Knowledgebase
Prin transplantul de embrioni de bovine a achiziționat recent bovine considerabile popularitate SREDIPROIZVODITELEY de lapte și de carne de vită. Cele mai tehnologii utilizate de transplant de embrioni a fost dezvoltat în anii 1970 și 1980, cu toate acestea, povestea acestei metode se duce înapoi într-o perioadă anterioară.
transferul de embrioni ISTORICUL
Transplantul Embryo a fost realizată mai întâi și descrisă de Walter Heep în 1890. El a transplantat embrionul doi iepuri Angora iepuri gestante rasa belgian și a primit un așternut mixt de iepuri din ambele rase. Experimentele privind transferul de embrioni la animalele mari de fermă a început în anii 1930, în oi și capre. Primul transfer de embrioni de succes la bovine și porcine au fost realizate în 1950 de Jim Rawson din Cambridge, Anglia
Primul transfer de embrioni comerciale au fost efectuate la începutul anilor 1970. Inițial, embrionii sunt eliminate de la donator și primitor se așează în jos folosind metoda chirurgicală. Acest lucru a durat până la sfârșitul anilor 1970, nu a fost încă dezvoltată metoda non-chirurgicale de transfer de embrioni și popularitatea a crescut în mod dramatic.
DE CE CONSIDERĂ transplantul de embrioni de bovine?
Pentru reproducere potențial vițel kazhdogonovorozhdonnogo este foarte mare. Se estimează la 150 de mii de ouă la femele și a spermei produse de miliarde de fiecare sex masculin. Atunci când reproducerea naturală poate fi pusă în aplicare doar o parte din potențialul reproductiv al indivizilor restante. Producătorul mediu taur în împerechere naturală în turma poate produce de la 15 la 50 de viței pe an.
Cu inseminare artificială, a fost posibil să se utilizeze o cantitate foarte mare de sperma produs de taur perfectă genetic, dar potențialul reproductiv feminin rămâne în mare parte neexploatat.
Vaca produce o medie de la 8 la 10 viței pe tot parcursul vieții. La fel ca și inseminare artificială creat pentru tauri, transplantul de embrion este o metodă care poate crește prepararea unui număr mare de descendenți ai vaci genetic extrem de valoroase.
CUM ESTE BOVINE Embryo?
Astăzi aproape toate transferul de embrioni comerciale se realizează metoda non-chirurgicale. Procedeul constă din mai multe etape și necesită costuri materiale semnificative și de timp.
1. Selectarea vacilor donatoare. Primul pas în implementarea metodei de transfer de embrioni este selectarea vacilor donatoare. Profesioniștii care lucrează cu bovine, nu sunt de acord cu privire la criteriile de selecție a vacilor restante genetic.
Cu toate acestea, cel mai mult este de acord că principalul criteriu ar trebui să fie valoarea potențială primită de viței. După cum vom vedea mai târziu, în scopul de a realiza un transfer de embrioni de succes și primirea de sarcină necesită costuri considerabile.
Astfel, prețul de vânzare al unui nou-născut vițel-grefei ar trebui să fie suficient pentru a justifica costul suplimentar al acestei proceduri de mare. Alegerea unui donator in randul vacilor de lapte este mai ușor datorită evaluării producției sale de lapte, comparativ cu bovine de carne de vită.
Cu toate acestea, transplantul de embrioni nu este un panaceu pentru a rezolva toate problemele. Acesta nu va face un bun bovine și bovine medie, cel mai bun. Metoda de transplant este potrivit pentru un număr limitat de persoane de carne de vită sau de vaci de lapte, care poate deveni amelioratori de rasă, una sau mai multe din punct de vedere economic importante trăsături.
2. vacile donatoare superovulate. Inducerea superovulație la vaci este următorul pas în procesul de transfer de embrioni. Sub superovulație înțeles alocarea pluralitate de ouă de la ovare la vaca in timpul audio călduri. Supusă la un tratament adecvat al hormonului de vacă sau junincă este în măsură să ofere până la 10 și mai viabile ovocitelor pe călduri.
