Miercuri - este o substanță solidă sau lichidă care conține substanțe nutritive pentru cultivare (creștere) a microorganismelor și a celulelor animale sau țesuturi vegetale. Cultura microbiana este setul de celule în creștere pe un mediu (sau mediu).
media solide și lichide
Microorganismele pot fi cultivate pe medii solide sau în medii lichide (bulion).
mediu solid
mediu solid este foarte potrivit pentru bacterii și ciuperci în creștere; acestea sunt preparate prin amestecarea unei soluții nutritiv lichid cu componenta de gelifiere (de obicei, agar), la o concentrație de 1-2%; acest lucru dă un agar nutritiv. Agar este un extract de alge roșii. La o concentrație de 2,1% agar topit la 90-100 ° C și se solidifică la aproximativ 44 ° C Agar poate fi pre-sterilizate prin încălzire și apoi se răcește. Microorganismele însămânțate pe suprafața de agar după solidificare sale, sau, în cazul în care acestea pot rezista la temperatura de aproximativ 44 ° C, se adaugă agarul imediat înainte de călire; apoi acestea sunt distribuite uniform în mediu. Agar este transparent și, ca o polizaharida complexă este rezistentă la degradare de către microorganisme; se referă la beneficiile sale. Exemple de utilizarea de lichid solid și vor fi prezentate în secțiunile următoare. Pe medii solide sunt uneori crescute și cultura țesuturilor vegetale.
fluide
Mediile lichide sunt adesea folosite pentru a studia creșterea populației. Celulele au fost plasate într-un tub închis cu un dop de bumbac sau un capac metalic sau într-un flacon de sticlă cu capac cu filet, cum ar fi un vas de McCartney universal în care mediul de aproximativ 25 cm3 - doar pentru a umple o cana. Înainte ca mediul este utilizat pentru cultivarea culturilor de celule, trebuie sterilizate. Adăugarea unei mici cantități de celule într-un mediu se numește însămânțare (sau inoculare). După inoculare, mediul este lăsat într-un cuptor la temperatura optimă pentru creșterea microorganismului. Celulele în creștere au fost distribuite între aleatoriu.
Dacă utilizați volume mari de mediu de cultură se agită pentru a preveni sedimentarea celulelor. În acest scop, utilizați agitator mecanic sau agitator magnetic. In plus, aerul steril este trecut prin mediu pentru a asigura menținerea concentrației optime de oxigen în tot mediul înconjurător. Pentru filtrarea aerului și sterilizarea folosind filtre sau filtre de sticlă sau vată non-absorbant disponibile în comerț. Aerul intră prin nebulizator - un dispozitiv cu o multitudine de găuri mici, ceea ce permite obținerea de vezicule perfecte. Acesta este atașat la capătul tubului care merge la fundul vasului cu cultura. Cultura lichidă pot fi cultivate ca culturi discontinue sau culturi continue.
mediu îmbogățit și selectiv
mediu imbogatit - un componente de mediu, care sunt compuse în așa fel încât să răspundă cel mai bine nevoilor anumitor microorganisme; asigurând astfel o creștere preferată în raport cu cealaltă. Atunci când se face un mediu de cultură mixtă, care este cel mai frecvent izolat din „natura“, creste in general, mai ales unul sau mai multe tipuri de microorganisme. Folosind un mediu adecvat, puteți crește în mod selectiv microorganismul dorit. Prin condiții schimbătoare, cum ar fi temperatura, pH-ul, sursa de carbon si sursa de energie, este posibil să se selecteze o combinație care se potrivește cel mai bine un anumit organism. De exemplu, bacteriile din genul Salmonella, agentul cauzal al febrei tifoide (Salmonella typhi), izolat și identificat prin plasarea alimentelor în probele de fecale sau medii> „care conțin derivați de seleniu (seleniu - un element asemănător cu sulf în proprietăți). enterobacteriilor obișnuite, cum ar fi E mînz, care pot fi de asemenea prezente în materiile fecale, seleniu suprimat. Cultura Îmbogățit - una dintre cele mai puternice instrumente folosite de microbiologi pentru izolarea microorganismelor.
mediu selectiv - un mediu în care substanțele adăugate care inhibă creșterea tuturor organismelor, cu excepția uneia sau mai multora. Un exemplu este adăugarea penicilinei la cultura de selecție a organismelor rezistente la acestea, sau selecția celulelor hibride în producerea de anticorpi monoclonali.
indicator de mediu
Mediul indicator cuprinde un indicator care vă permite să distingă vizual una din celelalte organisme. De exemplu, anumite bacterii sunt distruse ( „fermentate“) lactoză zahăr la acid. In mediul, cunoscut sub numele de agar McConkey, care conține un indicator de pH săruri biliare și roșii neutre, coloniile, fermentează lactoza vor apărea roșii în loc să fermenteze lactoza - roz pal sau incolor. Această metodă se utilizează, de exemplu, pentru a identifica contaminarea apei potabile de canalizare. Apa reziduală conține bacterii intestinale, cum ar fi E. coli, care fermentează lactoza. În mod similar, în cazul în care eșantionul de bacterii intestinale ale Salmonella este prezentă, atunci agarul McConkey se va forma colonii incolore.
mediu gata
mediu uscat. conținând agar și toate componentele necesare sunt disponibile în comerț. De obicei, acestea sunt păstrate timp de 15 minute în apă și apoi să se sterilizeze, autoclavizate în flacoane sau fiole timp de 15 min la 121 ° C In timpul mediu autoclavare se agită și se dizolvă. In interiorul autoclavă sub presiune de apă clocotită. Autoclava se închide cu un capac cu o supapă de siguranță, care produce abur când se atinge presiunea necesară. Cu cât presiunea, cu cât punctul de fierbere al apei. Astfel de soluții și echipamente, cum ar fi sticlărie sterilizate. Pentru a ucide toate bacteriile și sporii lor rezistente, de obicei, suficientă pentru 15-20 de minute de incubare la o presiune de 103 kPa (kN / m2). La această presiune, temperatura din interiorul autoclavei a atins 121 ° C,