Clostridium botulinum
C. botulinum - agentul cauzator de botulism, prima dată descrisă de E. Van Ermengemom în 1896
Morfologie și Fiziologie
Bacteriile de dimensiuni diferite, cu flagellum peritrichous. Se formeaza spori, care se atașează la tipul de celule bacteriene de rachete de tenis. Capsulele au pronunțat. Rasa pe agar de sânge de glucoză, formând colonii mici, translucide cu o margini netede sau zimtate, înconjurate de o zonă de hemoliză. În medii lichide observat turbiditate uniformă și sedimente. Proprietățile saccarolitic sunt instabile și nu sunt utilizate pentru identificarea acestor bacterii. Prin proprietăți proteolitice nu sunt uniforme. tulpinile proteolitice hidrolizează cazeină, pentru a forma H2S.
View C.botulinum omogena a toxinelor cu specificitate generate antigenice. Recente împărțit în 7 serotipuri A, B, C, etc. Studiul structurii antigenice a celulelor bacteriene datorită patogenezei specifice nu se efectuează atunci când identificarea botulism patogen.
Patogenitate și patogeneza
Patogenitatea Clostridium botulinum toxina asociată, fiind otrava cel mai puternic, din care 1 g poate ucide un adult. Exotoxină este o neurotoxină. Ca multe alte exotoxine este alcătuită din două subunități, dintre care unul este responsabil pentru adsorbția la receptorii de celule sensibile - neuroni, celălalt - pentru intrarea lor de către endocitoză și dezvoltarea unor evenimente ulterioare. Recente constau în inhibiția Ca-dependentă a eliberării de acetilcolină, blocându-se astfel transmiterea impulsului nervos prin sinapse. Acest lucru duce la înfrângerea centrelor bulbar nervoase, tulburări de mers, viziune, asfixie și alte fenomene. Decesele de până la 60%. Formarea toxina botulinică este controlată de pro-fagului cu bacterii de date lysogenization si genele C.botulinum. După contactul cu răni poate să apară botulismul Clostridium rănii. In acest caz, celulele vegetative produc o neurotoxină, cauzând imagine de intoxicații alimentare. Copii 3-8 luni. botulismul Viața apare ca rezultat al penetrării livrărilor Clostridium prin cordonul ombilical. Boala continuă sluggishly datorită aportului unei cantități mici dintr-o toxină. Este cauza morții subite infantile.
Imunitatea post-infecțioasă este absent. Acest lucru se datorează proprietăților imunogene slabe ale botulinum ekzotoksina.Ekologiya și epidemiologie. habitat natural C. botulinum este intestinele multor predominant erbivore, precum și pește, crustacee, moluște, în cazul în care se înmulțesc și se elimină prin fecale în mediul înconjurător. spori Clostridium botulinum în număr mare se găsesc în sol, apă, noroi. Ele sunt rezistente la temperaturi ridicate, și se păstrează la fierbere timp de 1-5 h. Infectarea se produce traseu alimentar. Cauza de otrăvire este consumul de pește, legume, conserve de carne și alte produse alimentare, cum ar fi conserve de la domiciliu.
Botulismul - intoxicație severă, de multe ori fatale, care apare ca urmare a utilizării produselor care conțin toxine Clostridium botulinum, însoțite de leziuni specifice ale sistemului nervos, în special ale nervilor-lingvistice laringian și oculomotori nuclee. Uneori se dezvolta boala dupa rani infectie botulizma.S clostridium botulinum produce toxine puternice 8 tipuri: A, B, C C2, D, E, F, G, caracterizate prin specificitate de antigen, care trebuie luate în considerare la efectuarea diagnosticului de laborator și tratament. Botulism la om cauza de tip A, B, E și F, tip C și D - la mamifere și păsări. Patogenitatea de tip G pentru oameni și animale dokazana.Osnovnym rezervor și sursa de infecție într-o natură cu sânge cald erbivorelor, intestin care Clostridia multiplica si fecale în cantități mari în sol și vodu.Zabolevanie apare atunci când este consumată în alimentele de carne, pește și altele, preferabil cositorit produse, care se acumulează în Clostridium botulinum și toxina acesteia. alimente conservate sunt de casă periculoase, în special în diagnosticul griby.Laboratornaya de toxina botulism are ca scop identificarea materialelor prelevate de la pacienți, precum și produsele alimentare care a cauzat otrăvire. Formularea toxina este determinată de bioanaliză și determină tipul acestuia în reacția de neutralizare. Mult mai puțin frecvent izolat patogen cultură pură și testele serologice se efectuează.
