virusurile oncogene sunt un grup de virusuri nerodstven-TION (tab. 22.1), care pot provoca infecții persistente în celulele umane, având ca rezultat transformarea lor (imortalizare). Celulele transformate dobândi noi proprietăți - rată ridicată de proliferare, capacitatea de a diviza sensibilitatea la infinit necontrolate, rachivayut ut la semnalele de tensiune de inhibare a razmno, incluzând inhibiția de contact. Există o schimbare în morfologia și metabolismul lor. Apariția unui proces de transformare
22.1. Virusurile oncogene și virusul imunodeficienței umane
FAMILIE Herpesviridae SUB-FAMILIE Gammaherpesvirinae Genul Lymphocryptovirus Virus Epstein-Barr (EBV)
Genus Rhadinovirus herpesvirus uman 8 tip sarcom Kaposi lui (HHV-S) Virusul FAMILIA Hepadnaviridae hepatitei B (VHB), virusurile FAMILY GeNUS Retroviridae Deltaretrovirus T-limfotrofe de tipuri umane 1, 2, 5 (HTLV-1, HTLV-2, HTLV -5)
celulele din organism pot duce în cele din urmă la apariția neoplaziei maligne. Papillomavirusurile umane (HPV) sunt pur și simplu dispuse de virusuri care conțin ADN, cu tipul izometric de simetrie al capsidului. Până în prezent, există mai mult de 70 de tipuri de HPV care sunt diferențiate pe baza secvenței primare a ADN-ului. HPV afectează epiteliocitele pielii și
HPV-16, HPV-18 și altele.
virusul imunodeficienței umane (HIV) de tip 1, 2 (HIV-1, HIV-2)
Papilomele benigne de diferite localizări, tumori ale pielii și ale membranelor mucoase ale tractului respirator superior, genitale (cancer de col uterin)
Leziunile renale (vezi și capitolul 21)
Leukoencefalopatia progresivă multifocală (vezi și capitolul 19)
Leucemie / limfom al celulelor T, limfom endemic Burkitt, carcinom nazofaringian
Leucemia limfocitară limfocitară / limfom limfatic acut, paralizia spastică tropicală (vezi și capitolul 19)
Infecția HIV / Sindromul imunodeficienței dobândite (HIV / SIDA)
cochilii Zist, de preferință ale tractului respirator și Geni-tal. YaRKyavlyayutsya patogeni excrescențe benigne-TION - papiloame (veruci) palmelor și tălpilor (cele mai multe tipuri de HPV 1, 2, 3, 4), ale gurii și gâtului (adesea HPV6 și 11 al doilea tip), a organelor genitale externe - acuminatum condyloma (HPV 6 , 11, 42-44 tipurilor). Cu infectie NRC este de asemenea asociat cu dezvoltarea unui număr de Start malign - ble: shyuskokletochnogo keratokartsinomy cancer de piele, -noma creta - în celulele tumorii, în unele cazuri, este posibil pentru a detecta tipurile de HPV 37, 38, 41 și 48, neoplazie intraepiteliale ale tractului genital (col uterin, vulvar polovo doilea membru) asociat în principal cu YaRKtipov 6, 11, 16 și 18 sunt cele mai bine oncogene HPV tipurile 16 si 18. Aceste virusuri în 90-100% din cazuri sunt detectate în celulele tumorale in carcinomul de col uterin și cancer depistate de directe intestine și carcinoame IU nazofaringe și laringe.
Polyomavirusurile provoacă tumori la animalele de laborator. La om, reprezentanții acestui gen - virusurile VK (BKV) și JC (JCV) - provoacă o infecție persistentă latentă asimptomatică pe tot parcursul vieții. Bolile se dezvoltă numai pe fundalul imunodeficienței. BKV este agentul cauzator al cistitei hemoragice (vezi capitolul 21). JCV provoacă o infecție lentă - leucoencefalopatia multifocală (vezi capitolul 19).
Virusul Epstein-Barr este agentul cauzator al mononucleozei infecțioase (vezi capitolul 21) și cauzează infecție latentă asimptomatică pe tot parcursul vieții, persistentă în limfocitele B imature. infecție latentă este însoțită de o trans formarea de limfocite B. Cu imunitate celulară de protecție insuficientă, proliferarea necontrolată a limfocitelor B transfectate poate duce la dezvoltarea unei tumori de calitate slabă, limfom. Nu se efectuează diagnostice speciale de laborator.
