2. Metode de indicare la infectarea animalelor de laborator.
3. Metode de identificare a virușilor în infecția animalelor de laborator.
4. Referințe.
și infecție experimentală
Metodele de cercetare asociate utilizării animalelor sunt numite biologice sau experimentale, iar animalele utilizate în acest scop sunt experimentale sau de laborator. Cele mai utilizate laboratoare microbiologice folosesc iepuri, cobai, șoareci albi și șobolani.
animalele de laborator sunt donatori care au sângerat în mod sistematic pentru a obține ser, plasmă, celule roșii sanguine, celule albe din sânge, necesare pentru formularea multor teste serologice și pregătirea mediilor de cultură de sânge. animalele de laborator sunt de asemenea folosite pentru a diagnostica anumite boli infecțioase modelarea proceselor infecțioase acute și cronice experimentale, stabilirea virulenta si toxigenicitatea tulpini microbi preparate pentru a determina activitatea de vaccinuri și studii privind inofensivitatea lor studiate.
Modalități de infectare a animalelor de laborator
În funcție de obiectivele studiului sunt diferite metode de infectare: intradermic, subcutanat, intramuscular, intraperitoneal, intravenos, oral sau intranazal. Prin metodele de mai sus, cu excepția infecțiilor orale și intranazale, infecția se efectuează cu o seringă.
Tehnica de a lua sânge de la animale de laborator
și obținerea de ingrediente individuale
O cantitate mică de sânge este obținută de la iepuri, porci de guinea de la venele urechii, la șoareci și șobolani din venele cozii și la cantități mari din inimă. În cazuri speciale recurs la completare sau totală, sângerare, după care animalul moare.
Izolarea virusurilor la animale de laborator
În prezent, animalele de laborator sunt folosite comparativ rar pentru a izola virușii de materialul infecțios. Această metodă este înlocuită aproape complet de izolarea virușilor în culturile celulare și de dezvoltarea embrionilor de pui, deoarece aceasta este mai economică, mai puțin laborioasă și permite examinarea rapidă a rezultatelor studiului.
animalele de laborator sunt utilizate în principal pentru izolarea virusurilor care nu cauzează dezvoltarea modificărilor citopatice în culturile celulare și propagat în embrioni de pui, și anume, pentru virusul Coxsackie A patogeni infecții transmisibile și coriomeningitei limfocitare. Pentru a izola aceste virusuri, se folosesc șoareci albi. metode de animale infectate, ținând cont de rezultatele studiului și metodele utilizate de identificare serologică a izolarea virusului sunt descrise în secțiunile „infecție enterovirus“, „coriomeningitei limfocitare.“
METODE DE IDENTIFICARE A VIRUSELOR
Pentru indicarea virușilor în materialul infecțios, pot fi utilizate următoarele metode.
- Microscopice: a) virusoscopie; b) detectarea incluziunilor intracelulare; c) Metoda de imunofluorescență.
- Biologică, inclusiv izolarea virusurilor: a) în culturi celulare;
b) în dezvoltarea embrionilor de pui; c) pe animale de laborator.
- Metode de hemaglutinare și hemadsorbție: a) reacția de hemaglutinare;
b) reacția de hemadsorbție.
Identificarea virusurilor se efectuează folosind metode serologice, incluzând: a) reacția de inhibare a hemaglutinării; b) reacția hemadsorbției și neutralizării întârziate, ținând seama de rezultatele hemadsorbției; c) reacția de fixare a complementului; d) reacția de neutralizare; e) reacția de precipitare în corp; f) Metoda de imunofluorescență.
Metode microscopice. Virusoskopiya. Cu ajutorul unui microscop de lumină, pot fi detectate numai viruși mari, ale căror dimensiuni depășesc 150 nm. Recunoașterea virusurilor care au dimensiuni mai mici este posibilă numai într-un microscop electronic.
Pentru a detecta virușii mari, pot fi utilizate lumină, contrast de fază și microscopie luminescente. Cea mai frecvent folosită microscopie luminoasă este frotiurile și amprentele colorate. Cea mai bună metodă de colorare pentru detectarea virușilor este argintarea de către Morozov. Metoda se bazează pe depunerea particulelor de argint, ceea ce duce la o creștere a mărimii virusurilor. Pentru pictura pe Morozov pregătesc frotiurile și amprente din material infecțios, sursa care servește adesea ca și conținutul erupție pe piele, sputa, mucus nazofaringean. Virusurile sunt vopsite într-o culoare maro închis și sunt formațiuni rotunjite omogene situate individual sau în grupuri pe un fundal maro deschis de droguri.
VIRUSOSCOPIA este o metodă de orientare rapidă pentru diagnosticul de laborator al bolilor virale. Cu toate acestea, nu permite stabilirea naturii exacte a agentului patogen, iar identificarea acestuia necesită alte metode de investigare.