Aproximativ 85% dintre donatori cu capacitate normala de reproducere superovulyatsionnuyu răspunde la tratamentul hormonal, in medie, cinci embrioni adecvate pentru transplant. Unele vaci superovulyatsionnyh cu tratamente repetate cu intervale de 60 de zile poate avea o ușoară reducere a numărului de nuclee cu timpul.
Principiul de bază este de a stimula superovulatia creșterea foliculului ovarian, folosind medicamente hormonale cu activitatea foliculostimulant. Medicamente cu vaca activitate foliculostimulant administrată de două ori pe zi timp de 4 zile, în a doua jumătate a ciclului estral, perioada de activitate funcțională a corpului galben ovarian.
In a treia zi de tratament foliculostimulant vaca hormon de injectat cu o prostaglandină care cauzează resorbția corpus luteum și exprimarea estrul aproximativ 48 - 60 de ore după injectare.
3. inseminare de vaci. Atunci când superovulație dintr-o varietate de foliculi ovarieni este alocată o mulțime de ouă pentru mai mult timp decât în calduri normal și în această situație trebuie să fie sigur că un număr suficient de spermatozoizi viabile ajunge la locul de fertilizare in oviductele femela.
Prin urmare, mulți experți în transferul de embrioni practicat mai multe inseminari in timpul calduri de la donatori de inseminare. Una dintre cele mai eficiente sisteme de inseminare include donator de vaci 12, 24 și 36 de ore după începerea vânătoare.
Utilizarea de semințe de înaltă calitate, cu procent mare de spermatozoizi cu motilitate normală este un moment foarte important în procesul de embriotransplantatsii. Locul cel mai optim este introducerea corpului de semințe al uterului. corp uterin este o mică parte din vaca tractului genital, localizat imediat anterioara la nivelul colului uterin. Când sămânța este introdusă adânc într-una dintre coarnele uterine, fertilizarea poate scadea daca ovulatia apare pe ovar opus.
4. Eluarea embrionilor. Colecta embrioni Metoda nechirurgical se efectuează cu ajutorul unui cateter de cauciuc, care este introdus prin colul uterin uterului de vaca donatoare. Prin acest cateter este introdus în cavitatea uterină fluide fiziologice speciale, și apoi pompat înapoi, împreună cu embrioni.
Dezalcalinizarea embrionilor se efectuează de obicei la 7-8 zile de la donator inseminare. Această colecție embrionilor procedura este relativ simplă și poate fi efectuată în termen de 30 de minute și chiar mai repede, fără a provoca efecte nefaste asupra animalului.
stylet steril plasat în lumenul cateterului pentru a conferi rigiditate la trecerea prin colul uterin in corpul uterin. Când vârful cateterului este în corpul uterului, manșeta este umplut lent cu aproximativ 2 ml de ser fiziologic.
Cateterul a fost apoi tras ușor, astfel încât manșeta a fost localizat în interiorul canalului cervical. Apoi, lichidul suplimentar manșetă alimentat pentru a sigila complet peretele cateterului exterior cu peretele interior al canalului cervical.
Apoi, capătul exterior al cateterului este atașat ștuțuri de racord în formă de Y pentru intrare și ieșire de fluid. Pentru fiecare dintre tuburile este clemă fixă pentru reglarea debitului de lichid de spălare. Secvențial lichid adăugate și îndepărtate prin gravitație prin gravitație (prin metoda picurator).
Lichidul din uter agitat manual prin peretele rectului, o atenție deosebită este acordată treimea superioară a cornului uterin. Când cornul uterin umplut cu un lichid pentru a spăla embrionii, are un volum mare în ziua a 40-a sarcinii.
Pentru fiecare 1 litru de lichid de spălare uzat donatorului. Unii operatori folosesc un volum mai mic și se spală cu un corn al uterului la un moment dat. Fiecare corn uterin umplut și golit de la cinci până la zece ori cu 30 - 200 ml de lichid de fiecare dată, în funcție de mărimea uterului. Lichid spălat cu embrioni este plasat într-un cilindru gradat de mare.