Herpesvirusul uman de tip 8 (NUK-8) provoacă infecții latente asimptomatice pe tot parcursul vieții. Cu reactivarea sa pe fundalul imunodeficienței (SIDA, vârsta peste 60 de ani), dezvoltarea unei tumori vasculare - angiosar coma Kaposi. Nu se efectuează diagnostice speciale de laborator.
Virusul hepatitei B este agentul cauzator al hepatitei virale B (vezi capitolul 20). În cazul unei forme cronice active de boală după 10-35 de ani, se pot dezvolta cancere primare. În mai mult de 80% din cazuri, provirusurile defecte se găsesc în celulele tumorale. Nu se efectuează diagnostice speciale de laborator.
Dintre retrovirusurile oncogene, legătura cu tumorile umane este stabilită numai pentru virusul T-limfotropic uman de tip 1-HTLV-1. Virusul provoacă pe tot parcursul vieții asimptomatice
latentă, persistentă în limfocitele T; ajutoare (CD4 +). Bolile - limfomul acut de celule T, leucemia / limfomul citaric sau yaralichul spastic tropical - se dezvoltă în mai puțin de 5% din cazuri și are o perioadă lungă de incubație.
Human Imunodeficienței Virușii 1 și de tip 2 (HIV-1 și HIV-2) sunt agenții cauzatori de infecție cu o lungă perioadă de incubație lentă (latentă) de la 3 la 10 ani sau mai mult. Infectia primara poate aparea demon-simptom sau nespecifice pro-fenomene asemănătoare gripei. După o perioadă de latență lungă de HIV-in-particularizare individuale in curs de dezvoltare Sindromul Dobândite munodefitsita im (SIDA), care se caracterizează printr-o scădere a celulelor T CD4 + din sânge (sub 500 / mm3) și o varietate de manifestări clinice, incluzând infecțiile oportuniste legate de SIDA și tumorile. Pentru a preveni răspândirea și inițierea în timp util la un tratament diagnosticarea precoce primordial al infecției cu HIV. Globală de laborator de strategie obsledova-TION pentru detectarea HIV / SIDA, următoarele direcții: examinarea pacienților cu SIDA clinice sau a bolilor asociate cu SIDA (infecții opportunis-Cally și tumori); screening-ul persoanelor sanatoase, contactul cu pacientii (sex, mama-re-benok et al.); examinarea femeile gravide, femeile însărcinate și cele cu spitalizare planificate; examinarea anonimă a tuturor dorințelor. Strict este testarea obligatorie a donatorilor de sânge, spermă, măduva osoasă și alte, în scopul de a identifica sursele potențiale de infecție și de a preveni infecția Yat-Rogen.
Tema 22.1. Diagnosticul microbiologic al infecțiilor cauzate de virusuri umane oncogene și virusul imunodeficienței umane
1. Proprietățile biologice ale virusurilor oncogene. Virusuri și oncogene celulare și antioncogene. Rolul virusilor oncogeni în patogeneza imaginilor maligne umane.
2. Proprietățile biologice ale virusului HIV. Ecologia HIV și epidemiologia infecției HIV, în pericol. Patogee-nez, diagnostic, principii de prevenire și tratament al HIV / SIDA. SIDA asociate infecțiilor oportuniste.
▲ Alocarea elevilor
1. Să se familiarizeze cu instrucțiunile de cercetare în laboratorul virologic.
2. Identificați materialul pentru diagnosticarea infecției cu HIV.
3. Să se familiarizeze cu sistemele de testare pentru serodiagnosticul infecției cu HIV.
4. Evaluarea rezultatelor serodiagnozei infecției HIV prin ELISA și planificarea unei examinări ulterioare.
▲ Instrucțiuni metodice
• Diagnosticul microbiologic al infecțiilor provocate de
HPV
MATERIALE PENTRU STUDIU: zgârieturi sau biopsie din zona afectată a pielii sau a mucoasei.
Metoda citologică este detectarea celulelor modificate cu semne de CPD (koilocite).
Metoda viroscopică - detectarea particulelor virale mature în celulele infectate. Această metodă vă permite să detectați viruși numai dacă sunt reproduse. În celulele tumorale există virusi defecți care nu sunt capabili de repetare.
Metoda virologică - nu se aplică în legătură cu complexitatea culturii virusului.
Metode de diagnostic expres: metode imunochemice și biologice moleculare. Studii imunochimice. Detectarea antigenelor virale în celulele infectate prin metoda IF.
Studii moleculare și biologice. Detectarea ADN-ului viral în celulele infectate - metoda sondei ADN (hibridizarea ADN in situ), PCR. Aceste metode permit diagnosticarea infecțiilor latente și prezența virușilor defecți.
