Pentru confirmare (sau stabilirea) diagnosticarea bolii cromozomial folosind metode citogenetice. Cele mai importante sunt:
2.Metod determina cromatinei sex.
Permite examinarea cariotipului ca întreg (adică numărul și structura cromozomilor). Studiul cariotipului in divizarea celulelor în stadiul de metafază al mitozei, deoarece în această etapă, spiralized maxim cromozom și sunt clar vizibile în lumina microscopului. Prepararea cromozomilor metafază numit placa metafazică. Pentru diagnosticul durerii-shinstva metafază placă boli cromozomiale făcute din limfocitele din sângele periferic. De asemenea, utile sunt fibroblaste de piele, celule de măduvă osoasă. Pentru diagnosticul prenatal al celulelor cultivate lichid amniotic, vilozități coriale, placenta, țesutul embrionar.
Luați în considerare obținerea placă metafaza de limfocite din sânge ne-rifericheskoy.
Pentru karyotyping folosind sânge venos (I-2 ml) sau dintr-un deget. Sângele este plasat într-un mediu special-ing (Medium 199, "ac" etc.) cu fitohemaglutinină / PHA /. PHA este produs din plante leguminoase, provoacă transformarea imună a leucocitelor și diviziunea lor. spații de cultură schayut în termostat la 48-72chasa.
Pentru 2-3chasa până la sfârșitul culturii a fost adăugat colchicină (sau colcemid). Colchicina este obținut dintr-un izvor Colchicum plantă. Ea distruge fusul diviziune, și se oprește diviziunea celulară la metafaza. Următorul pas de fabricație celule hipotonice tratament soluție de medicament clorură de potasiu sau de azotat de sodiu. Celulele se umfla in hipotonic cromozom comunicare soluție interchromosomal rupte și plutesc liber în citoplasmă. Suspensia de celule a fost aplicată și fixată pe o lamă de sticlă. Atunci cand celulele si cromozomi uscate-fic Satoru sunt bine atașate pe sticlă. Medicamentul este adesea colorat cu Romanovsky-Giemsa. Aceasta culoare este numit simplu etsya sau de rutină. Toți cromozomi sunt colorate uniform pe întreaga lungime. colorat de rutină vă permite să calcula numărul de cromo-SOM, le distribuie la grupuri și pentru a detecta aberațiile cromozomiale.
Pentru diagnosticul fin de aberații cromozomiale de la mijlocul anilor '70 folosesc metoda „colorare diferentiata a cromozomilor.“
Cel mai frecvent utilizat G-culoare. Cromozomii înainte de culoare Coy Romanowsky-Giemsa pretratate cu proteaze (tripsina). Cromozomii după pictura devine dungi. Dovanie-alternanță de benzi luminoase și întunecate în mod individual, în fiecare pereche de crom-Som. Se crede că dungi închise la culoare -geterohromatinovye zone, și -euhromatinovye lumină.
Determinarea cromatinei sexuale. Sexual cromatinei elicoidală este X-cromozom. Unul dintre cromozomi X la femei este inactivat dezvoltarea embrionara na16-19sutki, iar celălalt rămâne activ. Spiralized cromozom X se găsește în nucleele celulelor somatice într-un întuneric smocuri, bine colorate.
Metode de determinare a cromatinei sex în pilitură bucale următoare. După pre-clătire cavității orale sute matologicheskim spatulei ia epiteliu așchierea interior suprafață obrajii molarilor sti. Răzuire este aplicat uniform pe o lamă de sticlă, colorate timp de 2 min atsetoarseinom pentru coverslip așa-acoperite. cerneală surplus este îndepărtat de pe hârtia de filtru Pomo-schyu. Celulele numarare sex-cromatină DYT Provo sub imersie în rotunde sau ovale cu nuclee nuclee intacte cu membrana clorhidric. In mod normal, femeile găsesc cromatinei sex în mai mult de 20% din celule, în timp ce pentru bărbați este în mod normal, absent.
Această metodă este utilizată pentru diagnosticarea bolilor cromozomiale asociate cu con-schimbare de cromozomi X.
Există, de asemenea, o metodă de determinare a Y-cromatinei, care este utilizat pentru a diagnostica sindromul polisomiei W.