După aproximativ 30 de minute, embrionii sunt depuse pe fundul cilindrului și straturile superioare după drenarea lichidului pot fi plasate sub un stereomicroscop pentru izolarea și evaluarea.
5. embrioni de evaluare. În cazul în care embrionii individuali se găsesc sub microscop, acestea sunt evaluate pe o scală de 4 puncte, pentru a avea o șansă de succes în transplantare-le într-un recipient de sex feminin. Pentru a evalua embrionii, următoarele criterii de bază:
- forma embrionului;
- blastomeres compactitatea (proliferante celule) în domeniul de aplicare al embrionului;
- size diferență blastomer;
- culoarea și structura citoplasmei (fluid celular interior) blastomeres;
- diametrul exterior al embrionului;
- disponibilitatea blastomeres nedezvoltate sau moarte;
- integritatea și forma de protecție stratului zonei de proteină polizaharidă care înconjoară embrionul unicelular;
- prezența structurilor veziculoase în citoplasmă blastomeres.
În conformitate cu aceste criterii, embrionii sunt evaluate ca:
Prima clasa - calitate excelentă și de bună;
Gradul 2 - calitate satisfăcătoare;
Treia clasă - slabă calitate;
clasa a 4-a - embrioni morți și degenerați.
De asemenea, embrionii evaluate de etape, fiecare dintre care are de asemenea un număr:
Etapa 1 - ovocit nefertilizat;
2 trepte - de la 2 la 12 blastomeres;
Etapa 3 - morula timpuriu;
Etapa 4 - morula;
Etapa 5 - blastocist timpuriu;
Etapa 6 - blastocist;
Etapa 7 - extins blastocist;
Etapa 8 - blastocist hașurată;
Etapa 9 - Expanded blastocist hașurată.
Nu au existat diferențe semnificative în nivelul de sarcină, atunci când transplantare embrionii de diferite stadii de dezvoltare, cu condiția ca destinatarul va fi o etapă corespunzătoare a ciclului estral. Embrionii 4.5 și 6 etape de dezvoltare după trecerea proceselor de înghețare și dezghețare rămâne cea mai mare viabilitate.
calitatea embrionilor este, de asemenea, esențială pentru supraviețuirea după procedurile de înghețare și dezghețare. Se crede că numai potrivit pentru congelare embrioni 1 clasa. Embrionii Gradul 2 poate fi, de asemenea, expus la inghet, dar nivelul de sarcină în timpul acestor embrioni de transplant, de obicei, reduse.
6. Selectarea și instruirea beneficiarilor de sex feminin.
Gestionarea corectă a beneficiarilor turmei este un element cheie pentru un transfer de embrioni de succes. Vacile care nu au probleme cu reproducerea, și la care au fost fatare ușor - sunt destinatarii adecvați. Pentru ca acestea să fie preluat de un regim alimentar special, care ar oferi belșugul corp de 6 puncte pentru bovine de carne de vită și 3-4 puncte pentru vacile de lapte.
Aceste vaci ar trebui, de asemenea, provin dintr-un efectiv sănătos. Se pune întrebarea: „Cum lung destinatarul?“. Setați embrioperesadok numărul mediu pe donator destul de dificil an. Diferențele pot fi mare, dar dacă faci embrioni de eliminare de la un donator la fiecare 90 de zile pe parcursul anului, cu un scor de 5 sarcini în leșiere, în cursul anului, puteți obține 20 de sarcini la donator. Unii donatori vaci pot da până la 50 de sarcini pe an.
Pentru a obține rata maximă de supraviețuire a embrionilor pentru transplant, tractul reproductiv al destinatarului trebuie, cât mai precis posibil corespund stării tractului reproductiv al donatorului: este necesară sincronizarea ciclului reproductiv al donatorului și a primitorului, la un moment dat.