Serodiagnosis. În scopul diagnosticării infecției cu NRK, sunteți anticorpi la proteinele capsidice și oncogene virale.
• Diagnosticul microbiologic al infecțiilor cauzate de BKV
și JCV (a se vedea capitolul 21 și, respectiv, capitolul 19)
• Diagnosticul infecțiilor cauzate de HTLV
MATERIAL PENTRU CERCETARE: sânge.
Serodiagnosticul - detectarea anticorpilor la proteinele virale - este utilizat pentru a detecta transmiterea virusului și diagnosticul de laborator al paraliziei spastice tropicale (vezi și capitolul 19).
• Diagnosticul microbiologic al infecției cu HIV
Material de cercetare: sânge, leykrtsity-ne rifericheskoy ganglionilor limfatici punctiforma de sânge și măduva osoasă. Virusul poate fi, de asemenea, detectate în evacuarea membranelor If-Zist ale tractului genital, spermă, salivă, fluid lacrimal, laptele matern, lichid cefalo-rahidian, în materialul-evaluat corp.
Metoda virologică (schema 22.1.1). Izolarea virusului din sânge și leucocite din cauza complexității cultivării în practica clinică este rar utilizată. Principala indicație pentru utilizare este depistarea precoce a virusului la nou-născuții din mame infectate cu HIV. Virusul este izolat prin co-cultivarea leucocitelor mononucleare ale sângelui periferic al unui pacient cu leucocite de donatori sănătoși în prezența IL-2 pentru a stimula creșterea limfocitelor T. CPD se manifestă prin formarea de sinciți și prin liza celulelor infectate. Metoda permite identificarea unei infecții latente. Prezența virusului este evaluată prin rezultatele determinării antigenelor specifice HIV (p24, revers transcriptază) în mediul de cultură și celulele infectate. Cultivarea HIV necesită respectarea condițiilor speciale de siguranță în timpul muncii.
Metode de diagnostic expres: metode imunochemice și biologice moleculare. Studii imunochimice. Detectarea antigenilor virali (p24) în sânge și limfocite cu ajutorul ELISA. Trebuie luat în considerare faptul că p24 într-o cantitate suficient de detectabilă este prezentă în sânge numai la infecția primară și la stadiile tardive ale bolii.
Studii moleculare și biologice. Detectarea virusurilor ARN în sânge prin RT-PCR. Metoda se bazează pe conversia ARN-ului viral la ADN complementar (ADNc) utilizând enzima revers transcriptază (RT) și amplificarea ADNc obținută prin PCR - este utilizată pentru a determina nivelul viremiei. Sensibilitatea metodei face posibilă detectarea virusului în concentrații mici.
Serodiagnosis. Detectarea anticorpilor la antigeni virali (proteine de suprafață gpl20) - metode ELISA - sunt utilizate pentru examinarea în masă. În cazul unui rezultat pozitiv, în scopul verificării, anticorpii la proteinele virale individuale sunt căutați prin imunoblotting-ha, IF indirect și alte metode.
Metoda de imunoblotare ("western blot") - testarea serului pentru prezența anticorpilor împotriva virusului individual
Pentru confirmarea indirectă a diagnosticului de SIDA, pot fi utilizate metode de evaluare a statusului imun al: determinarea numărului total de limfocite, limfocitele T, CD4 raportul + / CD8 + T-limfocite, numere naturale niveluri Kill Moat de imunoglobuline serice. Pentru SIDA caracterizata prin dezvoltarea de deficit de celule T: Reducerea coli-operarea limfocitelor T, preferabil T helper CD4 + (mai mic de 500 / mm3), reducerea exponent CD4 + / CD8 + 1.0 de mai jos; reducerea numărului de criminali naturali; Hipogamaglobulinemia policlională mintală cu o creștere a conținutului IgG.
• Medicamente de diagnostic, prevenire și curativitate
Sisteme de testare pentru diagnosticarea HIV / SIDA prin PCR.
Sisteme de testare pentru serodiagnosticul HIV / SIDA prin ELISA.
Sistem de testare pentru diagnosticarea infecției cu papilomavirus prin PCR.
Inhibitorii revers transcriptazei: azidotitimidina (AZT), di-deoxiinozina (DDI), dideoxicidina (DDC), nevirapina, etc.
Inhibitori de protează: saquinavir, ritonavir, indinavir, nelfinavir și altele.
Preparate pentru imunoterapie: interferon leucocit uman; interferon recombinant.