Pentru formarea în domeniul diagnosticului de laborator al infecțiilor helminți este necesară pentru a studia morfologia helminților. Microscopists instruiți pe specimene proaspete și fixe. Produsele proaspete au avantajul ușurinței de fabricație a medicamentului, dar ele au, de asemenea, un dezavantaj considerabil: perioada de studiul lor este limitat. În plus, preparatele proaspete nu sunt întotdeauna suficient de clar dezvăluit unele detalii morfologice.
Preparatele microscopice permanente sunt preparate din helminths întregi de mici dimensiuni a părților individuale ale majore helminților și ouă de helminți. Preparatele permanente sunt vopsite și nevopsite, cu pre-fixare și nefixate.
Preparate permanente nevopsită, fără a comite
Astfel de formulări sunt preparate din segmente mari mature de cestode pentru a studia structura uterului umplut cu ouă.
fabricarea preparatelor Tehnica este după cum urmează. porțiunea de capăt strobila tenii bovină și porcină tenie sau larg este plasat în apă rece timp de 1-2 zile. Apa ar trebui să fie schimbat de 4-5 ori. În această perioadă, segmentele de reducere a spastice îndrepta, există unele macerare, ele devin moi și ușor de prelucrat în continuare. Apoi strobila taie cu foarfeca de-a lungul segmentelor compusului de delimitare. În segmentele de bovine și teniei carne de porc sunt separate unul câte unul, în timp ce tenia larg - 3-4 segment“. Disecarea ac fără a se deteriora.
La fabricarea de produse din segmente mature de îngrijire teniei de carne de porc ar trebui să fie luate pentru a monitoriza cu atenție că hexacanth nu a lovit pe mâinile sale. După manipularea acestor segmente ar trebui să fie bun să se spele pe mâini și se sterilizează toate ustensilele și instrumente.
segmentul de țesut, acestea sunt transferate pe o lamă de sticlă, plasate de-a lungul sticlei, îndreptați, se verifică dacă nu există bule de aer sub segmentul. Pentru a elimina bulele trebuie să-și petreacă pe segmentul acului, ținându-l paralel cu geamul și apăsând ușor în jos pe segmentul. Excesul de apă pe geamul din jurul îmbinării se îndepărtează cu hârtie de filtru.
Uscarea segmentelor are loc la temperatura camerei timp de 18-24 ore. Când segmentele uscate, ar trebui să fie de sticlă cu atenție șterse când urme de lichid uscat. Pe segmentele uscate trebuie să fie clar vizibilă structura uterului. Pentru a păstra produsele încorporate în balsamul. Pentru a face acest lucru pentru fiecare segment, care aderă la sticlă, este aplicată balsam lichid (canadian sau brad) si se aplica geamul de acoperire, mărimea care trebuie să corespundă dimensiunii medicamentului. Balsam usuca încet timp de 10-15 zile.
Preparatele permanente sunt fixe, nevopsită
Aceste medicamente sunt preparate din scoleces cestode mari din carne trihinelleznogo. Fixație scoleces cestode mari (teniile bovină sau porcină) sunt realizate simultan cu o ușoară comprimare.
Capul cestode izolate tăiate din strobila împreună cu o mică porțiune a colului uterin. Pentru prepararea de medicamente pot fi utilizate exteriorizată finlandezi, în acest caz, capsula este tăiată finlandezi. piese Scolexes 5-7 sunt plasate pe o lamelă de sticlă într-un rând, acoperit cu un alt diapozitiv de sticla, apăsați ușor în jos și fixați fir.
Sticlă cu scolex cufundat în 70 ° alcool, la 12-24 ore. Pe parcursul acestei perioade, fixarea și scolexes devin plate, bine fraier sunt vizibile, precum și cârlige pentru tenia de porc scolex. În cazul în care fixarea în alcool a făcut fără a apăsa capul psihiatru, acesta devine o formă rotundă și, după prelucrare ulterioară nu sunt victimizați. In astfel de formulări sunt cârlige sucker slab vizibile pe tenie trompă de porc situate aproape unul de altul.
Prin aceeași metodă, preparate din carne trihinelleznogo. Bucăți de țesut muscular, Trichinella larvele infectate, un ac de disecție este scindată a lungul cereale în particule mai mici. Bucăți de mușchi plasate pe o lamelă de sticlă acoperit cu un alt lamelă de sticlă și apăsați ușor în jos, apoi lega firul doi de sticlă și cufundat într-un „alcool 70 la 12-24 ore. Dacă mușchii de fixare mențineți fără a apăsa dintre geamuri, țesătura se contractă în alcool și droguri sunt rău larve de Trichinella vizibile.