Acest lucru este utilizat de obicei, preparatele prin injectare de prostaglandine. Această tehnică crește probabilitatea ca în perioada de destinatar embriotransplantatsii va fi în aceeași etapă a ciclului sexual ca un donator. În timpul manifestărilor calduri și vaci de vânătoare ar trebui să fie inseminate donatori. De obicei, un transplant de embrioni destinatar produsă în a șaptea zi după inseminare donatorului.
Metoda de sincronizare ar fi eficientă într-un animal care are ciclicitatea sexuale normale. Vaci sau juninci nu prezintă un ciclu sexual, precum și o scurtă perioadă foarte subțire sau foarte gras sau având după fătare (mai puțin de 1,5 luni) nu trebuie să fie utilizate ca destinatari.
7. embrioni de transplant. Primul lucru pe care este necesar pentru punerea în aplicare a embrionilor transfera embrionul destinatar este plasat într-un pai pentru inseminare artificială. Această operațiune se efectuează sub supraveghere prin intermediul unui microscop cu o seringă într-un volum de 1 ml. Acest lucru necesită o anumită practică, răbdare și îndemânare.
embrioni degenerați și embrioni de proastă calitate nu ar trebui sa fie folosite pentru transplant. Imediat înainte de transplant destinatar ovare embrion intrarectal palpate pentru a determina locul ovulația.
Instrumentul pentru transferul de embrioni este, de asemenea, introdus ca în inseminare artificială în gât uterin al destinatarului. Apoi, vârful sculei progresează în cornul uterin, pe latura care ovulația a avut loc în ovar. În același timp, trebuie să acționăm foarte atent, pentru a nu deteriora mucoasa cornului uterin. Apoi, împingând pistonul seringii pentru transplant, embrionul este expulzat din paie în coarnele uterului. Instrumentul de asemenea derivat cu precizie din tractul genital.
Trebuie amintit că prejudiciul a membranei mucoase a uterului poate reduce semnificativ rata de supraviețuire a embrionilor. Pentru a reduce riscul uterin proceselor de vătămare mucoasa solubilizării și transferul de embrioni sunt efectuate după anestezia epidurală, care permite blocarea reducerea rectului.
Embrionii pot fi transplantate imediat după extragerea lor de la donator și de evaluare, sau pot fi înghețate și păstrate pentru depozitare în azot lichid până la următorul transplant. Procesele de congelare și decongelare este foarte complex și nu este sigur pentru viabilitatea embrionului și, prin urmare, rezultatele unei sarcini de transplanturi de embrioni congelați sunt de obicei mai mici cu 10-20% în comparație cu rezultatele transplantului de embrioni proaspeți.
embrioni congelati ar trebui să fie etichetate în mod corespunzător. Ei au folosit pentru a vinde în mod frecvent.
8. embrioperesadki cost. Valoarea embrioperesadki poate fluctua în funcție de mai mulți factori. Unii specialiști embrioperesadkam efectuează transplanturi numai la fermele care donator.
Unii experți au capacitatea de a transporta și plasarea donatorilor și primitorilor într-un punct-laborator special echipat. Mulți experți au echipamente și experiența de congelarea embrionilor pentru depozitarea lor ulterioară sau trimise la alte locuri.
Costul minim al sarcinii prin transfer de embrioni este de 250 $. Acest cost nu poate include costul de inducție a superovulatia, și, desigur, costul de inseminare, înregistrare și eliberarea certificatului de transplant, identificarea genetică a animalelor și a altor accesorii.
Trei - cinci paie de semințe de mare valoare poate costa oriunde de la 45-500 de dolari. nutriție adecvată, de întreținere a sănătății, precum și sincronizarea donator și receptor poate crește, de asemenea, valoarea fiecărei embrioperesadki de succes. Prin urmare, valoarea obținută din embrioperesadki de vițel va fi semnificativ mai mare decât de la inseminare. Dar întoarcerea de la animale obținute prin embriotransplantatsii (în termeni de eficiență) pot fi, de asemenea, mare.
AT Shmarov, Ch. Departamentul de Comitetul de specialitate veterinare AIC și PR armelor nucleare.
