Caracteristicile culturilor tisulare
Pentru cultivarea virușilor se utilizează un număr de metode. Aceasta este cultivarea în organism a animalelor experimentale, dezvoltarea de vibriuri de pui și culturi de țesut (mai des - țesuturi embrionare sau celule tumorale). Mediile nutritive multicomponente sunt folosite pentru a crește celulele culturilor de țesut (Medium 199, Medium Eagle, etc.). Acestea conțin un indicator de măsurare a stării de mediu și antibiotice pentru a suprima posibila contaminare bacteriană.
Cultura de țesut poate fi confrunta, în care viabilitatea celulară nu se poate salva numai temporar, și în creștere, în care celulele nu păstra numai mijloacele de trai, dar, de asemenea, în mod activ împărtășesc.
Culturile spinner de celule de țesut sunt fixate pe baze solide (sticlă) - de obicei, într-un singur strat (un singur strat), iar suspendarea lor - acestea sunt suspendate într-un mediu lichid.
În funcție de numărul de pasaje deținute de o cultură de țesut în creștere, printre acestea se numără:
- culturile de țesut primar (tripsinizate primar) care nu pot suporta mai mult de 5-10 pasaje;
- culturi de țesut semi-transplantabile, care sunt menținute în cel mult 100 de generații;
- culturi de țesut transplantabile care sunt menținute pe o perioadă nedeterminată de lungă durată în numeroase generații.
Cel mai adesea se utilizează culturi de țesut primar transplantat și transplantat.
Efectul citopatic al virușilor
Înmulțirea virușilor în cultura de țesut poate fi judecată prin acțiunea citopatică (CPD):
- distrugerea celulelor,
- schimba morfologia lor,
- formarea de simplasturi sau sinteze multinucleare ca urmare a fuziunii celulelor.
- în celulele de cultură tisulară, atunci când virușii se înmulțesc, incluziunile se pot forma - structuri care nu sunt caracteristice celulelor normale.
Incluziile sunt detectate în frotiurile de pete Romanov-Giemsa din celulele infectate. Ele sunt eozinofile și bazofile.
Localizarea în celulă distinge:
incluziuni nucleare tipice sunt formate în celulele infectate cu virusuri herpes (vițel Cowdray), citomegalovirusul și polyomavirus, adenovirus și incluziuni citoplasmatice - virusul zoster (vițel Guarnieri și PASCHEN), rabie (vițel Babes-Negri) și altele.
Proliferarea virușilor în cultura de țesut poate fi de asemenea judecată prin metoda "plăcilor" (colonii negative). Prin cultivarea virusului în celulele monostrat sub agar acoperite in situ distrugerea celulelor afectate format zona Monos. Așa-numitele "pete sterile" sau plăci. Acest lucru face posibilă nu numai pentru a determina numărul de virioni în mediu de 1 ml (presupunând că unul este progenitura placa virionului unul), ci și să se diferențieze între virusurile unui blyashkoobrazrovaniya fenomen.
Următoarea metodă de a judeca reproducerea virusurilor (numai hemaglutinare) în culturi de țesuturi, poate fi considerat un gemadsorbtsii de reacție. În cultivarea virușilor cu activitate hemaglutinantă se poate produce sinteza hemaglutinină excesivă. Aceste molecule sunt exprimate pe suprafața celulelor de cultură de țesut și celule de cultură de țesut dobândi capacitatea de a adsorbi pe eritrocite însele - un gemadsorbtsii fenomen. Moleculele de hemaglutinina se acumulează în mediul de cultură, aceasta duce la faptul că lichidul de cultură (se acumulează noi virioni) va dobândi capacitatea de a provoca hemaglutinare.
Cea mai obișnuită metodă de estimare a multiplicării virușilor în cultura de țesuturi este metoda "testului de culoare". Atunci când se răspândește într-un mediu nutritiv cu un indicator al celulelor neinfectate ale unei culturi de țesut datorită formării produselor metabolice acide, se schimbă culoarea. Odată cu reproducerea virusului, metabolismul normal al celulelor este rupt, nu se formează produse acide, mediul păstrează culoarea originală.
- Vaccinul împotriva HPV câștigă popularitate în rândul adolescenților americani
- Mama multor copii a donat un rinichi unei femei care a fost întâlnită într-o biserică.
- Supradozajul de opiacee din Canada continuă să crească, dar se ia un pas pentru depășirea crizei
- Beneficiile intervenției chirurgicale de by-pass gastric persistă timp de 12 ani
- O companie din Statele Unite a anunțat crearea unui remediu eficient pentru obezitate
Evaluați nivelul de medicamente gratuite din regiunea dvs.
Poate fi interesant:
- Celule și țesuturi Anatomia umană
- Histogeneza tumorii Anatomia patologică
- Necroza Anatomia patologică
- Celulele stem sunt derivate din pielea șoarecilor
- Celulele stem multipotent sunt în orice țesut? Știri despre medicină