Metode de studii histologice ale celulelor și țesuturilor

Histologică și cercetarea embriologice sunt indisolubil legate, și această metodă. Cel mai adesea în aceste studii au folosit un microscop cu lumină. De asemenea, microscop cu lumină convențională în microscoape Histologie și Embriologie sunt utilizate în scopuri speciale:
  • contrast de fază;
  • interferență;
  • microscop cu condensator darkfield;
  • luminiscentă sau fluorescente;
  • polarizare.
    contrast de fază și microscoape de interferență cu un condensator câmpuri întunecate pentru a studia celule și țesuturi necolorate. microscoape fluorescente sunt folosite pentru a studia luminescenta naturale și artificiale de celule și țesuturi. microscoape polarizante sunt concepute pentru a studia ultrastructura celulelor cu o structură legitimă, regulată. Electronice și raster utilizate pentru a studia ultrastructura celulelor. microscoape Stereoscan da o imagine tridimensională a obiectului de cercetare.

    Metoda destul de comună în histologie atunci când se analizează în ansamblu, obiecte nedivizate, și ei înșiși sunt total de droguri. Prin medicament totală pot fi alocate sânge, limfă, celulele embrionare, stadii de dezvoltare a embrionilor, plantelor film subțire și țesuturi de origine animală.

    Pentru acest studiu este necesară majoritatea obiectelor în lumina luminii transmise că acestea erau subțiri, clare și contrastant. Pentru a face un obiect subțire, acesta trebuie să fie tăiate în plăci subțiri, care sunt numite secțiunile histologice. Așa că obiectul a păstrat structura in vivo cât posibil, este fixat, și pentru a face un contrast, folosiți această metodă.

    Metoda de preparate permanente fixate și colorate

    Această metodă este primar sau clasic. Pentru studiile instalației de fabricare a lichidelor de reținere progruzhat care denature și stabilizarea proteinelor și anumite structura compusului care trebuie investigat. Cel mai frecvent fixativul este formol. El sews proteine ​​prin poduri de metilen, provocând denaturarea lor. După fixarea și spălarea în apă a obiectului de studiu pot fi tăiate în plăci subțiri, pre-congelare într-un microtom special de congelare # 151 dispozitiv, care este fabricat folosind secțiuni histologice. Pentru a bloca un obiect de multe ori utilizarea de dioxid de carbon lichid sau instalație elektrozamorazhivayuschuyu. Cu toate acestea, cu această metodă de material de prelucrare preparate secțiuni destul de groase histologice. Pentru fabricarea felii subțiri la 2 microni grosime, obiectul de cercetare este necesară pentru a impregna materialul care ar face mai dens. Astfel de materiale sunt parafină, gelatină și celloidin. Obiect după fixare și spălare sunt imersate secvențial în concentrații crescătoare de alcool # 151 50 la 100 de grade pentru Deshidratarea sale și impregnate cu gelatină, ceară sau celloidin. După impregnare și etanșarea obiectului poate fi tăiată pe un microtom.
    Secțiunile histologice au fost apoi colorate cu coloranți special selectate, dintre care majoritatea petelor selectiv componentele structurale ale celulelor și țesuturilor. Toate vopselele pot fi împărțite în trei grupe:
  • alcalin. sau nuclear. Aceste celule se colorează nucleu, iar o altă structură având o reacție acidă, cum ar fi reticulul endoplasmatic. Un exemplu coloranți alcalini pot fi Hematoxylin, carmin, Șofranină;
  • acru. sau citoplasmatică care colorează citoplasmă celulelor. Cele mai frecvente sunt coloranții acizi eozină, acidul picric, acidul fucsină, indigo carmin;
  • Speciale # 151 colorează selectiv componentele structurale ale celulelor sau natura chimică specifică a substanței. Cele mai comune coloranți pentru scopuri speciale sunt sudan III, acid osmielovaya, grăsimi și substanțe colorante grase cum ar fi; orsein, elastină colorare.
    După colorarea secțiunilor histologice au fost rapid deshidratate în alcooli, ilumina în xilen sau toluen, transferat într-un diapozitiv, se toarnă un strat subțire de balsamului canadian sau polistiren și acoperite cu o lamelă de acoperire. Balsamurilor, polistiren și sticlă au același indice de refracție și razele de lumină sunt împrăștiate minimal, care trece prin droguri.

    Metoda in vivo sau celule de colorare vitale și țesuturi

    animale experimentale in fluxul sanguin sau injectat în cavitatea peritoneală Coloranții și apoi examinate localizarea lor în celule și țesuturi. Prin urmare, folosind această metodă, structura examinată în celulele vii și studia procesele metabolice ale acestora. Cele mai frecvente sunt vitale colorant albastru tripan, roșu neutru, albastru de Nil, sunt utilizate în diluții mari # 151 1. 1000 sau mai mult.

    Metodă de fabricare a preparatelor temporare

    Avantajul agenților temporari ai constantei este viteza de producție a acestora și posibilitatea de a observa celulele vii si tesuturi. Preparatele temporare sunt realizate din frotiu, frotiu, filme subțiri sau obiecte divizate prin întindere pereții organelor cavitare. Obiectele considerând o picătură de apă sau soluție salină sau în vrac sau nuanțare-le soluții slabe de coloranți vitali.

    Metoda de cultură tisulară

    Este de mare importanță în studiul histogeneză embrionare si regenerarea transplantului de țesut. Utilizate pe scară largă în histologie și embriologie. Esența acestei metode constă în faptul că celulele individuale ale anumitor țesuturi izolate în condiții sterile și cultivate într-un mediu de cultură, care constă din mai multe componente, care sunt necesare pentru activitatea celulară. Celulele au fost cultivate într-un animal cu sânge cald un incubator la temperatura corpului, și cu sânge rece # 151 la temperatura camerei. din timp în timp, celulele au fost trecute la un mediu proaspăt și utilizat de mai mulți ani pentru experimente.

    Folosit pentru experimente pe celule, țesuturi și embrioni în histologie și embriologie. Prin intermediul unor astfel de micro-operații pot fi izolate, de exemplu, dintr-un țesut singură celulă, se scoate din nucleul celulei, nucleul transferat de la o celulă la alta sau de a muta o parte din celule de embrion diviza blastomeres fragmenteaza oua. Toate aceste experimente sunt efectuate cu ajutorul unui dispozitiv numit un micromanipulator. Structura acestui instrument cuprinde un microscop, un sistem de pârghii cu diferite grade de control neted. Pentru a vă alătura manetele unelte miniaturale: capilare de sticlă, ace, cârlige.

    S-au găsit o substanță marcată cu izotopi radioactivi. Această metodă se numește metoda de cercetare histochimic sau citochimic.

    Metoda de electroni studiu microscopic

    Studiul de droguri cu ajutorul unui microscop electronic. La microscop electronic fasciculul de lumină este folosit în loc de un fascicul de electroni care se deplasează într-un vid, în locul pieselor optice # 151 câmpuri magnetice, electronii in loc de ochi cad pe ecran fluorescent sau o placă fotografică. O creștere directă în microscopul electronic atinge 600 mii. Times.

    articole similare