La finalizarea fixării sticlei din bucăți de carne scolex și trihinelleznogo scoase din alcool, firul este dezlegat și suprafața de sticlă cu un ac de disecție cu atenție este scos și scolexes piese compactate tesut muscular in 70 de alcool. Deshidratarea este efectuată în alcooli cu creșterea rezistenței prin plasarea materialului de la 70 ° la 80 °, apoi la 96 ° și din nou la 96 ° alcool, înmuiere în fiecare 5 min. Transferarea de sticlă de cântărire în flacon de cântărire trebuie să fie efectuată cu atenție și să ia un ac de disecție sau penseta mici pentru marginea de o bucată de material, iar scolexes de captare capătul liber al gâtului.
După deshidratare în medicamente alcooli ar trebui să fie luminați. În acest scop, pregătirile efectuate în mod constant prin carbol-xilen, xilen și (compoziție xilen-carbol: 1 parte fenol și 3 părți xilen) din nou xilen. În aceste lichide preparate trebuie să fie nu mai mult de un minut fiecare. Apoi, droguri este un balsam pentru ceea ce sunt transferate pe o lamelă de sticlă într-o picătură aplicată pe acesta balsam și acoperit cu un capac de sticlă. Închideți geamul ar trebui să fie atent însumarea să renunțe la unghiul de balsam, pentru a evita formarea de bule de aer. Produsul finit se usuca în termen de 10-15 zile.
Preparate permanenți colorează fără prima fixare
Astfel de formulări sunt preparate din segmente largi ale cestodelor hermafrodite. Pre-preparate carmin lactic, care carmin 0,1-0,3 g se dizolvă în 100 ml de acid lactic 50%.
Tehnica de preparare a următoarelor medicamente. Partea strobila selectat helmintice constând din segmente hermafrodite, incubate în apa de la robinet timp de 1-3 zile și apoi plasat într-o carmin lactic pe 4-6-12 h. Durata unui colorant depinde de dimensiunea obiectului. Dacă strobilus subțire, este suficient pentru a menține vopseaua în 4-5 ore, în cazul în care strobilus groase (de exemplu, teniei bovină), atunci acesta trebuie să fie vopsite pentru un timp mai îndelungat.
După colorare strobilus trebuie bine spălate, pentru care vasul a fost plasat un tifon înnodat la strobila și transferată sub un curent de apă de la robinet. Tiflon în acest caz, este necesar, pentru ca jetul de apă nu se spală de droguri. Irigați nevoie de cel puțin o oră. La capătul foarfece strobila spălare tăiate în bucăți individuale de 2-3 în fiecare segment, repartizate pe lamele și lăsate să se usuce timp de 6-12 ore. Segmente uscate turnat balsam și acoperite cu o lamelă de acoperire.
Preparate fixate și colorate permanenți
Aceste medicamente sunt preparate din trematode sau cestode mici, precum și segmente largi ale cestodelor hermafrodite.
Pre-pregătit colorant - carmin acid clorhidric. Pentru a face acest lucru, luați 5 g de carmin, măcinat într-un mojar cu 5 ml de acid clorhidric și 5 ml de apă distilată. Temeinic amestecul pisate a fost lăsat timp de o oră. Apoi, mortarul carmin transferat într-un flacon și se adaugă la 200 ml de alcool de 90 °, amestecul a fost plasat într-o baie de apă până la carmin dizolvare completă, aproximativ 1 -. 1,5 ore în acest timp, o parte din alcool se evaporă, astfel încât s-a adăugat la sfârșitul dizolvării carmin la alcool flacon aceeași cetate la volumul inițial. carmin acid clorhidric stocat într-un recipient bine sigilate pentru o lungă perioadă de timp.
fixare Tehnica și colorarea preparatelor următoare. trematode verde sau cestode ținute în apă :. 3-4 h obiecte mici, mari -6-12 ore helminths apoi răspândit pe o lamă de sticlă, acoperite cu un alt fir și sticlă ligat. Formulările transferate la alcool 70 ° timp de 1-2 ore (obiecte mici) sau 6-12 ore (obiecte mari).
Prin fixarea helminți capăt cu atenție îndepărtat din sticlă și cufundat în acid clorhidric, pentru o perioadă de carmin de la 30 minute până la 1 oră, în funcție de dimensiunea obiectului.
