Istoria dezvoltării bacteriofagului, ca una dintre direcțiile de microbiologie, merge departe în trecut. Primele rapoarte privind dizolvarea microorganismelor au apărut la sfârșitul secolului XIX - începutul secolului XX. În 1898 omul de știință rus
După descoperirea fenomenelor bacteriofagului Félix d'Herelle a dezvoltat teoria că bacteriofagii de bacterii patogene, fiind paraziți lor, joacă un rol important în patogeneza infecțiilor, oferind recuperarea corpului unui pacient, și apoi - crearea imunității specifice. Această situație a atras atenția asupra fenomenului de numeroși cercetători bacteriofag care se așteptau să găsească în fagii mijloc important de combatere a bolilor infectioase cele mai periculoase de oameni și animale.
În fosta URSS, unul dintre centrele de bacteriofag a fost Institutul de Bacteriologie, redenumit ulterior Institutul de Vaccine și Seruri, iar în prezent Institutul de Bacteriofag, Microbiologie și Virologie din Tbilisi. A fost fondată în 1923 de profesorul G. Eli-Av, care în 1918, independent de D'Erell, a descoperit bacteriofagii activi în holera vibrio din apele râului Kura. Aceste observații au fost motivul întâlnirii sale cu DZrelle la Paris la începutul anilor 1920 și decizia de a studia în continuare această problemă.
La începutul anilor 1930, D'Erell a vizitat de două ori Tbilisi. Ca urmare a comunicării acestor doi oameni de știință, a fost planificat un program pentru studiul bacteriofagilor prin înființarea unui centru mondial de bacteriofage.
Aproape toate tipurile de bacterii patogene și saprofite sunt cunoscute a fi fagi.
Studii complete de bacteriofagi, realizate în ultimii 40 până la 45 de ani, au permis utilizarea pe scară largă a acestora pentru a rezolva multe probleme în microbiologie, virusologie, genetica, biochimie, imunologie, radiobiologie, biotehnologie si alte domenii ale biologiei. Prin urmare, un bacteriofag, primul curs de dezvoltare ca un domeniu îngust de microbiologie medicale, a dobândit acum o semnificație biologică generală.
Studiile care utilizează fagii au evidențiat mecanismele unor astfel de procese biologice, cum ar fi replicarea ADN, recombinarea, transcripția și reglarea genei. Datorită studiului fagilor, a fost descoperită și posibilitatea dezvoltării multor metode și direcții importante de inginerie genetică.
Cu ajutorul fagilor se efectuează studii radiobiologice extinse, precum și selecția inițială a agenților chimioterapeutici și a anumitor antibiotice împotriva bolilor virale și tumorilor maligne.
Fagii sunt utilizați pentru cele mai importante cercetări biologice ale spațiului cosmic.
In medicina veterinară, precum și utilizarea practică a bacteriofagilor legate de studiul variabilitatii genetice a bacteriilor (transducția, conversie fagului), indicarea și identificarea bacteriilor patogene, terapie fagilor și fagoprofilaktikoy.
Cu toate acestea, în ultimele două decenii, opinia dominantă era că studiul fagilor nu mai putea da științei nimic fundamental nou. În Rusia, la momentul ingineriei genetice, a existat o deviere bruscă de la studiul fagilor în favoarea unor studii mai bine finanțate. Doar câteva laboratoare din Rusia continuă până în prezent cercetarea fundamentală a fagilor. În opinia majorității fageologilor, este evident că plecarea de la cercetarea fagului nu a fost fundamentală. Deci, în ciuda materialului științific acumulat privind studiul proprietăților biologice ale bacteriofagilor, multe întrebări necesită cercetări suplimentare. De exemplu, în majoritatea, așa cum sa crezut anterior, a modelului bine studiat al fagilor de Escherichiosis din seria T, în ciuda perioadei de cercetare de 40 de ani, nu a fost posibilă clarificarea funcției a două treimi dintre produse. În plus, nu există nici o schemă unică de taxonomie și clasificare morfologică a acestor microorganisme, nu există seturi standard de bacteriofagi pentru mulți agenți patogeni ai bolilor animale și umane, precum și scheme și parametri pentru utilizarea lor.
Departamentul de microbiologie, virusologie, epizootiologie și examinarea sanitar-veterinare UGSKHA a identificat unul dintre domeniile de cercetare prioritare - izolarea si studiul bacteriofagi. La departamentul, in colaborare cu centre de cercetare de conducere din țară (VNIIVSGE, VGNKI, ARRIAH, VNIIVO) de peste treizeci de ani efectuat lucrări de cercetare pe această temă, în special, studiul bacetriofagilor slab studiat enterobacterii veterinar.