Materialul este luat
In toate cazurile de boli cu simptome de botulism la pacienții trebuie să ia apele de spălare ale stomacului, voma, sânge, fecale, urina, din organism - conținutul stomacului și intestinelor, ganglionii limfatici, feliile de ficat, creier și măduva spinării. Este necesar să se analizeze și reziduurile suspecte pischi.Krov pacientul să ia o cantitate de 10 ml, înainte de administrarea de tub botulinum seruri terapeutice cu citrat de sodiu într-un raport de 3: 1. spălături gastrice, vomă (100-200 ml) și un scaun (50-60 g) au fost plasate în borcane de sticlă cu dop de cauciuc. substanța nu poate adăuga conservanți. Atunci când se iau secționat materialul 50-60 g fiecare organ a fost plasat într-un borcan separat. reziduurile alimentare 200-300 materiale selectate g.Plotnye triturate întâi într-un mojar, se face de două ori volumul de fosfat izotonică sau soluție de gelatină și se lasă la temperatura camerei timp de 2 ore pentru extracția toxinei. Extractul a fost centrifugat, supernatantul a fost utilizat pentru livrarea probei biologice. Sângele este introdus fără nici o obrabotki.Proby livrate la laborator testate simultan în două direcții: 1) pentru detectarea toxina botulinica, 2) pentru a izola C. botulinum. În același timp, în aceleași probe viyalyayut și C. perfringens.
Detectarea toxinei botulinice
Disponibilitatea toxinei botulinice în materialul și determinarea tipului său se realizează prin neutralizare cu șoareci albi. În acest scop, selectat perechile 5 șoareci cântărind 16-18 g pe fiecare eșantion. Utilizarea de diagnosticare de reacție (nelikuvalni!) Antitoxică tipuri de ser botulinică A, B, E, F, care se diluează cu clorură de sodiu 0,85% până la 100-200 UI / ml, ceea ce asigură neutralizarea toxinei omoloage în materialul de testat sau livrat probe.Tsentrifugat sângele pacientului este turnată în 1,4 ml de 5 tuburi. In primele patru dintre ele fac tipurile A, B, E și F. În ultimul tub s-a adăugat 0,6 ml de ser normal 0,6 ml, respectiv (200 UI / ml) ser antitoxină protibotulinovih. Toate tuburile au fost incubate timp de 40 minute la temperatura camerei, pentru a neutraliza toxina. Prin ml 1st din fiecare eprubetă se administrează cinci perechi de șoareci (centrifugat + ser - subcutanat, serul sanguin + - în cavitatea abdominală). Animalele au fost observate pentru 3-4 prezenței Dnei.pri în materialul de toxină botulinică sunt ucise patru perechi de șoareci, cu excepția a două, care amestecul de material cu tipul de zer a fost introdus pentru a neutraliza efectul tipului de toxină omoloagă Când moartea tuturor șoarecilor se repetă cu un eșantion diluat în 10, 20, 100 de ori neutralizare biologică materialom.Postanovka cu definiția de tip toxina botulinică este importantă în selectarea ser adecvat pentru tratamentul specific al botulism. Prin urmare, atunci când emit un răspuns la detectarea de laborator toxină botulinică trebuie să indice în mod necesar laboratorul bacteriologic tip.Esli este eritrocitar diagnosticum toxina botulinică tipic serotipul antitoxică mai bine determinată folosind hemaglutinării indirectă. Este foarte specific, sensibil, este mult mai economic, mai rapid dă rezultate decât cele de neutralizare in vivo. Pentru a identifica toxina botulinică sau puteți utiliza metoda ELISA și imunoelektroforezu.Professor SM Minervin și personalul său în 1959, a dezvoltat o metodă rapidă pentru diagnosticul de botulism prin determinarea indicelui fagocitar. Ea se bazează pe faptul că toxina botulinică inhibă dramatic funcția fagocitară a leucocitelor. ser botulinica antitoxică omoloagă neutralizeaza acțiune leykotoksichnu exotoxina care nu se află sub influența syvorotok.Opyt heterologe folosind pose microdoses componentelor. Micile tuburi 5 pipetează Panchenkova un volum de citrat de sodiu (diviziuni de pipetă V4 la marcajul 75) și două volumul sanguin al pacientului. Tubul de testare 1 № a adăugat un volum de soluție de clorură de sodiu 0,85%, iar tuburile № 2, C, 4 și 5 - diagnostic Tipuri de ser botulinice corespunzătoare A, B, E, F în același volum. După amestecarea tuturor componentelor eprubetei plasat într-un termostat, timp de 30 min pentru a neutraliza posibile toxine în serul sanguin al pacientului și omolog cu toate tuburile se face într-un volum de cultură 1 miliard de suspensie de Staphylococcus aureus și din nou, plasat într-un incubator timp de 20 de minute pentru a finaliza procesul de fagocitoză. Deoarece conținutul fiecărui tub s-a preparat frotiuri colorate în conformitate cu Romanovsky-Gimza determina indicele fagocitare. Pentru a face acest lucru, contoriza numărul de absorbit coci 50 polinuklerah și împărțiți numărul respectiv 50. Dacă sângele pacientului este o toxină, performanța fagocitară în toate probele de sânge va fi scăzută, cu excepția indicatorului într-un tub de testare, în cazul în care tipul de toxină și ser omolog. În cazurile severe de indice fagocitar botulism ar putea scadea la zero. ser omoloagă, neutralizarea toxinelor, a restabili rata înapoi la normal. Metoda nu poate fi utilizată pentru detectarea toxina botulinică în alimente și materiale de autopsie.