Lectii din clorhidrici viermi carmin de acid vopsite în roșu intensiv. Pentru a elimina excesul de vopsea helminții și structura de detectare a pieselor transferate în alcool clorhidric (100 ml alcool de 80 ° a fost adăugat 2-3 picături de acid clorhidric) timp de 5-10 minute. Dupa ce devin testicule vizibile în mod clar, ovarelor și a altor detalii structurale, medicamentele sunt transferate într-un loc curat 80 ° alcool.
Pentru a deshidratării în continuare obiectele investigate este transferat într-un alcool de 96 °, schimbarea de două ori porțiuni. In Buxy cu alcooli viermi ar trebui să fie de cel puțin 5-7 minute. După aceea, obiectele deținute de carbol-xilen, și de două ori în xilen.
Sticla de cântărire cu obiecte de xilen trebuie să fie nu mai mult de 1-2 minute. Transferat de la alcool într-o sticlă de cântărire car- bol-xilen, helminților plutește la suprafață. Prin urmare, un ac de disecție sau penseta, trebuie să se scufunde în mod necesar la partea de jos a sticlei de cântărire. Ca urmare a helminților prin xileni este transferată pe o lamelă de sticlă, pe care sunt reprezentate grafic 1-2 picături balsamului. Medicament bun răspândire este aplicat pe partea superioară a încă 1-2 picături de balsam și lamelei delicat.
Prepararea medicamentelor regulate, prizonieri în glicerol-gelatină
Astfel de formulări sunt preparate din nematozi mici și trematodele. următoarea tehnologie de fabricație. helminths proaspăt plasat în apă timp de 3-4 ore pentru spălare. După aceea, nematodele sunt supuse prelucrării ulterioare, și gălbează având un corp plat trebuie presate și fixate în același mod cum este indicat în preparatele fixe secțiunea alimentare din trematode.
Nematodele și trematode spălate succesiv îndreptat realizate printr-un amestec de alcool și glicerol intensitate variabilă. amestecul menționat trebuie să fie pregătită în prealabil și depozitate într-un flacon cu dop bine.
le prepară conform următoarei rețete:
1 amestec -20 ml de 40 ° alcool și 2 ml de glicerol
A 2 "-20" 50 ° »și 5 ''
Treia "-20" 60 ° »și 6 ''
4a "- 20" ° 70 'și 10' '
In fiecare dintre amestecurile helminților de mai sus stau 24 h. Vasul cu acesta din urmă amestec după 24 de ore pentru a descoperi că alcoolul a fost evaporat. Atunci când cantitatea de lichid din vasul de cântărire este redusă cu o treime, viermi sunt aproape glicerina pură, în cazul în care au scos un exemplar pe o lamelă de sticlă. Cu hârtie sau tifon filtru“se îndepărtează cu grijă excesul de glicerină.
La helmint aplicat topită glicerină-gelatină îndreptat, cu grijă acoperită cu un capac de sticlă și ușor presat în jos. Dacă glicerol-gelatină acționat dincolo de geamul de acoperire, acesta este îndepărtat după ce se întărește. Excesul de glicerină-gelatină, se taie cu un aparat de ras sau bisturiu, glisează șters cu o cârpă umezită cu apă caldă. Pentru a preveni uscarea produsului și păstrați-l pentru o lungă perioadă de timp, marginile lamelei okantovyvayut balsam lichid.
Turnat 2 g de gelatină uscată 12 ml apă distilată și se lasă câteva ore până la atâta timp cât umfla gelatină. Apoi vasul cu gelatina umflată a fost plasată într-o baie de apă. Trebuie să se amestecă întotdeauna cu o baghetă de sticlă. După dizolvarea completă a gelatinei s-a adăugat la acesta 7 ml glicerină pură. Pentru a preveni dezvoltarea mucegaiului în topit glicerol-gelatină se adaugă câteva granule de fenol. Acesta a fost apoi filtrat prin două straturi de tifon. Glicerol-gelatină păstrează într-un vas închis ermetic. Înainte de utilizare, amestecul a fost topit într-o baie de apă.
Prepararea preparatelor permanente de ouă helmintice
Pentru prepararea preparatelor permanente proaspăt ouă nu sunt potrivite. Acestea trebuie să fie pre-înmuiate în glicerină. Suspendarea de ouă în listele de glicerol ar trebui să fie concentrată la un număr suficient de ouă a fost o mică picătură.
ouă helmintice produse în două moduri: a) izolate de viermi adulți ai uterului și b) sunt colectate din fecale folosind tehnici de îmbogățire.