Alegerea acestui domeniu de cercetare este legată de faptul că, în ultimii ani, prin activitatea cercetătorilor interne și externe, a extins o idee despre semnificatia etiologică a familiei Enterobacteriaceae de bacterii din animale și a bolilor umane. Membrii acestei familii sunt larg răspândite în natură, iar cele mai multe dintre ele sunt de microflorei normale a tractului gastro-intestinal de animale și oameni. Cu toate acestea, printre aceste microorganisme sunt genul patogene, specii și variante capabile să producă la om și animale ca boala independent (ehsherihioza, salmonella, iersinioza, kleb- siellez și colab.) Și enterite, supurație răni, abcese, mastita, endometrita, meningita , pneumonie, sepsis și m. p. produse alimentare și furaje-toxicoză și toksikoin fektsii și colab.
Deosebit de importante sunt lucrările de diferiți cercetători pentru a studia rolul acestor microorganisme în etiologia bolilor gastro-intestinale ale animalelor tinere, care continuă să reprezinte o problemă majoră, sunt omniprezente și pot provoca mari pierderi economice pentru crescătorii de animale, în special ferme pe scară largă.
Pentru o lungă perioadă de timp, mai ales în perioada 1960 - 1980-e ai secolului trecut, aproape toate bolile animalelor nou-nascuti cu simptome clinice de diaree atribuite bolilor netransmisibile funcționale, numite dispepsie, în ciuda prezenței unor semne ale procesului epizootică. Deși deja în activitățile de tratament și de prevenire a acestora „dispepsie“ acțiune prezentă la ruptura agentului microbian și lanțul epizootică (utilizarea de antimicrobiene, dezinfecție, îmbunătățirea schimbărilor periodice pe principiul „totul este gol - toate ocupat“ și colab.).
Până în prezent, a acumulat o multitudine de elemente de fapt, ceea ce indică faptul că, în marea majoritate a cazurilor de boli gastro-intestinale ale animalelor tinere au natură infecțioasă și sunt cauzate de o varietate de agenți. Locul specială în etiologia bolilor animalelor nou-născute ia așa-numita „ferma“ microfloră condiționat patognennaya care, spre deosebire de agenți de „infecții clasice“ hrănite zilnic cu excremente de reproducție clinic sănătoși (-bacillicarriers animale), precum și în cazul în care primele cazuri ale bolii - materiile fecale ale pacientului tinere în localurile în care animalele se nasc și își petrec cultivarea lor în primele săptămâni de viață.
Pentru această microfloră, împreună cu alte microorganisme includ bacterii din familia Enterobacteriaceae, a căror cunoaștere atât agenți patogeni de animale și oameni în ultimele decenii a crescut datorită muncii multor cercetători.
Prin contaminarea materiilor prime alimentare și a produselor alimentare, enterobacteriile menționate mai sus sunt periculoase pentru oameni, provocând infecții toxice severe.
Eficacitatea măsurilor terapeutice depinde în mare măsură de diagnosticarea în timp util a bolii, astfel că se acordă o atenție deosebită îmbunătățirii metodelor de diagnosticare a bolilor cauzate de reprezentanții patogeni ai enterobacteriilor sau care au loc cu participarea acestora.
În cazul în care diagnosticul metodei bacteriologică există o serie de dificultăți. Una dintre ele este faptul că baza pentru identificarea acestor bacterii este proprietățile lor biochimice. Intensitatea muncii și durata studiului nu permite proprietăți enzimatice de rapid și precis identificarea acestor microorganisme. laborator moderne metode de diagnostic (PCR, ELISA, RIA), care pot fi utilizate în acest scop, deși ele sunt foarte specifice și sensibile, dar complexitatea procedurilor, costul ridicat al echipamentelor și reactivi pentru producerea acestor reacții le face inaccesibile majorității până laboratoare veterinare.
În acest sens, a existat necesitatea de a căuta metode alternative de diagnostic de laborator, care să fie mai puțin laborioase, mai rapide și mai accesibile. Una dintre aceste metode este fagodiagnostica. Metodele de fagodiagnostică, dezvoltate la mijlocul secolului trecut, sunt specifice, nu necesită mult timp, materiale și sunt disponibile laboratoarelor de toate nivelurile.
Din cauza absenței în seturi noastre standard tara de fagi pentru a diagnostica boli cauzate de enterobacterii patogene, unul dintre obiectivele cercetării noastre a fost izolarea și studierea proprietăților biologice de bază ale bacteriofagi, construcția acestor produse de diagnostic, precum și dezvoltarea metodelor de aplicare în practică a acestora.
Ca rezultat al probelor de studii de ape uzate, fecale de animale, apa, rezervoare deschise, materialul patologic de la viței și purcei de contact bolnavi și morți a fost izolat și au fost selectate peste 130 de izolate de bacteriofagi tulpinile litici patogene pentru om și animale enterobacterii următoarele genuri: Proteus, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, Providencia, specii: Yersiniaenterocolitica, Yersinia pseudotuberculosis, Morganella morganii și E. coli serogrup 0157 (serotip 0157: H7 și 0157N-). O căutare pentru noi izolate de fagi care sunt activi împotriva Pseudomonas genuri bacteriene, Aeromonas, Pasterella, Enterococcus, Serratia și colab. Reprezentanții sunt semnificație etiologic în patologia animalelor și pot provoca intoxicații alimentare la om.
