietățile culturii studiate crescute pe medii nutritive de microorganisme; Selecția este făcută din colonii suspecte. Trebuie subliniat faptul că selectarea coloniilor suspecte - etapa cea mai importantă și dificilă a muncii. Aceasta se bazează în principal pe determinarea caracteristicilor colonii de microbi, dar de multe ori nu este posibil să se diferențieze colonii de microbi specii și trebuie să studieze în continuare morfologia bacteriilor din frotiurile coloniilor suspecte, în special creșterea microorganismelor pe mediile-diagnostic diferențial etc. Izolarea culturi pure de bacterii și studiul lor poate fi realizată prin efectuarea pre-inocularea mediului de stocare lichid, dar timpul suplimentar petrecut studiu.
B. Din coloniile suspecte preparare tampon bacteriologic, Gram colorare și mikroskopiruyut (identitate set la microorganisme cunoscute prin examen microscopic pe treapta 1).
B. Din restul coloniei suspecte, culturile sunt transferate în agar înclinat peptone din carne (alte medii nutritive pe care se așteaptă o creștere bună a microorganismelor izolate). Scopul, acumularea unei culturi pure de microbi - presupusul agent cauzal al bolii, pentru că următoarea etapă a studiului va necesita o mulțime de masă microbiană.
Am studiat proprietățile saccarolitic patogene destinate (fabricate prin inocularea mediului mediu pestriț seria Olkenitskogo, Russell și colab.), Activitatea proteolitică (cultură pe gelatină, lapte de Tukaeva, determinarea hidrogenului sulfurat și a formării de indol în timpul creșterii pe bulion de carne-peptonă). Investigăm sensibilitatea culturilor izolate la antibiotice (de obicei de discuri de hârtie standard, cel puțin - prin diluții în serie). Serotipizare produsă în reacția de aglutinare pe sticlă cu grup și seruri tipic de diagnosticare; fagic tastarea bacteriofagii standard de diagnostic. Pentru a identifica factorii de patogenitate de bacterii sunt studiate, în unele cazuri.
Rezultatele studiilor efectuate sunt luate în considerare. Bazându-se pe o comparație a proprietăților (morfologice, tinctoriale, culturale, biochimice, serologice etc.) dezvăluite în microorganisme, se identifică microbi. Acesta a emis un răspuns final la rezultatele testelor bacteriologice, care indică tipul agentului patogen (uneori - serotip, biovar, tipul său de fag) si sensibilitatea la antibiotice.
Destul de des, pentru a obține rezultate fiabile, răspunsul este precedat de metode biologice, alergologice sau de altă natură.
Avantajele metodei bacteriologice de diagnosticare: fiabilitatea ridicată a rezultatelor studiului; posibilitatea de a obține date suplimentare privind sensibilitatea agenților patogeni izolați la antibiotice; posibilitatea efectuării de studii epidemiologice.
Dezavantajele acestei metode este durata studiului (cel puțin 4-5 zile), și că nu poate fi folosit în cazurile în care un agent infecțios nu crește pe medii artificiale (de exemplu, Rickettsia, Chlamydia).