Ouăle de viermi adulți recuperate din uter obtinerea unui ouă trematode, tenie bovine hexacanth, ouă de tenie late și oxiurilor. trematode Adult sau oxiuri, segmente mature de tenie bovine sau tenie larg plasate într-o sticlă de ceas mare. ace de disecție rupte regiune a uterului. Datorită porțiunii rupte a helmintului pipetă aplicat câteva picături de soluție salină pentru ouă de spălare. Lichid colectează la fundul sticlei. resturi helmintice aruncate.
După decantare la sticlă fund ceas ou care se realizează în 15-20 de minute, stratul de suprafață a lichidului a fost îndepărtat și la reziduu s-a adăugat o soluție apoasă de glicerină 50%, în care oul pentru producerea preparatelor păstrate timp de cel puțin 7-10 zile. Depozitarea lor în glicerină, pe o perioadă lungă de timp (luni sau chiar un an) nu afectează structura de ou.
ouă Whipworm, tenie șobolan, schistosomes, ouă nefertilizate de Ascaris colectate din fecalele persoanelor infectate cu o anumita forma de helmintice, folosind tehnici de îmbogățire (colectarea ouălor din film prin metoda Fyulleborna sau Kalantaryan). Astfel, oul obținut se spală de sare și se depozitează într-o soluție de glicerol 50%. Preparatele permanente nu pot fi preparate din ouă de Ancylostoma, trihostrongilid, teniei pitic, ouă roundworm fecundat.
C folosind chibrituri ascuțiți aplicat scop ouă picătură suspensie de fabricare a unui preparat permanent pe o lamelă de sticlă. Pentru încheierea glicerol-gelatină poate utiliza una din următoarele două moduri.
1. șlam picătură ou depus pe un diapozitiv, scăderea este coborâtă topită glicerol-gelatină și acoperite cu o lamelă de acoperire. Fluid sub sticlă trebuie să fie distribuite în mod egal.
2. Pe fișa de acoperire, care dețin un colț, o baghetă de sticlă acoperit cu strat uniform topit glicerol-gelatină. Apoi, această sticlă este alimentată la un unghi la suspensie ou picătură, situată pe o lamă de microscop și a redus cu blândețe. Ouă și glicerină-gelatină, ca și în cazul precedent, trebuie să fie uniform distribuite între panouri.
Trebuie amintit că glicerina-gelatina se intareste rapid, astfel încât orice manipulare este necesar să-l facă cât mai repede posibil.
Defecte majore care pot apărea în timpul fabricării preparatelor după cum urmează.
A. Glicerol-gelatină nu este ocupată în întregime spațiul dintre geamuri sau bulele de aer formate. Acest lucru se poate datora unei cantități mici de glicerină-gelatină luate. Adresa acest neajuns nu poate fi, este necesar să se facă un nou medicament.
B. Stick Glicerina-gelatină și să nu se răspândească între panouri. Într-un astfel de caz, un pic de sticlă încălzită pentru a topi gelatina, apoi se va răspândi între panouri.
B. La picătură de suspensie de ouă depuse prea mult glicerină-gelatină, și a mers dincolo de geamul de acoperire.
Medicamentul trebuie să fie verificate la microscop, iar dacă vorbind în afara de sticlă de gelatină-glicerină ouă de helminți fascinat și un capac de alunecare stânga lor, medicamentul trebuie să fie făcut din nou. Dacă, totuși, sub capacul alunecare un număr suficient de ouă rămase, apoi după gelatina se întărește, se îndepărtează excesul în același mod cum este descris în secțiunea anterioară.
În mod corespunzător medicament preparat ar trebui să fie după cum urmează: sticlă de acoperire aderă la obiectivul, glicerină-gelatină umple întregul spațiu între sticlă și nu iese dincolo de geamul de acoperire. Pentru a preveni uscarea medicamentului se okantovyvayut balsam lichid. Inscripția pe droguri specii de ouă de helminți etichetate sau de a face cerneala pe sticlă.
Pregătirea cerneală de sticlă
Se dizolvă 1 g de fucsină de bază în 15 ml de 96 ° alcool. Pentru o mai bună dizolvare amestecul menționat să stea pentru o zi într-un vas cu dop. Într-un alt balon se dizolvă 2 g de culoare tanin în 15 ml de apă distilată. Se dizolvă taninul ar trebui să fie sub încălzire ușoară în sus. Când tanin este complet dizolvată, soluția trebuie filtrată printr-un filtru de hârtie. Soluția răcită este turnată cu o soluție de cerneluri Tanin și magenta pregătit. Depozitați-le într-un recipient bine sigilat. Inscripții se poate face cu ușurință cu un pix subțire.