Paisprezece tulpini promitatoare de fagi (Phagum Morganella morganii M17 UGSKHA - DEP Phagum Morganella morganii M20 UGSKHA. - DEP Phagum Escherichia coli 0157 E-61 UGSKHA. - DEP Pagum Escherichia coli 0157 E-67 UGSKHA. - DEP Phagum Citrobacter C și 61 UGSKHA. - . DEP Phagum Citrobacter C-66 UGSKHA- DEP, Phagum Citrobacter C-52 UGSKHA. - DEP Yersinia enterocolitica Y / 9 UGSKHA-DEP Phagum Proteus P-16 UGSKHA Phagum Proteus DEP-P-261-DEP UGSKHA Phagum EnterobacterEn .... -2 UGSKHA- DEP. Phagum Enterobacter En-13-UGSKHA DEP. Phagum KlebsiellaK-10 UGSKHA-DEP. Phagum Klebsiella K-81 UGSKHA-DEP.) depozitate în preparate veterinare VGNKI și sunt recomandate pentru fabricarea preparatelor diagnostice și terapeutice preventive.
Folosind specificitatea strictă a fagilor selectate, am dezvoltat metode pentru identificarea enterobacteriilor de mai sus, care permit să se definească genuri, specii și accesoriu chiar serogruppovuyu cultură de microorganisme izolate fără a studia proprietățile enzimatice și serologice în 48 de ore în loc de 5-7 zile, ceea ce reduce semnificativ timpul și costurile pentru studii de diagnosticare.
REZUMAT RNF este că, dacă este prezent în materialul căutat agentul cauzator, materialul adăugat la un astfel de fagi omoloage, care intră în contact cu ea, se multiplica rapid, iar creșterea ulterioară a concentrației de fagi extracelular liber indică prezența în patogen omolog substrat de test.
contactul RNF cu tehnica propusă seturi de fagi efectua o metodă de diagnosticare simplă, sensibilă și specifică ce permite o perioadă relativ scurtă (11-22 ore). Pentru a detecta bacteriile dorite într-o concentrație de 102-104 celule microbiene per 1 g (ml) din materialul de testat prezența microflorei străine, fără izolarea culturilor pure de enterobacterii. De regulă, o astfel de concentrație de microorganisme nu poate fi detectată printr-o metodă bacteriologică.
Din păcate, industria biologică a țării nu este în prezent produce instrumente specifice pentru prevenirea și tratamentul infecțiilor intestinale cauzate de enterobacterii sau procedura de mai sus, cu participarea lor (cu excepția vaccinurilor esherihioznyh și seruri), care reduc în mod semnificativ eficiența măsurilor de combatere a acestor boli.
Încercările separate de a folosi diferiți bacteriofagi în bolile animale infecțioase au fost întreprinse încă din anii 1920 și 1930. Dzrell (1928, 1935) a încercat să folosească fagii în pufferoza-tifos de pui. În legătură cu creșterea nivelului de rezistență a agenților patogeni la antibiotice și impactul negativ al acestora asupra organismului animal și prin alimentație umană, fagoterapia și fagoprofilaxia bolilor infecțioase au atras din nou atenția multor cercetători.
Prin urmare, dezvoltarea și fabricarea preparatelor fagice terapeutice și profilactice pentru nevoile veterinare devine din ce în ce mai relevantă pentru practică. Avantajul acestor fonduri este lor față de mediu, de siguranță, chiar și la doze mari, și nu are efecte adverse asupra animalelor (dysbacteriosis, reacții alergice, suprimarea funcțiilor sistemului imunitar). În același timp fagoprofilaktika phagotherapy și nu exclud utilizarea tratamentului simptomatic și seroprfilaktiki serotherapy, probiotice, terapia cu antibiotice, vaccinare, și întregul complex de sănătate animală și zoogigie - evenimente etnice.
În prezent, studiem posibilitatea utilizării bacteriofagilor pentru tratamentul și prevenirea bolilor gastrointestinale ale animalelor tinere, precum și eliminarea transportului bacterian latent. Cercetările științifice sunt în curs de elaborare a parametrilor tehnologici pentru obținerea și monitorizarea noilor biopreparate, selectarea dozelor, schemelor și metodelor optime pentru aplicarea lor.
Pentru aceste scopuri, folosim selectate sunt izolate și izolează ne fagii colecție de UGSKHA enterobacterii menționată anterior în diferite combinații, în funcție de etiologia bolii și sensibilitatea la ele a agenților patogeni identificați care circulă într-o anumită fermă.