Izolarea culturilor botulinice C.
Prin însămânțare materialul testat este emulsionat într-un porțelan mortar atât deasupra specificat. 10 ml din materialul este semănat în eprubetă de 4 ml cu 75-150 mediu svizhoregenerovanogo lichid (Kitt Tarotstsi, Hottinger, ciuperci-cazeină). Două flacoane sunt una încălzite la 60 ° C timp de 15 minute (pentru selectarea C. botulinum tip E), al doilea - 20 minute la 80 ° C. Două flacoane au fost incubate la 28 ° C (pentru tipurile E și F), altele - la 35 anaerostati ° C sau sub un strat de ulei de parafină 0,5 cm grosime. la 2, 4, 6 si a 10-a zi de flacoane, în cazul în care există o creștere. produc frotiurilor colorate Gram și mikroskopiruyut. Agentul cauzal al botulism are forma de tije mari Gram-pozitive cu spor subterminal oval-like pentru a defini tipul de tenis raketki.Chtoby toxină botulinică selectată din flacon 10-15 ml de lichid de cultură a fost centrifugat și dă reacția sa de neutralizare la șoareci albi sau RNGA seruri tipice botulinica așa cum este descris mai sus. pentru a obține colonii izolate pentru a izola o cultură pură a unei picături de lichid de cultură din flacon pentru a face suprafața agarului de sânge anaerobă și teancului hepatic sau frecat yannoy spatula agar secvențial în trei plăci. Culturile cultivate în anaerostatah. După 48 de ore de incubare, coloniile de studiu caracter. Pe agar cu sânge de colonie poate fi o formă neregulată, cu margini dantelate, sau netede, rotunde, cu zone de hemoliză în jurul lor. Diferite tipuri de C. botulinum pot forma colonii varia. La semănat bar cea mai mare înțepătură în diabet au forma agar colonii chechevichok sau zhmutochkiv vaty.Posle microscopie coloniile tipice ecranate pentru mediul lor Kitt Tarotstsi obținute din culturi pure și identificate prin proprietățile sale morfologice, culturale, biochimice și toxigene prin placare în mediu Hiss. Botulism bacillus ferment glucoză, galactoză, glicerină, maltoză, zaharoză, fructoză la acid și gaz, gelatina lichefiate, H2S izolate, nu formează indol. Pentru a diferenția de alte anaerobi botulinice C. folosi alte serotipuri testy.Opredelenie toxina botulinica se realizează prin intermediul reacției de neutralizare in vivo, prin ELISA sau RNGA.Metodika alocare C. perfingens intoxicații alimentare descrisă în infecția cu gaz secțiunea anaerob.
Prevenirea și tratamentul
Profilaxia vaccin nu este efectuată. Pentru ser polivalenta tratament protivobotulinicheskuyu este utilizat ca anticorp cu o toxină serotip nu neutralizează alte serotipuri. Acest ser este introdus și în scopul prevenirii persoanelor suspectate de întârziere a consumului de produse contaminate.
Boli infecțioase din Moscova
Preț: 1700 ruble.
Specialități: Gastroenterologie, terapie, hepatologie, boli infectioase.
Ryazantseva Marina Aleksandrovna
Prețul de admitere: 1700 ruble.
Asigurați-vă o întâlnire cu 1700 de ruble.
